• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    親環(huán)素A對冠狀病毒復(fù)制的影響及其抑制劑的抗病毒作用研究進(jìn)展

    2020-12-09 20:47:17田璐劉文軍孫蕾
    生物工程學(xué)報(bào) 2020年4期
    關(guān)鍵詞:環(huán)素免疫抑制基因組

    田璐,劉文軍,孫蕾

    ·綜 述·

    親環(huán)素A對冠狀病毒復(fù)制的影響及其抑制劑的抗病毒作用研究進(jìn)展

    田璐1,2,劉文軍1,2,孫蕾1,2

    1 中國科學(xué)院微生物研究所 病原微生物與免疫學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100101 2 中國科學(xué)院大學(xué),北京 100049

    親環(huán)素A (CypA) 是一種在生物界中廣泛分布,并具有高度保守性的蛋白質(zhì),具有肽基脯氨酰順/反異構(gòu)酶活性,是免疫抑制藥物環(huán)孢素A (CsA) 的細(xì)胞內(nèi)受體。冠狀病毒是具有包膜的、單股正鏈RNA病毒,目前已知有7種冠狀病毒可以感染人類,其中包括致命的SARS-CoV、MERS-CoV以及新型冠狀病毒 (SARS-CoV-2)。已有研究表明,CypA在SARS-CoV、CoV-229E、CoV-NL63以及FCoV等多種冠狀病毒的復(fù)制中是必不可少的,而且CypA的抑制劑CsA及其衍生物 (ALV、NIM811等) 對多種冠狀病毒具有明顯的抑制作用,暗示CypA是潛在的抗冠狀病毒藥物靶點(diǎn),CsA這種老藥有可能是一種抗冠狀病毒的藥物。2019年底,新型冠狀病毒突然肆虐中國,嚴(yán)重威脅人民生命健康并造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。鑒于此,文中介紹了CypA對冠狀病毒復(fù)制的影響,并闡述了其抑制劑的抗病毒作用,旨在為抗新型冠狀病毒藥物的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)及思路。

    親環(huán)素A,環(huán)孢素A,冠狀病毒,新型冠狀病毒

    2019年12月初,武漢華南海鮮市場開始集中出現(xiàn)新型冠狀病毒 (SARS-CoV-2) 所致肺炎 (WHO定名:COVID-19) 疫情,后來迅速蔓延至全國。截至2020年2月20日,我國確診病例已累計(jì)7萬余例,死亡2 000余人。2020年1月30日,世界衛(wèi)生組織宣布該疫情構(gòu)成國際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件。疫情發(fā)生后,全國多省市陸續(xù)啟動(dòng)重大突發(fā)公共衛(wèi)生事件Ⅰ級(jí)響應(yīng),多省市大中小學(xué)幼兒園和單位延期開學(xué)、開工,旅游業(yè)暫停,部分交通設(shè)施及各類娛樂場所暫時(shí)關(guān)閉。新型冠狀病毒肺炎的暴發(fā)嚴(yán)重威脅了人民的生命健康并且為我國經(jīng)濟(jì)發(fā)展帶來了重創(chuàng)。嚴(yán)峻形勢下,我們急需探究針對此病毒的新型藥物以及有效的防控措施。本文主要介紹了親環(huán)素A對冠狀病毒復(fù)制的影響及其抑制劑的抗病毒效果,旨在為抗新型冠狀病毒藥物的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)及思路。

    1 親環(huán)素A

    親環(huán)素A (Cyclophilin A,CypA) 屬于Cyclophilin (Cyp) 家族成員,該家族成員具有順反異構(gòu)酶活性,在生物界中廣泛分布,并具有高度保守性。CypA最早于1984年由Handchumcher等從牛胸腺中提取出來并進(jìn)行提純[1],并發(fā)現(xiàn)其作為胞內(nèi)蛋白對具有免疫抑制功能的環(huán)孢菌素A (Cyclosporin A,CsA) 具有極高的親和性。同年,F(xiàn)ischer等[2]發(fā)現(xiàn)了具有肽基脯氨酰順/反異構(gòu)酶 (PPIase) 活性的蛋白,進(jìn)一步研究表明該P(yáng)PIase活性蛋白即為CypA蛋白,隨后親環(huán)素家族的其他成員相繼被發(fā)現(xiàn)。目前已經(jīng)在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了16種結(jié)構(gòu)不同的Cyps家族成員 (CypA、CypB、CypC、CypD、CypE、Cyp40、CypNK等),其中,含量最多的是CypA,其含量約占細(xì)胞質(zhì)蛋白總含量的0.1%–0.6%[3]。它們都具有由約109個(gè)氨基酸構(gòu)成的親環(huán)素樣結(jié)構(gòu)域 (Cyclophilin-like domain,CLD)[4-5],在哺乳動(dòng)物、植物、昆蟲、細(xì)菌、真菌甚至病毒中均有存在。CsA的免疫抑制作用是通過CsA、CypA和鈣調(diào)磷酸酶形成三元復(fù)合物來實(shí)現(xiàn)的。CsA在進(jìn)入體內(nèi)后先與CypA結(jié)合,CsA-CypA復(fù)合物結(jié)合并抑制鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶,使其底物激活的T細(xì)胞核因子 (Nudear factor of activated T cells,NF-AT) 等不能被去磷酸化,導(dǎo)致其不能從細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)位,從而在轉(zhuǎn)錄水平阻斷淋巴細(xì)胞活化,使T細(xì)胞活化必需的一些細(xì)胞因子表達(dá)受阻[6]。大量研究發(fā)現(xiàn),CypA除了作為免疫抑制劑CsA的受體蛋白以外,還參與細(xì)胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、病毒復(fù)制等多種生命過程[7-9]。

