觀察分析不同微生物檢驗方法于婦科炎癥感染的檢驗效果

蔡奕鴻，溫少玉，霍燕珊，沈捷玉

（佛山市第一人民醫(yī)院腦科康復(fù)醫(yī)院，廣東 佛山 528000）

婦科炎癥感染是困擾女性患者身心健康的疾病，嚴(yán)重的甚至?xí)绊懮芰1]。這種疾病主要是由于生殖道微生物菌群生長失衡所致，臨床研究發(fā)現(xiàn)超過60%的女性出現(xiàn)過生殖道感染癥狀[2]。婦科檢查是診斷婦科炎癥感染的重要手段，目前鏡檢法、凝集法、培養(yǎng)法是婦科炎癥感染微生物的常用檢驗方法，本研究比較了105例婦科炎癥感染患者采用此三種方法檢驗微生物效果，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年7月-2019年6月我院診治的105例婦科炎癥感染患者為研究對象，隨機分為鏡檢法組、凝集法組、培養(yǎng)法組，每組為35例。鏡檢法組年齡介于21-44歲，平均（30.77±7.19）歲；其中盆腔炎9例，陰道炎11例，宮頸炎6例，附件炎9例；未婚10例，已婚25例。凝集法組年齡介于20-42歲，平均（31.00±5.93）歲；盆腔炎7例，陰道炎13例，宮頸炎7例，附件炎8例；未婚13例，已婚22例。培養(yǎng)法組年齡介于21-49歲，平均（33.35±7.68）歲；盆腔炎8例，陰道炎12例，宮頸炎5例，附件炎10例；未婚9例，已婚26例。三組患者年齡、婦科炎癥類型、婚姻狀況等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）患者經(jīng)臨床診斷符合婦科炎癥感染，并有陰道瘙癢、白帶異常、異味等癥狀；（2）年齡20-50歲；（3）患者在2周內(nèi)未使用抗生素，在最近48 h內(nèi)未有性生活、盆浴或陰道灌洗；（4）患者知情并書面簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）伴有陰道器質(zhì)性疾病、惡性腫瘤、精神疾病者；（2）患有全身感染性疾病者；（3）月經(jīng)期；（4）患者不同意或未簽署知情同意書。

1.3 檢驗方法

1.3.1 標(biāo)本采集（凝聚法除外） 由婦科醫(yī)師負(fù)責(zé)采集，在陰道深部、后穹窿部位、宮頸口等處，采用生理鹽水浸濕的棉試子采集分泌物。采樣后于2 h內(nèi)送至檢驗科，保存于4 ℃冰箱內(nèi)，并在24 h內(nèi)檢驗[3]。

1.3.2 鏡檢法組 將棉試子涂在滴有生理鹽水和1滴10%氫氧化鉀溶液的載玻片上，涂勻后蓋上蓋玻片，輕壓蓋玻片趕走氣泡，用棉簽吸去上下玻片邊緣溢出的液體。為免強光影響觀察，適當(dāng)遮擋。先用低倍鏡（例如100倍以下）觀察有沒有菌絲或孢子，再用高倍鏡（例如200倍以上）觀察菌絲及孢子的形態(tài)、特征，如見到卵圓形孢子、芽生孢子、與出芽細(xì)胞連成鏈狀或分枝狀的假菌絲，提示陰道分泌物念珠菌（真菌）檢測陽性。

1.3.3 凝集法組 采用念珠菌乳膠凝集法檢測試劑盒中的試子采集陰道分泌物，取材后將試子放回試劑盒配套的軟試管中，按試劑盒說明書要求滴加緩沖液，并將標(biāo)本與緩沖液混勻。在試劑盒配套的凝集試驗卡片特征位置上滴加標(biāo)本液，再滴加念珠菌特異性抗體，兩者混勻。靜置5 min，觀察標(biāo)本液中有無凝集反應(yīng)，有則提示陰道分泌物念珠菌（真菌）檢測陽性。

