非洲豬瘟病毒傳播媒介研究進(jìn)展及豬場(chǎng)高效消毒劑的選用

張靖菊 陳孝杰 張志博 李秀波徐 飛

（中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，國(guó)家飼料藥物基準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100081）

據(jù)文獻(xiàn)記載，非洲豬瘟于1921年在肯尼亞首次暴發(fā)，這種在豬種群間高度傳染的病毒，其強(qiáng)毒株的致死率高達(dá)100%[1]。在過去的10年間，非洲豬瘟病毒蔓延到高加索山脈、俄羅斯和東歐附近的許多國(guó)家，表現(xiàn)出遠(yuǎn)距離傳播的高風(fēng)險(xiǎn)[2]。2018年以前，非洲豬瘟從未在我國(guó)出現(xiàn)，但在2018年8月該病傳入我國(guó)，且短時(shí)間內(nèi)迅速擴(kuò)散全國(guó)，死亡率極高，造成豬肉價(jià)格的大幅上漲和養(yǎng)豬業(yè)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2019年1月至9月間，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織已經(jīng)公布了26個(gè)新暴發(fā)或正在流行非洲豬瘟病毒的國(guó)家，包括13個(gè)歐洲國(guó)家、10個(gè)亞洲國(guó)家以及3個(gè)非洲國(guó)家[3]。目前針對(duì)非洲豬瘟的有效疫苗尚未研制出，短期內(nèi)對(duì)于疫病發(fā)生地僅采取捕殺、處理和掩埋方式控制疫情，有效的生物安全防控是重中之重。

1 非洲豬瘟病毒病原學(xué)特點(diǎn)

非洲豬瘟病毒是非洲豬瘟病毒屬的雙鏈DNA病毒，也是唯一已知的DNA蟲媒病毒[3]。除了結(jié)構(gòu)、基因和復(fù)制特點(diǎn)與其他核質(zhì)大DNA病毒相似外，不同的是非洲豬瘟病毒擁有多層結(jié)構(gòu)和20面體的空間形態(tài)[4]。非洲豬瘟病毒有5層結(jié)構(gòu)[1]，可分為胞內(nèi)4層和胞外1層，從內(nèi)到外依次是包含遺傳信息的基因組、包裹住基因組的核心殼層、包裹住核心殼層的雙層內(nèi)膜、20面體的衣殼蛋白，最后是包裹在病毒外的外膜。外膜和大體積使其對(duì)外界環(huán)境抵抗力高，具體表現(xiàn)為pH耐受范圍是4～13，在56℃可存活超過1小時(shí)[5]，在0℃以下或者4℃時(shí)依然保持長(zhǎng)時(shí)間的感染力；可在血液、糞便和組織中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)半年；在感染的生的或者未完全煮熟的豬肉制品中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月，在凍肉中可存活數(shù)年[6]；60℃經(jīng)20 min或使用脂溶劑及部分消毒劑可滅活病毒[6]，并且在豬群中能夠快速高效傳播。這些特性均為針對(duì)非洲豬瘟的生物安全防控提供參考依據(jù)。

2 非洲豬瘟病毒傳播媒介研究進(jìn)展

非洲豬瘟的易感動(dòng)物是非洲疣豬、南非野豬、歐亞大陸野豬以及家豬。歐亞大陸野豬和野化豬對(duì)非洲豬瘟高度易感，感染后發(fā)病率和死亡率高低與病毒的毒力大小有關(guān)[8]，且可以通過直接或間接接觸將病毒傳給放養(yǎng)的家豬。但有研究表明，如果沒有機(jī)會(huì)再次被感染，非洲豬瘟病毒在野豬群中就會(huì)逐漸消失，因此歐亞野豬不能作為非洲豬瘟病毒的貯藏宿主[9]，僅在其被感染一段時(shí)間內(nèi)保持傳染力。

非洲豬瘟的傳播方式經(jīng)證實(shí)的有4種，首先是自然宿主間循環(huán)，常發(fā)生于非洲叢林，如疣豬-軟蜱循環(huán)，但在這種循環(huán)中疣豬不表現(xiàn)發(fā)病癥狀；其次是鈍緣蜱-家豬循環(huán)，多見于散養(yǎng)農(nóng)戶，與當(dāng)?shù)丨h(huán)境有關(guān)；然后家豬-家豬循環(huán)是非洲豬瘟在全世界范圍傳播的根因；最后是最新證實(shí)的野豬-棲息地循環(huán)[10]，常見于歐洲。在非洲豬瘟暴發(fā)的疫病區(qū)域內(nèi)，野豬與野豬之間，野豬與家豬甚至豬肉食品之間均能傳播[11]。