    CypA能夠調(diào)控多種病毒的復(fù)制。CypA可與丙肝病毒 (HCV) 的NS2蛋白[10]、NS5A蛋白[11]和NS5B蛋白產(chǎn)生相互作用,并被證明是HCV復(fù)制所必需的宿主因子[12]?,F(xiàn)有的抗HCV藥物Alisporivir即是阻礙了CypA和NS5A的結(jié)合,從而影響了HCV的復(fù)制。無免疫抑制特性的Cyps抑制劑如NIM811、Debio-025和SCY-635已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)中[13],有望成為今后有效的治療藥物。CypA也被發(fā)現(xiàn)可與人類免疫缺陷病毒 (HIV-1)的Gag蛋白相互作用[14],CypA-Gag相互作用對于人類細(xì)胞中HIV-1的復(fù)制至關(guān)重要,CsA通過阻止CypA-Gag相互作用抑制HIV-1感染[15],在Gag的CypA結(jié)合區(qū)中引入突變也可減少HIV-1的感染。我們實(shí)驗(yàn)室的研究發(fā)現(xiàn),CypA也可與甲型流感病毒 (IAV) 的M1蛋白相互作用,并整合到流感病毒粒子中[16],M1蛋白在流感病毒的復(fù)制周期中起到多種功能,包括病毒的脫衣殼、轉(zhuǎn)錄、組裝和釋放[17]。CypA主要通過加速M(fèi)1蛋白的降解從而在翻譯后水平上影響流感病毒的復(fù)制[18]。同時(shí),CypA還能夠通過靶向RIG-I和MAVS的泛素化來調(diào)控RIG-Ⅰ介導(dǎo)的Ⅰ型干擾素的產(chǎn)生,從而影響IAV等病毒的復(fù)制[19]。此外,CypA還與多種其他病毒的復(fù)制有關(guān)。例如:CypA的穩(wěn)定性在VV感染的細(xì)胞中顯著增加,CypA會(huì)重新定位到細(xì)胞核的外周區(qū)域,與病毒產(chǎn)生共定位,然后摻入病毒顆粒中并特異性地定位于核心中[20];CypA與VSV的核衣殼蛋白相互作用,并且與VV類似,可以摻入VSV病毒顆粒中,它可能充當(dāng)核衣殼蛋白的分子伴侶,包裹基因組RNA以產(chǎn)生轉(zhuǎn)錄的功能模板[21];輪狀病毒 (RV) 感染是全世界5歲以下嬰幼兒急性脫水性腹瀉的主要原因。RV感染可引發(fā)CypA蛋白的暫時(shí)增加。在RV感染的細(xì)胞中,CypA被募集到RV的病毒體中,并且與RV結(jié)構(gòu)蛋白VP2相互作用以抑制RV感染細(xì)胞并通過其PPIase活性抑制RV復(fù)制[22]。

    2 冠狀病毒簡介

    值得關(guān)注的是CypA在多種冠狀病毒的復(fù)制中必不可少。冠狀病毒是一類具有包膜的單股正鏈RNA病毒,可引起多種哺乳動(dòng)物 (人類、蝙蝠、貓和小鼠等) 以及鳥類不同程度的呼吸道、胃腸道及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病[23]。冠狀病毒主要分為4種屬:α屬、β屬、γ屬和δ屬[24]。已知可感染人類的冠狀病毒有7種,分別是HCoV-229E、HCoV-OC43、HCoV-NL63、HCoV-HKU1、SARS-CoV、MERS-CoV以及SARS-CoV-2。在冠狀病毒感染過程中起作用的蛋白主要有6種,分別為核衣殼蛋白 (N)、刺突糖蛋白 (S)、小包膜糖蛋白 (E)、膜糖蛋白 (M)、多聚酶以及3CL水解酶[25],其中S、E、M和N蛋白為冠狀病毒的結(jié)構(gòu)蛋白。在冠狀病毒中,三分之二的基因組位于基因組5′區(qū)域內(nèi),該區(qū)域包含開放閱讀框1a (ORF1a) 和開放閱讀框1b (ORF1b)[26],它們編碼RNA依賴性RNA聚合酶 (RdRp)、解旋酶和其他非結(jié)構(gòu)蛋白 (Nsp)。在基因組的其余三分之一中,結(jié)構(gòu)蛋白的基因以固定順序編碼:S-E-M-N,這些基因之間存在數(shù)量可變的ORF編碼輔助蛋白[27]。

    HCoV-229E、HCoV-OC43于20世紀(jì)60年代被發(fā)現(xiàn),主要造成普通感冒,一般不會(huì)引起嚴(yán)重病癥。SARS-CoV是一種高度侵襲性的人類病原,可引起嚴(yán)重呼吸系統(tǒng)窘迫綜合征,通常具有致命的后果[25]。該病毒在越過物種壁壘 (最有可能從蝙蝠到果子貍再到人類) 后,于2003年開始流行,是第一種已知的有可能導(dǎo)致人類高發(fā)病率和高死亡率的疾病發(fā)生的冠狀病毒[28],造成8 098例感染及774例死亡[29]。由于沒有高效的治療方法,該流行病最終可以通過有效的傳統(tǒng)公共衛(wèi)生措施進(jìn)行隔離得以控制。CoV-NL63、HCoV-HKU1分別于2004年[30]和2005年[31]被發(fā)現(xiàn),易感染兒童,可能會(huì)引起嚴(yán)重的下呼吸道感染,如支氣管炎和肺炎。2012年,中東地區(qū)出現(xiàn)了一種新的人類冠狀病毒MERS-CoV,與SARS-CoV同樣可能導(dǎo)致腎衰竭和急性肺炎,但死亡率更高,約為50%[24]。2019年12月初,武漢華南海鮮市場開始集中出現(xiàn)不明原因的肺炎疫情,該流行病的病原體被確認(rèn)為SARS-CoV-2,屬于β屬冠狀病毒,將其全基因組核苷酸序列與β屬的SARS-CoV和MERS-CoV進(jìn)行比對,發(fā)現(xiàn)相似性分別約為70%和40%。值得注意的是,SARS-CoV-2與SARS-CoV都是主要通過S-蛋白與人血管緊張素轉(zhuǎn)換酶2 (ACE2) 互作來感染人的呼吸道上皮細(xì)胞[32]。

