松茸多糖的研究進展

李萬輝，楊什補，茍梅花，李 清，鄧 麗，葉兵兵

（四川民族學院 農(nóng)學院，四川 康定 626001）

松茸屬學名松口蘑，隸屬擔子菌亞門、口蘑科，我國的主要產(chǎn)區(qū)在云南省、四川省及我國的東北和西藏地區(qū)。近年來，國內(nèi)外研究表明，松茸子實體主要含有多糖、揮發(fā)性成分、氨基酸、甾類、萜類、脂肪酸以及多種酶等多種化學活性物質(zhì)成分，其中松茸多糖具有良好的藥用價值，在其抗腫瘤、抗輻射、抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)免疫力、降血糖等方面有很好的治療效果。

1 松茸多糖的提取

目前松茸多糖的提取方法各式各樣,主要分為子實體菌絲體和菌絲體的多糖提取，比較傳統(tǒng)的提取方法有熱水浸提法、微波提取法、超聲波提取法和堿提法；應(yīng)用水解酶提取方法有復合酶提取法和高速酶切提取法。在對松茸提取多糖時，首先要經(jīng)過預(yù)處理，其包括挑選雜質(zhì)、烘干、粉碎、過篩等一系列過程，來提高對松茸的利用率，減少對原料的浪費，且外部人為可控條件對松茸多糖的提取也有顯著影響，其包括合理的溫度、料液比、提取時間、超聲波功率、萃取介質(zhì)等。

1.1 熱水浸提法

劉瑋等[1]采用熱水浸提法提取松茸多糖，通過多次正交試驗得到浸提溫度為90℃，浸提時間為3 h，浸提次數(shù)為3次，料水比1∶30 條件下松茸多糖提取率最高，利用蛋白質(zhì)在三氯乙烷等有機溶劑中變性的特點，將提取液與Sevage 試劑（氯仿：正丁醇=5∶1）5∶1 混合，振蕩，離心，變性后的蛋白質(zhì)介于提取液與Sevage 試劑交界處，除去蛋白質(zhì)，合并提取液，用85%乙醇醇沉松茸多糖，經(jīng)低溫凍干，獲得松茸多糖，用苯酚- 硫酸法測定多糖含量計算多糖的得率多糖得率為12.24%。

1.2 微波提取法

梁婷等[2]采用微波提取法提取松茸多糖，用微波對松茸子實體進行預(yù)處理，將其完全粉碎、過篩。經(jīng)多次正交實驗，在微波功率560 W，萃取時間30 min，料液比1∶30 條件下，提取松茸多糖，其提取率為19.70%，且多糖純度高達92.74%。微波提取法能夠有效地提高多糖得率并極大縮短其提取時間，是一種較為有效的方法，具有良好的應(yīng)用價值。

1.3 超聲波提取法

郝繼偉等[3]采用超聲波提取法提取松茸多糖，用超聲波對松茸子實體進行預(yù)處理，將其完全粉碎、過篩。經(jīng)多次優(yōu)化提取多糖條件，在超聲波功率80 W，萃取時間25 min，料液比1∶31 條件下，提取溫度為86℃，提取松茸多糖，其提取率為11.20%，且多糖純度高達84.70%。在單因素試驗基礎(chǔ)上，進行多次試驗。結(jié)果顯示提取溫度、時間和水料比對多糖提取率均有顯著影響，且提取時間與提取溫度之間存在交互作用、相互影響。經(jīng)多次試驗比較，提取溫度、時間和水料比與松茸多糖提取率之間的有著極顯著的量關(guān)系，可用于實際生產(chǎn)預(yù)測。用超聲波提取多糖劣與用微波提取多糖，由此可見，微波提取技術(shù)是一種比較可行有效的方法，具有很好的應(yīng)用價值。

1.4 高速酶切提取法

劉曉慶等[4]將松茸子實體通過高速酶切提取法提取松茸多糖，將松茸子實體經(jīng)95%乙醇脫脂干燥后粉碎，在剪切速率2 200 r/min 下剪切6.6 min，sevage 法脫蛋白，95%乙醇沉淀，干燥獲得松茸多糖，實際得率為12.33%。

1.5 復合酶提取法

王艷等[5]采用復合酶提取法提取松茸多糖，在經(jīng)過預(yù)處理的松茸中先后加入復合酶水解（果膠酶∶纖維素酶∶木瓜蛋白酶=140∶3∶400），超聲功率為130W 輔助提取20 min，松茸多糖提取率為14.51%。

1.6 堿提法

李健等[6]采用堿提法提取松茸多糖，將松茸子實體粉碎、過篩，采用質(zhì)量分數(shù)為7%NaoH 加入松茸，微波功率640 W輔助提取，獲得松茸粗多糖，得率為13.20%。