1.3.4 培養(yǎng)法組 在生物安全柜中，采用滅菌接種針挑取少量標(biāo)本，接種于裝有沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基試管斜面的中下部，并將標(biāo)本淺埋在培養(yǎng)基中，然后用膠塞封口。試管放置在（37±1）℃生化培養(yǎng)箱中，分別在24 h、48 h、72 h、5 d時間點觀察培養(yǎng)基上有無白色菌落出現(xiàn)，有則說明有真菌存在，采用細(xì)菌鑒定儀鑒別念珠菌（真菌）。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 24.0軟件處理數(shù)據(jù)。計數(shù)資料以例數(shù)（%）形式表示，不同方法比較采用皮爾遜卡方進行檢驗，P＜0.05表示差異顯著或有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

鏡檢法組陽性例數(shù)為27例（陽性率為77.14%），凝集法組陽性例數(shù)為29例（陽性率為82.86%），培養(yǎng)法組陽性例數(shù)為31例（陽性率為88.57%），三種方法比較差異不顯著（P＞0.05），見表1。

3 討論

婦科炎癥是女性生殖器官（陰道、宮頸、附件、盆腔等）炎癥反應(yīng)，臨床表現(xiàn)包括瘙癢、尿痛、紅腫、分泌物增多等，致病原因有多種，例如不注意個人衛(wèi)生、不潔性交、宮內(nèi)節(jié)育器影響、內(nèi)褲不透氣、運動不足等[4]。臨床上主要采用化學(xué)藥物、放射性治療，其中抗生素應(yīng)用非常廣泛，也正因為抗生素濫用導(dǎo)致耐藥菌株日益增多，對婦科炎癥感染治療造成一定困難，許多患者久治不愈，不僅影響正常工作和生活，而且可引起內(nèi)分泌失調(diào)和生育能力消退[5]。

念珠菌是一種分布廣泛的致病真菌，常寄生在口腔、皮膚、黏膜等處，宿主自身免疫力下降或菌群失衡就會導(dǎo)致念珠菌病發(fā)，引起粘膜感染，嚴(yán)重時可致全身感染[6]。念珠菌屬包含白念珠菌、光滑念珠菌、熱帶念珠菌、克柔念珠菌等菌種，其中白念珠菌最常見。真菌檢驗方法主要有鏡檢法、凝集法、培養(yǎng)法等，其中培養(yǎng)法被認(rèn)為是臨床檢驗的金標(biāo)準(zhǔn)[7]，該方法不僅對病原體檢出率較高，而且可同時進行藥敏試驗和菌種檢驗，缺點是檢測時間較長、費用較高，故不利于早期診斷。凝集法是利用念珠菌酵母細(xì)胞抗原特點，與念珠菌特異性抗體相結(jié)合，形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象，一般來說，標(biāo)本中的念珠菌數(shù)量達(dá)到1.0×109個/mL，就能夠通過肉眼觀察到凝集反應(yīng)，所以凝集法具有操作簡便、反應(yīng)快、特異性高的優(yōu)點[8]，但不能同時進行菌種檢驗和藥敏試驗，單獨運用此法有一定局限性。鏡檢法是真菌檢驗的傳統(tǒng)方法，可采用生理鹽水涂片，但因標(biāo)本液中含有患者上皮細(xì)胞、雜質(zhì)，可能干擾念珠菌的觀察，造成假陰性。為了提高陽性率，可滴加氫氧化鉀溶液，以溶解標(biāo)本液中的細(xì)胞組織。同時鏡檢法對操作人員技術(shù)能力和責(zé)任心有一定要求，經(jīng)驗不足或觀察馬虎容易出現(xiàn)假陽性或假陰性。

本次研究顯示，鏡檢法組、凝集法組、培養(yǎng)法組陽性檢出率分別為77.14%、82.86%、88.57%，三組陽性檢出率比較差異不顯著（P＞0.05），這種情況與葉志敏[2]、張赫男[4]的結(jié)果一致，但不同方法陽性檢出率高低順序有別，葉志敏[2]研究結(jié)果中鏡檢法、凝集法、培養(yǎng)法的陽性檢出率分別為90.28%、84.72%、83.33%，張赫男[4]結(jié)果中鏡檢法、凝集法、培養(yǎng)法的陽性檢出率分別為85%、83.3%、86.7%，這反映了不同操作者在不同實驗室條件下針對不同患者的差異。

綜上所述，鏡檢法、凝集法、培養(yǎng)法對婦科炎癥感染檢驗并無明顯差別，可在臨床應(yīng)用時針對患者病情、診療條件等實際情況選擇最適宜的方法。