    3 親環(huán)素A對冠狀病毒復(fù)制的影響

    病毒的復(fù)制大多需要宿主因子的參與,至今已有大量文章報(bào)道CypA在多種冠狀病毒的復(fù)制中起著重要的作用。有關(guān)CypA可能參與冠狀病毒復(fù)制的提示來自于SARS-CoV相關(guān)研究。研究人員通過表面等離子體共振生物傳感技術(shù)發(fā)現(xiàn)CypA與SARS-CoV的N蛋白具有非常高的親和力[33],并通過定點(diǎn)突變和親和力的測定確定了它們的結(jié)合位點(diǎn),推測CypA可能作為N蛋白的分子伴侶在復(fù)制過程中發(fā)揮著重要作用。CD147是一種Ⅰ型跨膜蛋白,已被確定為細(xì)胞外CypA的主要信號(hào)受體[34]。盡管SARS-CoV蛋白沒有直接與CD147分子結(jié)合,但是通過表面等離振子共振分析發(fā)現(xiàn)SARS-CoV的N蛋白能夠與和CD147相互作用的CypA結(jié)合,并且CD147拮抗劑對SARS-CoV具有抑制作用。這些結(jié)果表明CD147分子在促進(jìn)SARS-CoV入侵宿主細(xì)胞中發(fā)揮功能性作用[35],CsA可能會(huì)通過抑制CypA的功能進(jìn)而抑制SARS-CoV的復(fù)制[36]。另外,SARS-CoV Nsp1是一種體內(nèi)毒力因子,其作用與免疫應(yīng)答的早期階段有關(guān),包括對干擾素信號(hào)傳導(dǎo)的拮抗活性和對宿主蛋白質(zhì)合成的抑制作用[37-38],而CypA可以與Nsp1蛋白的氨基 (N) 末端區(qū)域互相作用并可能充當(dāng)分子伴侶[39]。這些研究為探究SARS-CoV以及其他冠狀病毒感染途徑提供新的提示,并進(jìn)一步為抗SARS藥物篩選提供一種可行的方法。

    研究人員構(gòu)建了分別敲低CypA和CypB的CaCo-2細(xì)胞系,通過噬斑實(shí)驗(yàn)觀察到CaCo-2CypA細(xì)胞完全不支持CoV-NL63生長,表明CoV-NL63的復(fù)制過程功能性依賴CypA,而不是CypB[40]。還有研究表明CypA在HCoV-229E的復(fù)制過程中也擔(dān)任著重要角色[29]。CypA不僅對于感染人的冠狀病毒發(fā)揮著舉足輕重的作用,它對于動(dòng)物冠狀病毒的復(fù)制也有一定作用。貓科動(dòng)物冠狀病毒 (FCoV) 的復(fù)制也需要Cyps的參與,過表達(dá)CypA與CypB能夠明顯促進(jìn)FCoV的復(fù)制及其蛋白的表達(dá),F(xiàn)CoV在CypA和CypB敲除細(xì)胞中的病毒載量下降了超過95% (與其在野生型細(xì)胞中相比)[41]。

    4 親環(huán)素A抑制劑的抗冠狀病毒作用研究

    一般來說,RNA病毒基因組通常以低保真度復(fù)制并經(jīng)歷快速的進(jìn)化變異,盡管冠狀病毒編碼一個(gè)校對的核糖核酸外切酶 (Nsp14 ExoN),有校對活動(dòng),可增強(qiáng)其大型基因組的復(fù)制穩(wěn)定性,但該域內(nèi)的突變亦會(huì)顯著提高其突變率[42]。病毒復(fù)制依賴于多種宿主因子,這些宿主因子是潛在的抗病毒靶點(diǎn)。迄今為止,既沒有針對引起普通感冒的冠狀病毒的藥物,也沒有針對高致病性冠狀病毒的有效治療藥物??共《舅幬锏拈_發(fā)集中在病毒蛋白酶和解旋酶抑制劑的開發(fā)上,且針對病毒靶標(biāo)的藥物通常傾向于快速地產(chǎn)生耐藥性。因此,將病毒復(fù)制所需的宿主因子作為靶點(diǎn),可能會(huì)減少耐藥性的產(chǎn)生,尋找這些靶點(diǎn)和抑制劑是當(dāng)務(wù)之急。

