曾麗金 莆田市城廂區(qū)動物疫病預防控制中心 福建莆田 351100
該次莆田市獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對,要求在規(guī)定時間內(nèi)領取比對試驗盲樣、主要試劑,完成實驗室檢測過程,出具檢測報告和上報結果,現(xiàn)將城廂區(qū)獸醫(yī)實驗室參加比對測試的情況介紹如下。
1.1 試劑 禽流感病毒 H5 亞型(RE-11)血凝抑制試驗抗原 (哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司生產(chǎn));事先準確配制的1%雞紅細胞懸液。
1.2 方法 采用血凝(HA)/血凝抑制(HI)方法(SN/T1182.2-2004), 按照 《高致病性禽流感診斷技術》(GB/T 18936-2003)進行。 結果判定:被檢血清 HI效價≤3 log2 判為陰性;=4 log2 判為可疑 (可疑樣品應重檢,重檢效價≥4 log2,判為陽性,≤3 log2 判為陰性);≥5 log2 判為陽性。
1.3 結果與分析 有2 份樣品(編號5~6)禽流感病毒抗體檢測結果為陰性,4 份樣品(編號1~4)為陽性。 見表 1。
表1 H5 亞型(Re-11)禽流感病毒抗體檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計
2.1 試劑 小反芻獸疫競爭ELISA 抗體檢測試劑盒 (中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)),2~8 ℃下保存、備用。
2.2 方法 試劑盒使用前, 各試劑應平衡至室溫,將試劑盒配備的25 倍PBST 濃縮液用無離子水或蒸鎦水作 1:25 稀釋,配制成洗滌液(1×PBST)。 然后按照小反芻獸疫競爭ELISA 抗體檢測試劑盒使用說明書進行檢測。
2.3 結果與分析 測得相關樣品OD450nm平均值為:陰性血清 1.292、 陽性血清 0.1375、 空白對照孔0.082、單抗對照孔 1.376;陰性對照血清 PI<40%,陽性對照血清PI>60%。 只有試驗編號為20 號樣品的小反芻獸疫抗體檢測結果為陰性, 其余3 份都是陽性(見表 2)。
表2 小反芻獸疫抗體檢測數(shù)據(jù)統(tǒng)計
通過本次獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對, 發(fā)現(xiàn)實驗室質(zhì)量管理方面存在問題與不足。
一是儀器設備陳舊。 縣級獸醫(yī)實驗室只做血清學檢測,檢測時間集中在春秋兩季,其他時間很少開展檢測工作, 儀器設備閑置率較高, 不經(jīng)常維護保養(yǎng),多道移液器出現(xiàn)明顯的量差,儀器設備或多或少對檢測結果產(chǎn)生一定的偏差。
二是培訓不足。 縣級獸醫(yī)實驗室專業(yè)技術人員參加專業(yè)技術培訓的機會很少, 幾乎都是邊看檢測說明書邊操作,出現(xiàn)問題再回頭查找原因,可以說是“摸著石頭過河”成長起來的,這樣的專業(yè)技術人員更專注檢測前的準備工作。