因此非洲豬瘟的傳染源除了被污染的飼料、器具外，不僅包括家豬、野豬這種終末宿主，還包括一些重要儲(chǔ)存宿主，常見有鈍緣軟蜱、蚊子、廄蠅等，而正是這些媒介使得病毒有再次暴發(fā)的危險(xiǎn)。下面將著重闡述這些傳播媒介的研究進(jìn)展。

2.1 軟蜱

非洲豬瘟最重要的傳播媒介是鈍緣軟蜱，屬于節(jié)肢動(dòng)物門蜱螨目蜱亞目蜱總科軟蜱科（Argasidae）鈍緣軟蜱屬（Ornithodoros）。軟蜱類節(jié)肢動(dòng)物的存在會(huì)加劇非洲豬瘟重新引入、傳播和維持的持續(xù)威脅，且病毒可在鈍緣軟蜱體內(nèi)停留5年之久[12]，其所在地成為自然疫源地的可能也較大。已知與非洲豬瘟相關(guān)的鈍緣軟蜱主要有3種：

2.1.1 非洲鈍蜱（O.Moubata）

非洲鈍蜱在非洲最常見，主要參與疣豬-軟蜱循環(huán)[13]，病毒可在非洲鈍蜱體內(nèi)復(fù)制，而且可經(jīng)卵傳播、經(jīng)期傳播和交配傳播[14]（經(jīng)卵傳播：一類病原體在飽血的蜱體內(nèi)經(jīng)一段發(fā)育之后，可以進(jìn)入蜱卵內(nèi)，當(dāng)蜱卵發(fā)育成幼蟲時(shí)，又可以進(jìn)入幼蟲的腸道進(jìn)行繁殖，使幼蟲在叮咬易感宿主時(shí)傳播病原體。經(jīng)期傳播：一類病原體可以從蜱的幼蟲階段經(jīng)若蟲階段發(fā)育繁殖至成蟲階段，成蟲的唾液腺內(nèi)具有對(duì)易感寄主有感染性的病毒），主要棲息于非洲疣豬的洞穴，在非洲叢林中持續(xù)存在，經(jīng)證實(shí)可叮咬家豬造成疫情暴發(fā)[11]。Ravaomanana等[15]人通過非洲豬瘟病毒與叢林豬之間以及非洲鈍蜱與馬達(dá)加斯加西北部家豬和野生豬之間的相互作用水平，來評(píng)估它們?cè)隈R達(dá)加斯加疾病流行病學(xué)中的潛在作用。對(duì)豬血清和組織樣本進(jìn)行了抗非洲豬瘟抗體、病毒DNA和非洲鈍蜱唾液抗原抗體的檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，該軟蜱可能在一個(gè)家豬生長(zhǎng)周期內(nèi)儲(chǔ)存病毒。

2.1.2 游走鈍蜱（O.Erraticus）

這種鈍蜱位于西班牙和葡萄牙[12]，非洲豬瘟病毒在其體內(nèi)只能經(jīng)期傳播。Afonso P等[13]人對(duì)野外捕獲的游走鈍緣蜱進(jìn)行非洲豬瘟病毒感染實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)病毒復(fù)制發(fā)生在試驗(yàn)感染后4周內(nèi)，幾乎100%的游走鈍蜱能在感染后20周內(nèi)保持高病毒滴度，但在第41周和第61周觀察到病毒滴度和感染率下降。該試驗(yàn)表明非洲豬瘟病毒能在游走鈍蜱中復(fù)制并持續(xù)存在，且在自然感染和試驗(yàn)感染中，病毒滴度減少都發(fā)生在較晚的時(shí)間。

2.1.3 塞氏鈍蜱（O.savignyi）

該軟蜱在實(shí)驗(yàn)室條件下對(duì)非洲豬瘟病毒的口腔感染很敏感，能將病毒維持至少106天[13]，叮咬豬能引起非洲豬瘟典型的急性感染病例，因此該種鈍緣蜱很可能是非洲豬瘟潛在的天然媒介[16]。

2.1.4 其他鈍緣軟蜱

此外研究發(fā)現(xiàn)，還有4種鈍緣軟蜱能在實(shí)驗(yàn)條件下感染非洲豬瘟病毒，分別為美洲的糙皮鈍蜱（O.coriaceus）、圖卡鈍蜱（O.turicata）、帕氏鈍蜱（O.parkeri）和波多鈍蜱（O.puertoricen）[17]，但這些鈍緣軟蜱是否能在自然條件下感染還未經(jīng)證實(shí)。