2 松茸多糖的作用

2.1 松茸多糖的抗腫瘤作用

近年來，對松茸多糖的抗腫瘤活性機理研究是一個熱點，研究表明松茸多糖能抑制腫瘤細胞的增殖與分化，調(diào)節(jié)細胞的生長與凋亡，因此具有較好的抗腫瘤活性。劉博等[7]進行了體外抗腫瘤活性的研究，發(fā)現(xiàn)松茸多糖對胃癌細胞、人宮頸癌細胞和人結(jié)腸癌細胞具有較強的抑制其不正常的增殖與分化作用，并且純化后的多糖抗腫瘤活性明顯增強。

2.2 抗氧化性作用

近年來，松茸多糖抗氧化性成為研究熱點，張麗平等[8]研究表明，松茸多糖具有較強的清除二苯基代苦味基自由基的能力，清除率最高可達到88%，同時對超氧陰離子自由基和羥基自由基均具有清除作用，其清除率低于對二苯基代苦味基自由基的清除率。松茸多糖且能避免自由基對機體細胞的損傷作用，以上表明松茸多糖具有顯著的抗氧化性。

2.3 抗衰老作用

劉剛等[9]研究發(fā)現(xiàn)，通過松茸多糖作用于衰老小鼠腦、胸腺和脾細胞模型的研究，其結(jié)果表明細胞死亡數(shù)大大下降，同時抑制了脂質(zhì)過氧化物水平升高，還提高了衰老小鼠超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性，有明顯抗衰老的作用。

2.4 抗輻射作用

輻射在環(huán)境中無處不在，輻射可使肌體物質(zhì)代謝紊亂，造成免疫系統(tǒng)功能損傷；可使肌體細胞癌變，造成肌體各功能系統(tǒng)器官的嚴重損傷。多糖類物質(zhì)由于具有獨特的抗輻射活性和無毒性的特點，近年來，成為研究的熱點。Hoshi H.[10]等人通過建立輻射損傷小鼠模型來觀察松茸多糖的輻射防護作用，實驗結(jié)果表明松茸多糖在適應(yīng)濃度可顯著降低輻射對小鼠免疫功能的損傷，并對輻射損傷小鼠的免疫調(diào)節(jié)有一定防護作用；同時還具有提高輻射小鼠淋巴細胞增殖活性和輻射細胞的存活率。說明松茸多糖具有顯著的抗輻射作用。

2.5 調(diào)節(jié)免疫功能

高菊珍等[11]的研究表明，松茸多糖對特異性免疫和非特異性免疫都有調(diào)節(jié)作用，主要表現(xiàn)為增強免疫力，同時還具有抗應(yīng)激作用，在給連續(xù)注射環(huán)磷酞胺和可的松造成免疫功能低下的小鼠使用松茸多糖純化物后，小鼠的免疫功能逐漸恢復正常。Kim j.等的研究也表明了松茸多糖具有調(diào)節(jié)免疫的功能，證實了β- 葡聚糖是松茸多糖的主要活性成分。并且通過和免疫脂多糖比較，表明松茸β- 葡聚糖衍生物的免疫刺激作用途徑與免疫脂多糖類似。

3 小結(jié)與展望

松茸營養(yǎng)豐富和具有極高的藥用價值，其最主要的活性成分多糖在抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、抗炎、增強免疫調(diào)節(jié)、美白具有顯著效果，開發(fā)前景廣闊。近年來，對粗多糖純化以及藥理功能的研究越來越受到研究人員的關(guān)注，但目前松茸多糖的提取率不高和作用機制比不清楚，提高松茸多糖的提取率成為其產(chǎn)品開發(fā)研究需要解決的關(guān)鍵問題，所以應(yīng)加大對松茸多糖的提取方法和作用機制的研究，為更好地擴展其應(yīng)用范圍提供理論指導基礎(chǔ)，如開發(fā)松茸多糖藥品、食品和保健品等。這有利于大范圍、大規(guī)模地將松茸多糖產(chǎn)品市場化并提高松茸的經(jīng)濟價值。目前，對松茸活性物質(zhì)的研究主要集中在多糖方面，而對于其他的活性物質(zhì)及其對應(yīng)的作用機制研究比較少，應(yīng)加大對松茸各個有效成分的提取、純化、含量、結(jié)構(gòu)、作用機制地研究。這有利于大范圍、大規(guī)模地將松茸多糖產(chǎn)品市場化并提高松茸的經(jīng)濟價值。因此，利用現(xiàn)代的科學技術(shù)和工具對松茸的其他有效活性成分進行研究具有重大意義。