影響農(nóng)藥殘留快速檢測準(zhǔn)確性的因素及對策

孫 濤，王廣麗，劉建洋，張子臣

(山東標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)有限公司，山東 濟南 250101)

2004年國家發(fā)布實施了《GB/T 5009.199—2003 蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》方法，此后農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)逐步應(yīng)用到生產(chǎn)生活的各個領(lǐng)域。農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)相對于實驗室檢測技術(shù)具有低成本、短周期的特點，在農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)、運輸、存儲、銷售等多個環(huán)節(jié)有明顯應(yīng)用優(yōu)勢。針對農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)銷售周期短的特性，農(nóng)藥殘留快速檢測可在農(nóng)產(chǎn)品到達(dá)餐桌之前，對其農(nóng)藥殘留風(fēng)險進(jìn)行預(yù)判，這也是該技術(shù)近年來得到高速發(fā)展的主要原因。在實際工作中，農(nóng)藥殘留快速檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性會受到檢測儀器、檢測試劑、環(huán)境溫度、前處理操作和時間控制等幾方面影響，為確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，筆者根據(jù)多年工作實踐針對性提出解決對策。

1 檢測儀器的影響

農(nóng)藥殘留快速檢測儀是針對我國國情和農(nóng)產(chǎn)品市場監(jiān)管需求而研發(fā)的專用檢測儀器，其是按國家標(biāo)準(zhǔn)《GB/T 5009.199—2003》中的酶抑制法對蔬菜、水果中有機磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量進(jìn)行準(zhǔn)確、快速檢測。目前，市售的農(nóng)藥殘留快速檢測儀經(jīng)歷了幾次更新?lián)Q代后，在輕量化、便攜性方面取得了較大進(jìn)步，但其核心部件沒有發(fā)生變化，仍然是分光光度計。因此，要保證儀器檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要對分光光度計進(jìn)行查驗和校準(zhǔn)。查驗是指在檢測前先對檢測儀器各個通道的吸光度能量值進(jìn)行重復(fù)性、穩(wěn)定性檢查，確保能滿足檢測要求，如果發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時處理，避免因儀器自身原因造成的準(zhǔn)確性偏差。校準(zhǔn)是指在檢測前用標(biāo)準(zhǔn)樣品對儀器準(zhǔn)確度進(jìn)行校準(zhǔn)，有條件的可以多做幾次空白試驗和對比試驗，確保儀器各項參數(shù)在合理范圍。

2 檢測試劑的影響

農(nóng)藥殘留快速檢測試劑的效能是影響檢測結(jié)果的主要因素。要保證農(nóng)藥殘留快速檢測的準(zhǔn)確性，就要嚴(yán)格按照《GB/T 5009.199—2003》規(guī)定進(jìn)行試劑配置，需要儲存保管試劑的，儲存條件要符合標(biāo)準(zhǔn)要求。其中，顯色劑、底物配制成溶液后要嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)要求冷藏保存，切勿冷凍儲存。乙酰膽堿酯酶作為農(nóng)藥殘留快速檢測的核心試劑，其活性能否達(dá)到實驗要求決定農(nóng)藥殘留快速檢測的準(zhǔn)確性，因此每次檢測前必須先做空白實驗，保證3 min的吸光度變化值△A0在0.3以上才檢測，確保酶試劑的活性符合實驗要求。

3 環(huán)境溫度的影響

乙酰膽堿酯酶是農(nóng)藥殘留快速檢測的核心試劑。從反應(yīng)原理看，有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥與乙酰膽堿競爭性作用于膽堿酯酶，即膽堿酯酶與乙酰膽堿結(jié)合催化乙酰膽堿生成乙酰和膽堿，另外膽堿酯酶與有機磷農(nóng)藥結(jié)合而阻斷反應(yīng)進(jìn)行。因此，利用膽堿酯酶催化反應(yīng)的抑制法可快速檢測有機磷農(nóng)藥、氨基甲酸酯農(nóng)藥的殘留。乙酰膽堿酯酶的活性對環(huán)境溫度敏感，37℃是其發(fā)揮活性的最佳溫度，過高或者過低都會影響其活性，進(jìn)而影響檢測的準(zhǔn)確性，所以每次檢測之前幾種試劑都要先進(jìn)行解凍。試劑從冷藏箱取出，待溫度恢復(fù)到37℃左右才能進(jìn)行檢測。當(dāng)環(huán)境溫度無法滿足實驗要求時，檢測要在37℃恒溫水浴中進(jìn)行，以保證乙酰膽堿酯酶的最佳活性溫度。

4 前處理操作的影響

樣品前處理也是決定農(nóng)藥殘留快速檢測成敗的關(guān)鍵因素。合理準(zhǔn)確的樣品前處理方式，可以最大程度減少果蔬汁自身屬性對準(zhǔn)確性的影響，因為有些蔬菜、水果汁液中一些成分會對乙酰膽堿酯酶產(chǎn)生作用，還有些蔬果汁液顏色較深，也會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此前處理階段要采取相應(yīng)措施避免這些果蔬的汁液滲出。如韭菜、香菜等細(xì)莖類蔬菜可以采取整體浸泡的方式提取，番茄、蘑菇等體積較大的球形蔬菜可以用緩沖液反復(fù)洗脫的方式提取。

5 時間控制的影響

能否準(zhǔn)確控制反應(yīng)時間是農(nóng)藥殘留快速檢測成敗的核心，這不僅需要精準(zhǔn)掌握幾種試劑加入的時間間隔，還要盡可能縮短操作時間，保證快速準(zhǔn)確添加試劑，減少人為因素對結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。若條件允許，選擇對照實驗和樣品測試實驗?zāi)軌蛲竭M(jìn)行的檢測儀器，如不能同步進(jìn)行，試劑反應(yīng)時間、環(huán)境溫度、乙酰膽堿酯酶活性等變化因素都會對結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響。具備同步檢測功能的農(nóng)殘檢測儀可以最大限度規(guī)避這些不利因素的影響，進(jìn)而提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

綜上所述，農(nóng)藥殘留快速檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性受多方面因素影響，在實際工作中要綜合考慮上述因素，減少誤差、精準(zhǔn)控量、準(zhǔn)確控制反應(yīng)時間，避免各種不利條件的影響，確保農(nóng)藥殘留快速檢測工作準(zhǔn)確順利進(jìn)行。