上述7種軟蜱在我國(guó)并未被追蹤到，但經(jīng)Climex軟件分析，軟蜱在我國(guó)云南、貴州、四川東部、重慶、陜西南部、湖南、湖北、江西東北部、安徽、河南、浙江、江蘇、山東、河北南部等地適宜生存，為高適宜潛在發(fā)生區(qū)[18]。我國(guó)目前分布有2種鈍緣蜱，即特突鈍緣蜱（O.tartakovskyi）和左氏鈍緣蜱（O.tholozani），主要集中在北部荒漠、半荒漠地區(qū)的新疆、陜西和山西[19]，其中左氏鈍緣蜱可能是非洲豬瘟病毒的潛在媒介。

截至2020年3月，我國(guó)發(fā)生了3起共計(jì)10頭野豬感染非洲豬瘟病例，雖未證實(shí)有軟蜱參與傳播，但鑒于國(guó)內(nèi)氣候高度適宜鈍緣軟蜱生長(zhǎng)[20]，且存在適宜非洲豬瘟病毒生存的軟蜱種類，因此為防止家豬-軟蜱循環(huán)，或者野豬、野化豬帶蜱遷徙而使非洲豬瘟病毒持續(xù)存在，應(yīng)長(zhǎng)期監(jiān)視加預(yù)防。

2.2 其他宿主

其他小型嚙齒動(dòng)物、蚊子、廄蠅等也都可通過接觸感染豬傳播非洲豬瘟病毒[21]。廄蠅在吸食感染非洲豬瘟病毒的豬血后，可在24 h內(nèi)機(jī)械傳染病毒，有研究表明病毒能在廄蠅體內(nèi)存活至少2天，在實(shí)驗(yàn)中給廄蠅喂食感染非洲豬瘟病毒的血液，12 h后其體內(nèi)含有可繁殖的病毒，在喂食后3天內(nèi)仍可以檢測(cè)到病毒核酸，而且僅1只廄蠅中所含的劑量，在豬身上就足以產(chǎn)生臨床癥狀[22]。最新研究發(fā)現(xiàn)水蛭也是潛在宿主[23]，在試驗(yàn)中，易感豬在經(jīng)口攝入養(yǎng)殖60～80天的水蛭（吸食過非洲豬瘟病豬血液）后仍可感染發(fā)病，并且潛伏期明顯變長(zhǎng)，表明水蛭等可作為病毒的儲(chǔ)存宿主。

3 針對(duì)非洲豬瘟病毒及其傳播媒介的消毒防控工作

3.1 鈍緣軟蜱的消毒防控

對(duì)于鈍緣軟蜱的消毒防控最重要的是前期監(jiān)測(cè)，分2個(gè)方面，一是檢測(cè)軟蜱中的非洲豬瘟病毒，因?yàn)檐涷绲某上x和第5個(gè)若蟲期是檢測(cè)病毒感染的最佳時(shí)期[24]。二是檢測(cè)豬場(chǎng)中是否存在軟蜱，可用血清學(xué)方法檢測(cè)豬血液中是否存在抗該蜱的抗體[25]。針對(duì)傳播媒介的防控結(jié)束后則是豬場(chǎng)滅蜱防控[26]。目前針對(duì)蜱蟲的化學(xué)殺蟲劑包括N·二乙基·甲苯酰胺以及其他一些氯化烴類、有機(jī)磷酸酯類、氨基甲酸鹽和擬除蟲菊酯類藥物[27]，但其中能用于豬場(chǎng)的僅占一小部分。廣東省畜牧獸醫(yī)局組織有關(guān)專家制定并于2018年9月11日發(fā)布的《防控非洲豬瘟消毒殺蜱流程與用藥指引》指出目前可用于養(yǎng)豬場(chǎng)、生豬批發(fā)市場(chǎng)和屠宰場(chǎng)等對(duì)蜱有效的藥物為40%辛硫磷澆潑溶液、氰戊菊酯溶液等[28]。非化學(xué)殺蟲劑如麻瘋樹、番荔枝、長(zhǎng)葉、菊芋、角礫、桉樹、川楝、百里酚等均具有一定的蜱蟲殺滅效果，因而也在積極地研究中[29]。

