地榆中活性成分及其抗腫瘤作用研究進(jìn)展

宛春雷　劉棟奇

地榆中活性成分及其抗腫瘤作用研究進(jìn)展

宛春雷劉棟奇

（牡丹江師范學(xué)院黑龍江牡丹江157000）

文章通過檢索國內(nèi)外有關(guān)地榆的研究文獻(xiàn)，綜述了地榆的化學(xué)成分與藥理活性，總結(jié)了其活性成分的抗腫瘤作用。研究證明地榆具有一定的抗腫瘤作用，這為進(jìn)一步開發(fā)并將其應(yīng)用于臨床治療腫瘤的新藥提供了參考。

地榆；鞣質(zhì)；抗腫瘤

地榆為薔薇科植物地榆或長(zhǎng)葉地榆的干燥根，由于地榆具有抗寒、耐旱、喜光等適應(yīng)性較強(qiáng)的特點(diǎn)，所以其主要生長(zhǎng)在山坡草地或灌叢中，其海拔在30～3 000 m左右的地區(qū)[1]。地榆性苦，味酸、澀，微寒。歸肝、大腸經(jīng)。傳統(tǒng)醫(yī)家多利用其能解毒斂瘡和止血涼血的功效，用來治療血熱出血癥[2]。

地榆中的組分復(fù)雜，其有效成分主要有鞣質(zhì)、黃酮和三萜皂苷類化合物，其中鞣質(zhì)的成分活性較強(qiáng)，研究也較深入，地榆中鞣質(zhì)不僅對(duì)心血管疾病有療效，還在抗腫瘤、抗免疫缺陷、提高免疫力、改善肝腎功能等方面有一定的作用，尤其是在抗腫瘤領(lǐng)域，有很大的研發(fā)空間，文章主要對(duì)地榆中鞣質(zhì)的性質(zhì)及其抗腫瘤作用進(jìn)行歸納總結(jié)。

1 鞣質(zhì)提取分離及含量測(cè)定

鞣質(zhì)又稱單寧（Tannins），是存在于自然界的一類比較復(fù)雜的多元酚類化合物，其提取方法多種多樣，經(jīng)典的提取方法是溶劑提取法，其他提取方法如超聲波法、微波法、超臨界流體萃取、膜分離、半仿生等也大大提高了提取效率和純度，為鞣質(zhì)類成分進(jìn)一步分離和純化提供了良好的基礎(chǔ)[3-4]。而鞣質(zhì)的分離方法也多種多樣，包括分級(jí)沉淀法、活性炭吸附法、大孔樹脂吸附法、膜分離法、離子交換法等。

鞣質(zhì)的經(jīng)典含量測(cè)定方法有很多種，如重量法、容量法、比色法等。較常用的方法有皮粉法、高錳酸鉀法、干酪素法、絡(luò)合量法。紫外-可見光光度法較重量法具有操作簡(jiǎn)便、成本低廉、無化學(xué)試劑傷害等優(yōu)點(diǎn)，且該測(cè)定方法方便實(shí)用，由于鞣質(zhì)在760 nm左右有較強(qiáng)吸收，故其精密度較高，目前最常用的方法就是以沒食子酸為對(duì)照品，利用紫外分光光度法測(cè)定鞣質(zhì)的含量，《中華人民共和國藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國藥典》）2020 版第四部采用的方法就是紫外分光光度法[5]。另外，以沒食子酸為對(duì)照品利用高效液相色譜法測(cè)定其鞣質(zhì)含量準(zhǔn)確度和精密度更高[6-7]。

2 地榆鞣質(zhì)

