無精子癥男性不育與染色體核型異常關(guān)系分析

李光，張譯夫，文陶非

（長春市婦產(chǎn)醫(yī)院 生殖醫(yī)學(xué)中心，吉林 長春 130042）

0 引言

男性不育是指性生活正常情況下，夫婦婚后同居生活一年以上，在排除女方因素且未采取任何避孕措施的情況下不育者[1]。臨床分析這主要是因男性生精異常而導(dǎo)致，在男性不育患者中，約20%患者是因精子生成障礙而導(dǎo)致的少精、弱精或無精。而且研究發(fā)現(xiàn)染色體異常是精子生成障礙的主要因此，臨床有必要對無精癥患者實施染色體核型分析，明確其異常情況。針對男性不育患者臨床診療中，一般會采取進行細(xì)胞遺傳學(xué)染色體核型分析檢驗項目?；诖?，本文選擇110例無精少精弱精子癥男性不育患者，就無精子癥男性不育與染色體核型異常關(guān)系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料。選取我院2018年1月至2019年6月收治的110例無精子癥男性不育患者作為此次研究的研究對象。年齡21-58歲，平均（35.88±4.03）歲，不孕時間在1-11年，平均（7.88±2.02）年。以上患者婚后均未避孕，女方健康未見染色體異常。所有研究對象精液常規(guī)檢查3次，每次至少間隔3d。根據(jù)《人類精液及精子-宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》的實驗標(biāo)準(zhǔn)，精子密度>20×106/mL，（A+B）級精子百分率超過50%，表示處于正常范圍內(nèi)。連續(xù)進行3次精液分析，且經(jīng)離心沉淀鏡檢無精子，則判定為無精子癥，精子密度<5×106/mL者為嚴(yán)重少精子癥。110例患者經(jīng)檢查均判定為無精子癥。所有患者接受?？漆t(yī)生進行體格檢查，經(jīng)《男性生殖病史詢問表》采集病史，包括結(jié)婚時間、性成熟情況、避孕措施、性生活狀況、既往病史、既往生育或受孕情況、外傷、泌尿系感染史與手術(shù)史等。

1.2 檢測儀器與試劑。選用Forma3111型的恒溫培養(yǎng)箱，恒溫水浴箱、隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱，人體外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基與細(xì)胞培養(yǎng)液。

1.3 檢查方法。取樣前需告知研究對象相關(guān)情況，并簽署同意書。取肝素抗凝靜脈血1-2 mL，實施無菌操作，接種在兩種不同廠家培養(yǎng)基中，并分別放入到2個獨立恒溫培養(yǎng)中，培養(yǎng)條件37℃、72 h，第3 d每個瓶中加入2滴秋水仙素（選用注射器劑量為2 mL，選用7號針頭）3 h收獲、處理、紙片與G顯帶。G顯帶分析，計數(shù)30個中期分裂相，對3-5個核型進行分析，染色體多態(tài)可結(jié)合C顯帶方法，確定具體核型。

2 結(jié)果

110例患者檢查被確診為無精子癥男性不育實施染色體核型檢查，顯示，15例出現(xiàn)染色體異常，異常率為13.67%。其中性染色體異常10例，占異?？倲?shù)66.67%，包括47，XXY（Klinefelter綜合征）8例，Y多態(tài)2例。常染色體異常3例，約為異?？倲?shù)20.00%。9號染色體臂間倒位2例。所有異常核型中，發(fā)病率最高即Klinefelter綜合征（47，XXY），占比53.33%（8/15），見表1。

表1 無精子癥男性不育與染色體核型狀況分析

3 討論

不孕不育癥為一種臨床常見病，不育是男女雙方共同問題，女性原因?qū)е碌姆Q為不孕，男性原因?qū)е碌某蔀椴挥?。其中男性不育可分為性功能障礙性不育癥和性功能正常性不育癥，性功能正常性不育是因精液異常而導(dǎo)致。無精子癥為一種類型，是指精液離心沉淀鏡檢，連續(xù)3次未發(fā)現(xiàn)精子，并排除逆行射精、不射精情況，輸精管道梗阻、毒性藥物與感染等原因，也會導(dǎo)致男性無精子癥，遺傳性狀的變化，也會導(dǎo)致男性無精子癥[2-3]。導(dǎo)致男性不育的原因可分為細(xì)胞遺傳學(xué)原因，包括基因異常、染色體核型異常，還包括分子遺傳學(xué)原因，是指促性腺激素缺乏。