事實(shí)上，殺蟲劑的滅蜱效果并不好，因?yàn)橛写罅康尿缬己腿粝x藏的較深，不易被發(fā)現(xiàn)，所以軟蜱僅暫時(shí)性減少，而抗蜱疫苗是優(yōu)選。普通殺蟲劑極易產(chǎn)生耐藥性，通過抗蜱疫苗[30]進(jìn)行免疫控制是一種替代傳統(tǒng)殺蟲劑的有吸引力的選擇，但面臨諸多挑戰(zhàn)，目前耐多種殺蟲劑蜱毒株庫(kù)需要被檢測(cè)和建立，多項(xiàng)后續(xù)問題亟待解決。

3.2 非洲豬瘟消毒劑的選擇

非洲豬瘟病毒能夠進(jìn)行遠(yuǎn)距離跳躍性傳播，這與病毒強(qiáng)大的抵抗力、獨(dú)特的蟲媒循環(huán)以及交通運(yùn)輸?shù)纫蛩胤植婚_[31]。研究表明該病毒并不能通過遠(yuǎn)距離氣溶膠傳播，直接接觸或間接接觸是主要途徑，病毒附著于各種媒介、人員、車輛、器具、飼料、墊料，甚至水源，從而遠(yuǎn)距離伺機(jī)接觸易感動(dòng)物[32]。

因此，豬場(chǎng)生物安全防控除了前文所述的切斷傳播媒介以外，阻止場(chǎng)外病毒的傳入才是未來多數(shù)豬場(chǎng)復(fù)養(yǎng)的關(guān)鍵，這其中消毒工作便是重中之重[33]。2020年2月29日農(nóng)業(yè)農(nóng)村部關(guān)于印發(fā)《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案（2020年版）》的通知中針對(duì)豬場(chǎng)道路、車輛、生產(chǎn)加工區(qū)、生活區(qū)和人員等環(huán)節(jié)推薦了相應(yīng)的消毒劑大類，但鑒于市面上消毒劑種類繁多，對(duì)于非洲豬瘟病毒而言高效安全的消毒劑推薦有待進(jìn)一步商榷。以下將重點(diǎn)闡述針對(duì)非洲豬瘟病毒的高效消毒劑及其用途[34]。

3.2.1 過氧化物類

過氧化物類消毒劑可使菌體內(nèi)活性基團(tuán)氧化而起殺滅作用，蛋白質(zhì)合成受阻，酶、核酸發(fā)生致死性結(jié)構(gòu)變化，主要包括過氧乙酸、雙氧水、二氧化氯、過氧化氫、臭氧等。其中二氧化氯殺菌能力是次氯酸類的3～5倍，對(duì)病原微生物具有極強(qiáng)的殺滅作用，并且具有無殘留毒性、對(duì)動(dòng)物機(jī)體危害小、不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)，是世界衛(wèi)生組織認(rèn)證的A1級(jí)高效消毒劑，加上非洲豬瘟病毒可通過水源傳播，二氧化氯又是高效理想的飲水消毒劑，所以其完全適用于非洲豬瘟病毒的防控。主要適用于水槽、飲水消毒。

3.2.2 碘類

碘類消毒劑包括聚維酮碘、聚醇醚碘、碘酸溶液等[35]。碘的沉淀作用和鹵化作用能夠解決一般消毒劑的滲透性問題，它能與蛋白質(zhì)氨基酸鏈上的羥基、氨基、烴基、巰基結(jié)合導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，發(fā)生鹵化，從而使病毒失去生物活性。非洲豬瘟病毒的pH耐受范圍在4～13，而碘類消毒劑殺菌能力受pH影響較小，由碘、磷酸、硫酸、表面活性劑制成的碘酸復(fù)合溶液就可以在酸性條件下有效殺滅病毒，因此碘酸溶液便可作為非洲豬瘟的高效消毒劑，適用于車輛及運(yùn)輸工具、場(chǎng)地消毒、洗手盆、欄舍常規(guī)消毒等。

3.2.3 含氯類

含氯消毒劑包括無機(jī)氯化合物（如次氯酸鈉、次氯酸鈣）[36]、有機(jī)氯化合物（如二氯異氰尿酸鈉、三氯異氰尿酸、氯銨T等）。這類消毒劑可殺滅各種微生物，包括細(xì)菌繁殖體、病毒、真菌、結(jié)核桿菌和抵抗力最強(qiáng)的細(xì)菌芽孢[37]。對(duì)非洲豬瘟病毒而言是高效消毒劑，但缺點(diǎn)是不穩(wěn)定，容易受光、熱和潮濕影響，喪失有效成分，豬場(chǎng)消毒時(shí)保證2.3%有效氯30 min，適用于車輛及運(yùn)輸工具、洗手盆、場(chǎng)地消毒等。