2.1 地榆中鞣質(zhì)的含量

地榆內(nèi)部包含縮合和可水解兩種鞣質(zhì)。可水解鞣質(zhì)根據(jù)構(gòu)成酸的不同，又分為有沒食子酸鞣質(zhì)和逆沒食子酸鞣質(zhì)類兩種，經(jīng)過水解就會(huì)分解為酸和糖。地榆中的主要活性成分就是鞣質(zhì)，故地榆中鞣質(zhì)的含量也是評(píng)價(jià)地榆質(zhì)量高低的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于地榆中鞣質(zhì)含量的測(cè)定，早在20世紀(jì)90年代竺葉青等利用高錳酸鉀法來測(cè)定地榆中鞣質(zhì)的含量，測(cè)得3種地榆種鞣質(zhì)的平均含量為9.13 %，此種方法同皮粉法相似，但是誤差較大[8]；王坤參照《歐洲藥典》和《中國藥典》中記錄的測(cè)定鞣質(zhì)含量的方法，用水做溶劑采用浸漬法進(jìn)行提取，采用磷鉬鎢酸-干酪素比色法，以沒食子酸為對(duì)照測(cè)定地榆中不同產(chǎn)地鞣質(zhì)的平均含量為11.16 %[9]；姜貴全以兩種提取溶劑乙醇和丙酮作為地榆鞣質(zhì)的提取溶劑，考察了提取溶劑的濃度、藥材粒度、提取時(shí)間，料液比、回流次數(shù)等因素，最終確定60.00 %的乙醇作為提取溶劑，用紫外分光光度法來測(cè)定地榆中總鞣質(zhì)含量為8.85 %[10]；陳斯瑋利用中國藥典的分析方法紫外分光光度法中的磷鉬鎢酸-碳酸鈉比色法得到的鞣質(zhì)的提取率為15.50 %[11]；徐佳麗以沒食子酸為對(duì)照品，用HPLC法測(cè)定其含量，其方法較紫外分光光度法比準(zhǔn)確度和精確度都進(jìn)一步提高，測(cè)得的沒食子酸含量為（3.71 ±0.34 ）%[7]；武曉丹和宛春雷、鄭瑩、劉暢[12 -15 ]選擇用8倍量的丙酮-水70 %復(fù)合溶劑作為提取溶劑提取不同中藥中的鞣質(zhì)，以上就是鞣質(zhì)含量測(cè)定的方法，地榆中鞣質(zhì)的提取方法選用溶劑提取法，溶劑通常選擇水、乙醇和丙酮，鞣質(zhì)含量測(cè)定的方法主要還是以《中國藥典》收錄的紫外分光光度法，各個(gè)產(chǎn)地地榆根部的總鞣質(zhì)的含量平均值在10.00 %左右。

在鞣質(zhì)的提取和含量測(cè)定的眾多方法中，皮粉法被收錄于英國藥典，應(yīng)用較廣泛，但是選擇性差、準(zhǔn)確性低；干酪素法優(yōu)于皮粉法，在鞣質(zhì)的含量測(cè)定中也多有應(yīng)用；而紫外分光光度法專屬性強(qiáng)、操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、故其早被收錄于《中國藥典》的第四部之中。

2.2 地榆鞣質(zhì)的抗腫瘤作用

近十年來全國惡性腫瘤發(fā)病約300萬人，死亡占居民全部死因的23.91 ％，對(duì)抗腫瘤藥物的研究始終是人類所面臨的難題。隨著人們對(duì)鞣質(zhì)分離、純化技術(shù)的提高，已經(jīng)闡明了大量裸質(zhì)單體分子結(jié)構(gòu)，為單體成分抗腫瘤作用的研究提供了保證。初步揭示了鞣質(zhì)分子結(jié)構(gòu)與抗腫瘤作用的構(gòu)效關(guān)系。Kashiwada等用體外細(xì)胞培養(yǎng)方法觀察不同種類鞣質(zhì)對(duì)腫瘤細(xì)胞株的毒性影響。以半數(shù)有效劑量（ED30）表示抗腫瘤作用。實(shí)驗(yàn)顯示，沒食子酰鞣質(zhì)中部分含有奎尼酸核的鞣質(zhì)有一定的抗腫瘤作用[16 ]。胡毅利用MTT法及流式細(xì)胞儀分析法分析地榆鞣質(zhì)對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞的作用，并用光鏡和電鏡進(jìn)行觀察，結(jié)果顯示經(jīng)地榆鞣質(zhì)作用后，其對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721有明顯的抑制作用，為地榆鞣質(zhì)應(yīng)用于臨床提供了依據(jù)[17-18]。宛春雷考察了地榆鞣質(zhì)成分對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2的作用，結(jié)果顯示其地榆中鞣質(zhì)成分以濃度依賴性方式使肝癌細(xì)胞株HepG2的增殖受到抑制并促使其凋亡[19]。由以上研究可知，地榆中鞣質(zhì)成分對(duì)肝癌細(xì)胞有一定的抑制作用，未來可以為其在治療肝癌的研究中提供臨床依據(jù)。