    4.1 CsA對冠狀病毒復(fù)制的影響

    CsA是一種眾所周知的廣泛應(yīng)用于臨床的免疫抑制藥物,它與Cyps結(jié)合以抑制鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶 (鈣調(diào)鈣蛋白激活的絲氨酸/蘇氨酸特異性磷酸酶)。鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶的抑制作用阻止了NF-AT從胞質(zhì)溶膠轉(zhuǎn)移到核中,從而阻止了編碼細(xì)胞因子 (如白介素2) 的基因的轉(zhuǎn)錄[43]。上文中已經(jīng)闡述了CypA在多種冠狀病毒的復(fù)制過程中擔(dān)任著舉足輕重的角色,抑制其PPIase活性不僅會(huì)阻止蛋白的正確折疊,而且還會(huì)抑制許多病毒復(fù)制過程中必不可少的病毒蛋白。目前已有大量研究表明CsA是某些人類和動(dòng)物冠狀病毒的有效抑制劑[36,39,41],一些關(guān)于CsA抑制機(jī)理的研究表明這與Cyps參與病毒復(fù)制有關(guān)。

    研究人員用CsA處理感染了SARS-CoV的 Vero-E6細(xì)胞和293/ACE2細(xì)胞 (可穩(wěn)定表達(dá)SARS-CoV的受體ACE2) 以及感染了HCoV-229E- GFP的Huh7細(xì)胞和感染了MHV-GFP的17CL1細(xì)胞,結(jié)果表明CsA可以抑制SARS-CoV、HCoV-229E和MHV的復(fù)制,其中對于HCoV-229E的抑制效果最好[36]。SARS-CoV Nsp1的過度表達(dá)或SARS-CoV感染會(huì)大大增強(qiáng)NF-AT通路的信號(hào)傳導(dǎo),并增強(qiáng)對IL2的誘導(dǎo),表明NF-AT信號(hào)通路對免疫細(xì)胞的活化有影響,從而解釋了嚴(yán)重SARS病例中觀察到的細(xì)胞因子失調(diào)和免疫依賴性發(fā)病機(jī)制。有研究表明,CsA與細(xì)胞內(nèi)Cyps結(jié)合并阻斷NF-AT途徑,Cyps-CsA復(fù)合物也可能會(huì)抑制病毒復(fù)制所需的Cyps的其他功能[44]。此外,研究人員發(fā)現(xiàn)CsA抑制了其他CoV成員的復(fù)制。MERS-CoV感染細(xì)胞后,病毒RNA合成迅速增加,在感染后的13–24 h開始出現(xiàn)不同程度的細(xì)胞病理學(xué)改變,加入CsA后,細(xì)胞病理現(xiàn)象有明顯改善[45]。CsA可以明顯地抑制HCoV-NL63的復(fù)制以及病毒蛋白的合成[40],豬傳染性胃腸炎病毒 (TGEV)、禽傳染性支氣管炎病毒 (IBV) 及FCoV的復(fù)制也可被CsA明顯抑制[39,41]。

    4.2 CsA衍生物對冠狀病毒復(fù)制的影響

    對于具有較低致病性的病毒感染的治療,我們希望利用CsA能夠抑制PPIase活性這一特點(diǎn),并且希望它不抑制免疫活性,所以目前已經(jīng)開發(fā)出很多滿足這些標(biāo)準(zhǔn)的CsA衍生物,包括ALV[46]、NIM811、復(fù)合物3[47]等。研究人員通過用ALV、NIM811以及復(fù)合物3處理轉(zhuǎn)染了HCoV-229E-GFP的人類肝癌細(xì)胞 (利于HCoV-229E的穩(wěn)定生長),發(fā)現(xiàn)這3種非免疫抑制性的CsA衍生物可以明顯地抑制HCoV-229E的復(fù)制。同時(shí),ALV也可明顯地抑制HCoV-NL63的復(fù)制[40]。另外一種新型環(huán)孢霉素衍生物STG-175,不具有免疫抑制作用,在已知同類別化合物中是一個(gè)活性很高的Cyps抑制劑,也有可能是一種潛在的抗冠狀病毒藥物[48]。

    5 展望

    嚴(yán)峻形勢下,我們急需探究針對新型冠狀病毒的新型藥物以及有效的防控措施?;谝延醒芯拷Y(jié)果,可以發(fā)現(xiàn)CypA與冠狀病毒等多種病毒的關(guān)鍵蛋白互相作用,并且參與了多種病毒的復(fù)制過程。盡管尚不能確定CsA等CypA抑制劑抗冠狀病毒的確切機(jī)制,但該類藥物可能通過干擾病毒蛋白與多個(gè)蛋白家族的一個(gè)或多個(gè)成員之間的功能相互作用從而抑制冠狀病毒的復(fù)制。而且,CsA是一種廣泛應(yīng)用于臨床的老藥,安全、有效、質(zhì)量可控,如果能用于治療冠狀病毒引起的疾病,將大大縮短其進(jìn)入臨床的時(shí)間??傊?,CypA在多種冠狀病毒復(fù)制過程中發(fā)揮重要作用,其抑制劑將是一類非常有潛力的廣譜抗冠狀病毒的候選藥物。CypA及其抑制劑在新型冠狀病毒復(fù)制過程中的作用還有待進(jìn)一步研究。

    [1] Handschumacher RE, Harding MW, Rice J, et al.Cyclophilin: a specific cytosolic binding protein for cyclosporin A. Science, 1984, 226(4674): 544–547.

    [2] Fischer G, Bang H, Mech C. Determination of enzymatic catalysis for the cis-trans-isomerization of peptide binding in proline-containing peptides. Biomed Biochim Acta, 1984, 43(10): 1101–1111.

    [3] de Wilde AH, Pham U, Posthuma CC, et al. Cyclophilins and cyclophilin inhibitors in nidovirus replication. Virology, 2018, 522: 46–55.

    [4] Marks AR. Cellular functions of immunophilins. Physiol Rev, 1996, 76(3): 631–649.

    [5] Rajiv C, Davis TL. Structural and functional insights into human nuclear cyclophilins. Biomolecules, 2018, 8(4): 161.