細(xì)胞遺傳學(xué)為男性不育的主要研究方法，染色體異常與相關(guān)基因缺失均會對精子產(chǎn)生不同程度影響，并影響生育能力，這是導(dǎo)致弱精、少精、無精的主要因此[4]。本研究中，110例患者檢查被確診為無精子癥男性不育實施染色體核型檢查，顯示，異常率為13.67%。染色體數(shù)目異常中Klinefelter 綜合征是發(fā)生率最高，本文研究15例異常核型中，Klinefelter綜合征共8例。這類患者多思維正常、身材高大、四肢細(xì)長、陰莖小、睪丸發(fā)育狀況不佳、無精子生成，有男性乳房發(fā)育，腋毛、胡須、陰毛稀少或基本無。其發(fā)生機制主要是因性染色體在減數(shù)分裂時，不分離而導(dǎo)致，與高齡孕產(chǎn)相關(guān)。47，XXY患者的Y染色體正常，因此存在正常睪丸發(fā)育，但睪丸發(fā)育狀況不佳，而導(dǎo)致生精上皮細(xì)胞死亡，因此出現(xiàn)無精[5-6]。

染色體多態(tài)性是高度重復(fù)DNA結(jié)構(gòu)中出現(xiàn)異染色質(zhì)區(qū)的微小變異，一般是D/G組染色體隨體區(qū)出現(xiàn)變異以及1、9、16號染色體出現(xiàn)缺失，這些高度重復(fù)DNA序列中幾乎無編碼結(jié)構(gòu)基因[7]。其中Y染色體多態(tài)，主要是表現(xiàn)為小Y或大Y。研究表明，大Y多來自Y異染色質(zhì)中DNA高度重復(fù)，重復(fù)DNA會導(dǎo)致染色質(zhì)DNA量增加，出現(xiàn)有絲分裂錯誤，這可能受生殖異常的影響。因Y染色體長臂上有與男性生育能力相關(guān)、性別分化、性腺發(fā)育相關(guān)的基因，其高度重復(fù)可導(dǎo)致精子生成障礙。因此，臨床認(rèn)為大Y主要與性分化異常相關(guān)。小Y為一種多態(tài)性變化，一般不會影響生育，但也有研究提出，Y染色體部分遺傳物質(zhì)丟失，會導(dǎo)致自然流產(chǎn)、不育。因此臨床認(rèn)為大Y或小Y均與遺傳效應(yīng)相關(guān)。

常染色體易位。本次研究中檢出常染色體平衡易位患者3例。常染色體相互易位影響著男性不育，常染色體上存在較多影響精子生成基因，一旦出現(xiàn)易位導(dǎo)致基因斷裂或缺失，便會出現(xiàn)無精或少精。而且研究還發(fā)現(xiàn)9號染色體臂間倒位也會影響男性不育。其遺傳效應(yīng)主要有缺失或重復(fù)片段的長短與所含基因致死效應(yīng)相關(guān)。分析9號染色體臂間倒位影響精子障礙發(fā)生，可能是與基因到位阻礙第一次減數(shù)分裂時二價體的形成相關(guān)。

本研究性染色體異常占比4.55%。Y染色體是含有決定男性特征的關(guān)鍵基因，主要包括睪丸成熟因子和睪丸決定因子，以此調(diào)控男性生殖器的發(fā)育及成熟。因此性染色體異常自然會影響生殖器的正常發(fā)育成熟。本研究顯示異常核型中，發(fā)病率最高即Klinefelter綜合征（47，XXY），占比53.33%。Klinefelter綜合征發(fā)生機制與X染色體相關(guān)，主要是某些因素導(dǎo)致患者X染色體在生殖細(xì)胞減數(shù)分裂中出現(xiàn)分離異常[3]。染色體核型異常為男性不育的主要原因，臨床可通過檢測男性不育異常情況，其意義不在于早發(fā)現(xiàn)早治療，直至現(xiàn)在臨床并未發(fā)現(xiàn)有效的關(guān)于改變男性不育異常染色體核型的的方法，該檢測開展的意義在于提早放棄對男性不育的無效治療，引用他人精子提高受孕率。

綜上所述，男性不育的重要原因之一即染色體核型異常，對患者染色體核型進行分析有利于男性不育診斷，并為臨床治療提供依據(jù)，具有重要意義。