據(jù)相關(guān)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)，患者在腫瘤放、化療過程中均會(huì)出現(xiàn)骨髓抑制的現(xiàn)象，從而導(dǎo)致出現(xiàn)白細(xì)胞減少癥，臨床常出現(xiàn)嚴(yán)重的感染和出血。如能在腫瘤放、化療過程中，保護(hù)骨髓造血功能、使白細(xì)胞數(shù)升高，將會(huì)大大提高放、化療藥物的有效性。因?yàn)楣撬枰种频淖钔怀霰憩F(xiàn)就是白細(xì)胞減少，低于正常值，這樣會(huì)降低人體免疫力，臨床會(huì)出現(xiàn)感染和出血，故治療腫瘤放、化療過程中所引起的骨髓造血功能抑制，保護(hù)骨髓造血功能，升高白細(xì)胞才是關(guān)鍵。

楊金輝研究了地榆鞣質(zhì)對(duì)環(huán)磷酰胺致白細(xì)胞減少癥的影響，結(jié)果顯示其的升高白細(xì)胞數(shù)量和骨髓DNA含量具有顯著作用[20]。熊永愛也做了類似的相關(guān)研究，其結(jié)果也表明地榆鞣質(zhì)能顯著拮抗小鼠的骨髓抑制[21 ]。

在臨床方面，地榆升白片已被證實(shí)在抗腫瘤的過程中，是不可或缺的輔助用藥，其在預(yù)防與治療放、化療引起骨髓抑制方面具有一定的療效，該藥在腫瘤放、化療期間使用有較高的臨床價(jià)值。經(jīng)蘇柘僮關(guān)于白細(xì)胞減少癥的研究中得出地榆升白片的物質(zhì)基礎(chǔ)以地榆鞣質(zhì)為主，故地榆升白片在腫瘤治療的過程中的輔助作用亦可看作是地榆鞣質(zhì)的功效。經(jīng)豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)證明：地榆升白片可以提高肺癌[22-23]、胃癌[24]、宮頸[25-26]、白血病[27]、結(jié)腸癌[28]等常見癌癥都有增加白細(xì)胞數(shù)量，恢復(fù)外周血象，提高血小板數(shù)量、改善臨床癥狀。

3 討論

通過查閱地榆鞣質(zhì)的提取、分離及其抗腫瘤作用和治療腫瘤作用的相關(guān)文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，地榆中的鞣質(zhì)的含量均值在10.00 %以上，其含量測(cè)定的方法以紫外分光光度法為主，地榆鞣質(zhì)通過抑制腫瘤細(xì)胞的增值率，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞內(nèi)ROS等機(jī)制抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，而以地榆鞣質(zhì)作為藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的地榆升白片可以顯著增高腫瘤患者的白細(xì)胞數(shù)，在臨床治療各種類型的惡性腫瘤過程中都起到了重要的作用。

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牡丹江師范學(xué)院青年一般項(xiàng)目(NO：QY2014011)；黑龍江省大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)踐項(xiàng)目(NO：201710233036)；黑龍江省教育廳備案項(xiàng)目(NO：1354PT007)

宛春雷

R285

A

2095-1205(2020)04-71-03

10.3969/j.issn.2095-1205.2020.04.35