    [6] Smart EJ, Ying YS, Donzell WC, et al. A role for caveolin in transport of cholesterol from endoplasmic reticulum to plasma membrane. J Biol Chem, 1996, 271(46): 29427–29435.

    [7] Watashi K, Shimotohno K. Cyclophilin and viruses: cyclophilin as a cofactor for viral infection and possible anti-viral target. Drug Target Insights, 2007, 2: 9–18.

    [8] Terajima M, Taga Y, Cabral WA, et al. Cyclophilin b deficiency causes abnormal dentin collagen matrix. J Proteome Res, 2017, 16(8): 2914–2923.

    [9] Brazin KN, Mallis RJ, Fulton DB, et al. Regulation of the tyrosine kinase Itk by the peptidyl-prolyl isomerase cyclophilin A. Proc Natl Acad Sci USA, 2002, 99(4): 1899–1904.

    [10] Ciesek S, Steinmann E, Wedemeyer H, et al. Cyclosporine A inhibits hepatitis C virus nonstructural protein 2 through cyclophilin A. Hepatology, 2009, 50(5): 1638–1645.

    [11] Chatterji U, Bobardt M, Selvarajah S, et al. The isomerase active site of cyclophilin A is critical for hepatitis C virus replication. J Biol Chem, 2009, 284(25): 16998–17005.

    [12] Chatterji U, Lim P, Bobardt MD, et al. HCV resistance to cyclosporin A does not correlate with a resistance of the NS5A-cyclophilin A interaction to cyclophilin inhibitors. J Hepatol, 2010, 53(1): 50–56.

    [13] Lawitz E, Godofsky E, Rouzier R, et al. Safety, pharmacokinetics, and antiviral activity of the cyclophilin inhibitor NIM811 alone or in combination with pegylated interferon in HCV-infected patients receiving 14 days of therapy. Antiv Res, 2011, 89(3): 238–245.

    [14] Franke EK, Yuan HEH, Luban J. Specific incorporation of cyclophilin A into HIV-1 virions. Nature, 1994, 372(6504): 359–362.

    [15] Thali M, Bukovsky A, Kondo E, et al. Functional association of cyclophilin A with HIV-1 virions. Nature, 1994, 372(6504): 333–365.

    [16] Liu XL, Sun L, Yu MR, et al. Cyclophilin A interacts with influenza A virus M1 protein and impairs the early stage of the viral replication. Cell Microbiol, 2009, 11(5): 730–741.

    [17] Rossman JS, Lamb RA. Influenza virus assembly and budding. Virology, 2011, 411(2): 229–236.

    [18] Liu XL, Zhao ZD, Xu CF, et al. Cyclophilin A restricts influenza A virus replication through degradation of the M1 protein. PLoS ONE, 2012, 7(2): e31063.

    [19] Liu W, Li J, Zheng WN, et al.Cyclophilin A-regulated ubiquitination is critical for RIG-I-mediated antiviral immune responses. elife, 2017, 6: e24425.

    [20] Castro APV, Carvalho TMU, Moussatché N, et al.Redistribution of Cyclophilin A to viral factories during vaccinia virus infection and its incorporation into mature particles. J Virol, 2003, 77(16): 9052–9068.

    [21] Bose S, Mathur M, Bates P, et al.Requirement for cyclophilin A for the replication of vesicular stomatitis virus New Jersey serotype. J General Virol, 2003, 84(7): 1687–1699.

    [22] He HY, Zhou DJ, Fan WP, et al. Cyclophilin A inhibits rotavirus replication by facilitating host IFN-I production. Biochem Biophys Res Commun, 2012, 422(4): 664–669.

    [23] Perlman S, Netland J. Coronaviruses post-SARS: update on replication and pathogenesis. Nat Rev Microbiol, 2009, 7(6): 439–450.

    [24] De Groot RJ, Baker SC, Baric RS, et al. Middle east respiratory syndrome coronavirus (MERS Cov): announcement of the coronavirus study group. J Virol, 2013, 87(14): 7790–7792.

    [25] Drosten C, Günther S, Preiser W, et al. Identification of a novel coronavirus in patients with severe acute respiratory syndrome. N Eng J Med, 2003, 348(20): 1967–1976.

    [26] Namy O, Moran SJ, Stuart DI, et al. A mechanical explanation of RNA pseudoknot function in programmed ribosomal frameshifting. Nature, 2006, 441(7090): 244–247.

    [27] Sawicki SG, Sawicki DL, Siddell SG. A contemporary view of coronavirus transcription. J Virol, 2007, 81(1): 20–29.

    [28] Li WD, Shi ZL, Yu M, et al. Bats are natural reservoirs of SARS-like coronaviruses. Science, 2005, 310(5748): 676–679.

    [29] Von Brunn A, Ciesek S, Von Brunn B, et al. Genetic deficiency and polymorphisms of cyclophilin A reveal its essential role for Human Coronavirus 229E replication. Curr Opin Virol, 2015, 14: 56–61.

    [30] Van Der Hoek L, Pyrc K, Jebbink MF, et al. Identification of a new human coronavirus. Nat Med, 2004, 10(4): 368–373.

    [31] Woo PCY, Lau SKP, Chu CM, et al. Characterization and complete genome sequence of a novel coronavirus, coronavirus HKU1, from patients with pneumonia. J Virol, 2005, 79(2): 884–895.

    [32] Xu XT, Chen P, Wang JF, et al. Evolution of the novel coronavirus from the ongoing Wuhan outbreak and modeling of its spike protein for risk of human transmission. Sci China Life Sci, 2020, 63, https://doi.org/10.1007/s11427-020-1637-5.