3.2.4 強(qiáng)堿類

強(qiáng)堿類消毒劑主要包括NaOH和CaO，高濃度的OH-能水解菌體蛋白和核酸，使酶系統(tǒng)和細(xì)胞結(jié)構(gòu)受損，從而對(duì)細(xì)菌和病毒有很強(qiáng)的殺滅作用，高濃度可以殺滅芽孢[36]。養(yǎng)殖場(chǎng)常用2%～3%燒堿加10%～20%石灰乳消毒及刷白墻壁、屋頂、地面等，配制燒堿溶液時(shí)提高溫度、加入食鹽，消毒效果更佳。該類消毒劑對(duì)非洲豬瘟病毒屬于高效消毒劑，適用于大門、更衣室、腳踏地、消毒池、生產(chǎn)線道路、生活區(qū)、環(huán)境以及空欄消毒。

3.2.5 醛類

醛類消毒劑包括甲醛、環(huán)氧乙烷、戊二醛、戊二醛癸甲溴銨等[38]，其中戊二醛的作用是甲醛的10倍，且相對(duì)安全、低毒，是國(guó)際食品安全及公共衛(wèi)生組織公認(rèn)的單一成分消毒劑中消毒能力最強(qiáng)的一類。戊二醛能通過醛基與氨基、羧基、羥基和巰基產(chǎn)生交聯(lián)作用，肽聚糖、RNA、DNA、細(xì)胞膜功能酶和蛋白質(zhì)喪失活性而使微生物滅亡[36]。戊二醛在酸性條件下，更加穩(wěn)定，有效戊二醛含量充足。醛類消毒劑對(duì)非洲豬瘟病毒屬于高效消毒劑，但略帶毒性，適用于車輛及運(yùn)輸工具、場(chǎng)地消毒、洗手盆、欄舍常規(guī)消毒等。

3.2.6 酚類

酚類消毒劑有苯酚（鄰苯基苯酚）、煤酚皂溶液（來蘇爾）、復(fù)合酚等[39]。酚類消毒劑因其親脂性對(duì)于有囊膜病毒效果很好，因此是非洲豬瘟病毒的高效滅菌劑，如3%鄰苯基苯酚（30 min）可滅活病毒，但毒性較大，對(duì)皮膚有刺激性，且有惡臭，加之對(duì)環(huán)境污染較大，正逐步受到限制，適用于車輛及運(yùn)輸工具、場(chǎng)地消毒、欄舍常規(guī)消毒、空欄消毒等。

除此之外有2個(gè)重要環(huán)節(jié)的消毒值得注意，第一是飼料消毒，可用紫外燈照射2～3 h。第二是帶豬消毒，建議使用聚維酮碘、過硫酸氫鉀、檸檬酸、二氯異氰尿酸鈉、溴氯異氰尿酸鈉等。具體藥物也可參考美國(guó)環(huán)境保護(hù)總署批準(zhǔn)用于非洲豬瘟病毒的消毒劑[40]。

4 展望

研究非洲豬瘟病毒的流行病學(xué)特點(diǎn)和蟲媒特性是一種長(zhǎng)遠(yuǎn)準(zhǔn)備。一方面，養(yǎng)殖場(chǎng)（戶）要強(qiáng)化生物安全防護(hù)措施，避免飼養(yǎng)的生豬與野豬接觸。另一方面，對(duì)豬-蜱循環(huán)也應(yīng)當(dāng)引起重視，在鈍緣軟蜱分布地區(qū)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)的養(yǎng)豬場(chǎng)戶要采取殺滅鈍緣軟蜱等控制措施，從而避免像非洲國(guó)家百年間持續(xù)復(fù)發(fā)循環(huán)的被動(dòng)局面。此外，抗蜱殺蟲劑和抗蜱疫苗還有待研究，耐多種殺蟲劑蜱毒株庫(kù)也需要被檢測(cè)和建立。

目前，我國(guó)非洲豬瘟防控成效顯著，但原本較大的污染面使病毒趨向于持續(xù)存在，對(duì)抗非洲豬瘟成了我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)長(zhǎng)期而艱巨的任務(wù)，加之并無能夠投入生產(chǎn)使用的有效疫苗，制定完善的消毒防控措施對(duì)國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)來說尤為重要。相信不久的將來，豬場(chǎng)復(fù)養(yǎng)會(huì)一步步提上日程，國(guó)內(nèi)養(yǎng)豬業(yè)定能恢復(fù)往日榮光并更快發(fā)展。