五種腫瘤標(biāo)志物分析靈敏度的建立

高虹，陳中唐

（江蘇省寶應(yīng)縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 揚(yáng)州 225800）

腫瘤標(biāo)志物能夠在很大程度上對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展起到反映作用，還能夠?qū)χ委煼磻?yīng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)[1]。本次研究對(duì)五種常見的腫瘤標(biāo)志物的分析靈敏度進(jìn)行建立，具體內(nèi)容如下。

1 材料和方法

1.1 試劑盒 本次實(shí)驗(yàn)的試劑盒均由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司所提供。

1.2 儀器 本次實(shí)驗(yàn)所涉及的儀器為：MAGLUM4000新產(chǎn)業(yè)發(fā)光儀。

1.3 樣品 將五種試劑盒內(nèi)的校準(zhǔn)品作為原始樣品，均以“0”校準(zhǔn)品進(jìn)行稀釋，以稀釋后得到的低濃度校準(zhǔn)品作為本次實(shí)驗(yàn)的樣品。

1.4 方法

1.4.1 實(shí)驗(yàn)方法 根據(jù)各類試劑盒說明書，通過化學(xué)發(fā)光法進(jìn)行測(cè)定。

1.4.2 樣品測(cè)定 嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作實(shí)驗(yàn)，所有標(biāo)志物均接受8 d發(fā)光強(qiáng)度的測(cè)定，并計(jì)算出各標(biāo)志物的標(biāo)準(zhǔn)差與均值。

1.4.3 確定LLD 計(jì)算出“0”校準(zhǔn)品的均值，再加上3倍的發(fā)光強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)差后，確定實(shí)際LLD。分析靈敏度需選取99.7%的可能性限值。

1.4.4 確定BLD 通過LLD加上3倍檢測(cè)低限樣品標(biāo)準(zhǔn)差的方法，對(duì)分析物最低濃度。計(jì)算不同濃度下發(fā)光強(qiáng)度均值，再減去3倍標(biāo)準(zhǔn)差發(fā)光強(qiáng)度，仍接近LLD值則為實(shí)際BLD。

1.4.5 確定FS 對(duì)各類腫瘤標(biāo)志物發(fā)光強(qiáng)度均值進(jìn)行測(cè)定，使其減去“0”校準(zhǔn)品發(fā)光強(qiáng)度均值，如CV接近20%則可確定不同濃度的FS。

2 結(jié)果

2.1 CA242檢測(cè)限樣品發(fā)光強(qiáng)度 經(jīng)過測(cè)定后，其中CA242的BLD為：1.17 U/mL。CA242分別為11.27、11.66、11.04、9.63、11.8、10.15、10.87、9.87 U/mL時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度分別為40112、41288、36649、35100、42442、36878、33997、27944。

2.2 CA724檢測(cè)限樣品發(fā)光強(qiáng)度 經(jīng)過測(cè)定后，CA724的BLD為：6 U/mL。CA724分別為48.37、48.73、54.91、52.9、50.96、52.07、532.64、57.23 U/mL時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度分別為68525、66549、82123、79716、76180、70772、71390、76325。

2.3 AFP檢測(cè)限樣品發(fā)光強(qiáng)度 經(jīng)過測(cè)定后，AFP的BLD為1.25 μg/L。AFP分別為47.04、53.61、42.82、50.93、60.26、54.51、49.29、54.62 U/mL時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度分別為235924、234764、227110、264035、306503、258835、236834、259313。

2.4 NSE檢測(cè)限樣品發(fā)光強(qiáng)度 經(jīng)過測(cè)定后，NSE的BLD為9 μg/L。NSE分別為46.91、44.36、47.09、41.08、42.9、42.23、41.24、43.02 U/mL時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度分別為1695551、161085、173955、53504、159702、157414、150623、156618。

2.5 SCC-Ag檢測(cè)限樣品發(fā)光強(qiáng)度 經(jīng)過測(cè)定后，SCC-Ag的BLD為1.2 μg/L。SCC-Ag分別為10.52、11.84、10.03、9.898、11.59、10.62、9.81、10.83 U/mL時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度分別為52431、58136、65332、64589、73689、68354、63819、69513。

3 討論

腫瘤標(biāo)志物具體指的就是于惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)存在特征性，或者由惡性腫瘤細(xì)胞的異常變化所形成的物質(zhì)，或者由宿主通過刺激腫瘤所形成的物質(zhì)[2]。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)能夠?qū)εR床診斷及治療提供有效幫助，對(duì)各類腫瘤標(biāo)志物分析靈敏度的建立，具有一定臨床價(jià)值[3]。

根據(jù)本次研究發(fā)現(xiàn)，上述5種腫瘤標(biāo)志物L(fēng)LD的實(shí)際測(cè)定結(jié)果與廠商說明書存在一定差異性。在實(shí)際應(yīng)用中，對(duì)腫瘤標(biāo)志物的陰性與陽(yáng)性檢測(cè)報(bào)告仍然以廠商說明書為標(biāo)準(zhǔn)；如出現(xiàn)差異性，則可以本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果作為參考標(biāo)準(zhǔn)。

根據(jù)對(duì)定量檢測(cè)限報(bào)告結(jié)果的建立，可發(fā)現(xiàn)：①結(jié)果低于LLD則可判定其為陰性；②根據(jù)LLD及定量檢測(cè)限間結(jié)果可發(fā)現(xiàn)：腫瘤標(biāo)志物的檢出情況，與定量之間無實(shí)際差異性。

綜上所述，通過對(duì)五種腫瘤標(biāo)志物分析靈敏度的建立能夠報(bào)告低限，能夠?qū)δ[瘤患者的標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果提供幫助，均具備一定的臨床價(jià)值。