    [33] Luo C, Luo HB, Zheng SX, et al. Nucleocapsid protein of SARS coronavirus tightly binds to human cyclophilin A. Biochem Biophys Res Commun, 2004, 321(3): 557–565.

    [34] Yurchenko V, Zybarth G, O’Connor M, et al.Active site residues of cyclophilin A are crucial for its signaling activity via CD147. J Biol Chem, 2002, 277(25): 22959–22965.

    [35] Chen ZN, Mi L, Xu J, et al. Function of HAb18G/CD147 in invasion of host cells by severe acute respiratory syndrome coronavirus. J Infect Dis, 2005, 191(5): 755–760.

    [36] de Wilde AH, Zevenhoven-Dobbe JC, van der Meer Y, et al. Cyclosporin A inhibits the replication of diverse coronaviruses. J General Virol, 2011, 92(11): 2542–2548.

    [37] Wathelet MG, Orr M, Frieman MB, et al. Severe acute respiratory syndrome coronavirus evades antiviral signaling: role of nsp1 and rational design of an attenuated strain. J Virol, 2007, 81(21): 11620–11633.

    [38] Züst R, Cervantes-Barragán L, Kuri T, et al. Coronavirus non-structural protein 1 is a major pathogenicity factor: implications for the rational design of coronavirus vaccines. PLoS Pathog, 2007, 3(8): e109.

    [39] Pfefferle S, Sch?pf J, K?gl M, et al. The SARS-coronavirus-host interactome: identification of cyclophilins as target for pan-coronavirus inhibitors. PLoS Pathog, 2011, 7(10): e1002331.

    [40] Carbajo-Lozoya J, Ma-Lauer Y, Male?evi? M, et al. Human coronavirus NL63 replication is cyclophilin A-dependent and inhibited by non-immunosuppressive cyclosporine A-derivatives including Alisporivir. Virus Res, 2014, 184: 44–53.

    [41] Tanaka Y, Sato Y, Sasaki T. Feline coronavirus replication is affected by both cyclophilin A and cyclophilin B. J General Virol, 2017, 98(2): 190–200.

    [42] Smith EC, Denison MR. Coronaviruses as DNA wannabes: a new model for the regulation of RNA virus replication fidelity. PLoS Pathog, 2013, 9(12): e1003760.

    [43] Quesniaux VFJ, Schreier MH, Wenger RM, et al. Cyclophilin binds to the region of cyclosporine involved in its immunosuppressive activity. Eur J Immunol, 1987, 17(9): 1359–1365.

    [44] Brockway SM, Denison MR. Mutagenesis of the murine hepatitis virus nsp1-coding region identifies residues important for protein processing, viral RNA synthesis, and viral replication. Virology, 2005, 340(2): 209–223.

    [45] De Wilde AH, Raj VS, Oudshoorn D, et al. MERS-coronavirus replication induces severecytopathology and is strongly inhibited by cyclosporin A or interferon-α treatment. J Gen Virol, 2013, 94(8): 1749–1760.

    [46] Gally PA, Lin K. Profile of alisporivir and its potential in the treatment of hepatitis C. Drug Des Devel Ther, 2013, 7: 105–115.

    [47] Ma-Laurer Y, Zheng Y, Male?evi? M, et al. Influences of cyclosporin A and non-immunosuppressive derivatives on cellular cyclophilins and viral nucleocapsid protein during human coronavirus 229E replication. Antiviral Res, 2020, 173: 104620.

    [48] Gallay PA, Chatterji U, Bobardt MD, et al. Characterization of the anti-HCV activities of the new cyclophilin inhibitor STG-175. PLoS ONE, 2016, 11(4): e0152036.

    Role of cyclophilin A during coronavirus replication and the antiviral activities of its inhibitors

    Lu Tian1,2, Wenjun Liu1,2, and Lei Sun1,2

    1,,,100101,2,100049,

    Cyclophilin A (CypA) is a widely distributed and highly conserved protein in organisms. It has peptidyl-prolyl cis/trans isomerase activity and is a receptor for cyclosporin A (CsA). Coronaviruses are enveloped, single-stranded, positive-sense RNA viruses. Seven types of coronaviruses are currently known to infect humans, among which SARS-CoV, MERS-CoV, and SARS-CoV-2 are fatal for humans. It is well established that CypA is essential for the replication of various coronaviruses such as SARS-CoV, CoV-229E, CoV-NL63, and FCoV. Additionally, CsA and its derivatives (ALV, NIM811, etc.) have obvious inhibitory effects on a variety of coronaviruses. These results suggest that CypA is a potential antiviral target and the existing drug CsA might be used as an anti-coronavirus drug. At the end of 2019, SARS-CoV-2 raged in China, which seriously theatern human health and causes huge economic lases. In view of this, we describe the effects of CypA on the replication of coronaviruses and the antiviral activities of its inhibitors, which will provide the scientific basis and ideas for the development of antiviral drugs for SARS-CoV-2.

    cyclophilin A, cyclosporin A, coronaviruses, SARS-CoV-2

    February 1, 2020;

    February 20, 2020

    Supported by:NationalNatural Science Foundation of China (Nos. 31672531, 31972657).

    Lei Sun. Tel: 86-10-64807503; E-mail: sunlei362@im.ac.cn

    國家自然科學(xué)基金(Nos. 31672531, 31972657) 資助。

    10.13345/j.cjb.200049

    田璐, 劉文軍, 孫蕾. 親環(huán)素A對冠狀病毒復(fù)制的影響及其抑制劑的抗病毒作用研究進(jìn)展. 生物工程學(xué)報(bào), 2020, 36(4): 605–611.

    Tian L, Liu WJ, Sun L.Role of cyclophilin A during coronavirus replication and the antiviral activities of its inhibitors. Chin J Biotech, 2020, 36(4): 605–611.

    (本文責(zé)編 陳宏宇)

    猜你喜歡
    環(huán)素免疫抑制基因組
    牛參考基因組中發(fā)現(xiàn)被忽視基因
    豬免疫抑制性疾病的病因、發(fā)病特點(diǎn)及防控措施
    多西環(huán)素漲至800元/kg,95%的原料暴漲,動(dòng)保企業(yè)也快扛不住了!
    防控豬群免疫抑制的技術(shù)措施
    過表達(dá)親環(huán)素J 促進(jìn)肝癌的發(fā)生
    丹參總酚酸對大鼠缺血性腦卒中后免疫抑制現(xiàn)象的改善作用
    親環(huán)素A與慢性心力衰竭相關(guān)性的研究
    米諾環(huán)素治療老年醫(yī)院獲得性肺炎28例
    基因組DNA甲基化及組蛋白甲基化
    遺傳(2014年3期)2014-02-28 20:58:49
    有趣的植物基因組
    成人亚洲欧美一区二区av| 一级毛片 在线播放| 男女国产视频网站| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 丝袜喷水一区| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产高清国产精品国产三级| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美激情极品国产一区二区三区| 操出白浆在线播放| 精品少妇内射三级| 丝瓜视频免费看黄片| 十八禁网站网址无遮挡| 久久久久精品性色| 亚洲国产精品国产精品| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 成人国产麻豆网| 日本av手机在线免费观看| 97精品久久久久久久久久精品| 欧美97在线视频| 免费观看av网站的网址| 成人国语在线视频| 亚洲一区中文字幕在线| av视频免费观看在线观看| 国产成人精品久久二区二区91 | 午夜激情av网站| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久国产精品大桥未久av| 日韩伦理黄色片| 日本爱情动作片www.在线观看| 天堂俺去俺来也www色官网| 免费看不卡的av| 国产精品 国内视频| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 精品久久久精品久久久| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲精品国产一区二区精华液| 国产精品熟女久久久久浪| 波多野结衣av一区二区av| 国产精品av久久久久免费| 精品久久久久久电影网| 国产精品熟女久久久久浪| 波多野结衣av一区二区av| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 国产色婷婷99| 天堂中文最新版在线下载| 久久久久视频综合| 在现免费观看毛片| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| a 毛片基地| 不卡av一区二区三区| 久久久精品94久久精品| 日韩 亚洲 欧美在线| 精品一品国产午夜福利视频| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品av麻豆狂野| 三上悠亚av全集在线观看| 久久鲁丝午夜福利片| 日韩伦理黄色片| 嫩草影院入口| 久久狼人影院| 成人手机av| 综合色丁香网| 十八禁高潮呻吟视频| 精品国产露脸久久av麻豆| 99热网站在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 欧美黑人精品巨大| 成人黄色视频免费在线看| 久久精品久久精品一区二区三区| 涩涩av久久男人的天堂| 麻豆av在线久日| 国产人伦9x9x在线观看| 18禁动态无遮挡网站| 精品酒店卫生间| 亚洲av成人精品一二三区| 精品卡一卡二卡四卡免费| 极品少妇高潮喷水抽搐| 欧美激情高清一区二区三区 | 亚洲精品一区蜜桃| 中文天堂在线官网| 精品第一国产精品| 亚洲国产精品国产精品| 欧美在线一区亚洲| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 男女床上黄色一级片免费看| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲四区av| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 一级片免费观看大全| av一本久久久久| 性色av一级| 国产在线视频一区二区| 成年女人毛片免费观看观看9 | 飞空精品影院首页| 久久久久久久久久久免费av| 大片电影免费在线观看免费| 老汉色∧v一级毛片| 国产在线免费精品| 啦啦啦在线观看免费高清www| 美女国产高潮福利片在线看| 亚洲视频免费观看视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 99九九在线精品视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产成人精品无人区| 伦理电影免费视频| 亚洲精品一区蜜桃| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品女同一区二区软件| 在线观看人妻少妇| 午夜日本视频在线| 天美传媒精品一区二区| 亚洲成人免费av在线播放| 欧美在线一区亚洲| 国产精品女同一区二区软件| 少妇精品久久久久久久| 一区二区三区精品91| 啦啦啦在线免费观看视频4| 国产乱人偷精品视频| 51午夜福利影视在线观看| 欧美国产精品一级二级三级| 久久久久久人人人人人| 亚洲国产精品一区二区三区在线| av天堂久久9| 老司机靠b影院| 免费高清在线观看日韩| √禁漫天堂资源中文www| 天堂俺去俺来也www色官网| 亚洲中文av在线| 七月丁香在线播放| 建设人人有责人人尽责人人享有的| 国产成人精品福利久久| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 九色亚洲精品在线播放| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久性视频一级片| 老司机深夜福利视频在线观看 | av在线老鸭窝| 香蕉国产在线看| 亚洲欧美一区二区三区久久| 少妇被粗大的猛进出69影院| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 在现免费观看毛片| 国产精品二区激情视频| 精品一区二区免费观看| 国产精品久久久久久精品电影小说| 国产毛片在线视频| 亚洲av福利一区| 青春草国产在线视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产视频首页在线观看| 黄色 视频免费看| 色网站视频免费| 一边亲一边摸免费视频| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲精品自拍成人| 大片免费播放器 马上看| 亚洲国产看品久久| 午夜老司机福利片| 国产 精品1| 在线天堂中文资源库| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲精品成人av观看孕妇| 美女高潮到喷水免费观看| 777米奇影视久久| 丰满饥渴人妻一区二区三| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 精品一区二区三卡| 精品国产一区二区久久| 久久久久国产精品人妻一区二区| 99国产综合亚洲精品| 国产高清国产精品国产三级| 丝袜喷水一区| 99热国产这里只有精品6| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 亚洲中文av在线| 免费久久久久久久精品成人欧美视频| 99久久人妻综合| 国产精品 国内视频| 啦啦啦在线免费观看视频4| 在线观看一区二区三区激情| 99香蕉大伊视频| 久久久久网色| 日本黄色日本黄色录像| 久久久久国产一级毛片高清牌| 一区二区三区激情视频| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 色视频在线一区二区三区| 精品亚洲成国产av| av免费观看日本| 日本欧美国产在线视频| 久久精品人人爽人人爽视色| √禁漫天堂资源中文www| 男人舔女人的私密视频| 只有这里有精品99| 男人爽女人下面视频在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 国产人伦9x9x在线观看| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 在线观看免费日韩欧美大片| 在现免费观看毛片| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产av国产精品国产| 精品视频人人做人人爽| 女人精品久久久久毛片| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 婷婷色麻豆天堂久久| 午夜91福利影院| 久久亚洲国产成人精品v| 桃花免费在线播放| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 人成视频在线观看免费观看| netflix在线观看网站| 国产又色又爽无遮挡免| 国产男人的电影天堂91| 99久久人妻综合| 18在线观看网站| 国语对白做爰xxxⅹ性视频网站| 熟女av电影| 一本色道久久久久久精品综合| 啦啦啦啦在线视频资源| 亚洲av日韩在线播放| av在线播放精品| 秋霞伦理黄片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 亚洲国产成人一精品久久久| 在线观看免费日韩欧美大片| www日本在线高清视频| 日本黄色日本黄色录像| 精品第一国产精品| 国产精品国产av在线观看| 最近最新中文字幕免费大全7| 老汉色∧v一级毛片| 人成视频在线观看免费观看| 我要看黄色一级片免费的| 老汉色av国产亚洲站长工具| 中国国产av一级| 午夜影院在线不卡| 99香蕉大伊视频| 在线免费观看不下载黄p国产| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 男男h啪啪无遮挡| 国产伦理片在线播放av一区| 精品一区在线观看国产| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 亚洲美女视频黄频| 亚洲三区欧美一区| 男女边摸边吃奶| 一级毛片我不卡| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 国产激情久久老熟女| 日日啪夜夜爽| 亚洲美女视频黄频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 18在线观看网站| 老司机影院成人| 国产免费现黄频在线看| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲精品国产一区二区精华液| 亚洲少妇的诱惑av| 日本wwww免费看| 久久精品久久久久久久性| 满18在线观看网站| 99九九在线精品视频| 欧美日本中文国产一区发布| 国产一区二区 视频在线| 美女中出高潮动态图| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久人人97超碰香蕉20202| 久久99精品国语久久久| 欧美日韩精品网址| 免费观看av网站的网址| 又黄又粗又硬又大视频| 国产免费现黄频在线看| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 熟女av电影| 男女边吃奶边做爰视频| 搡老岳熟女国产| 国产麻豆69| 亚洲精品国产区一区二| 成人手机av| 少妇人妻精品综合一区二区| 满18在线观看网站| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 免费高清在线观看日韩| 色视频在线一区二区三区| 久久毛片免费看一区二区三区| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲一区中文字幕在线| 国产免费现黄频在线看| 高清不卡的av网站| 亚洲成人免费av在线播放| 亚洲精品视频女| 老司机亚洲免费影院| 免费高清在线观看日韩| 99九九在线精品视频| 岛国毛片在线播放| 亚洲精品av麻豆狂野| 欧美人与善性xxx| 欧美另类一区| 两个人免费观看高清视频| 日韩中文字幕视频在线看片| 一级爰片在线观看| 国产成人a∨麻豆精品| 久久精品国产亚洲av涩爱| 中国国产av一级| 两个人免费观看高清视频| 一级片'在线观看视频| 午夜福利视频在线观看免费| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产精品一国产av| 悠悠久久av| 91aial.com中文字幕在线观看| 精品少妇一区二区三区视频日本电影 | 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产精品久久久久成人av| 波野结衣二区三区在线| 久久精品国产综合久久久| 捣出白浆h1v1| 悠悠久久av| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 免费黄色在线免费观看| 亚洲一区二区三区欧美精品| 国产乱来视频区| 亚洲av中文av极速乱| 九色亚洲精品在线播放| 婷婷色麻豆天堂久久| 一级a爱视频在线免费观看| 欧美精品一区二区大全| 狂野欧美激情性bbbbbb| 丝袜人妻中文字幕| 久久精品久久久久久久性| 超色免费av| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 亚洲精品,欧美精品| 一边摸一边做爽爽视频免费| 成人手机av| 一区二区三区激情视频| 亚洲天堂av无毛| 国产精品久久久久久精品古装| 免费人妻精品一区二区三区视频| 婷婷成人精品国产| 免费在线观看黄色视频的| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲av成人精品一二三区| 成年av动漫网址| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产精品蜜桃在线观看| 国产极品粉嫩免费观看在线| 99久久人妻综合| 极品人妻少妇av视频| 亚洲国产精品国产精品| 可以免费在线观看a视频的电影网站 | 日本午夜av视频| 美女视频免费永久观看网站| 操出白浆在线播放| 97在线人人人人妻| 精品午夜福利在线看| 欧美在线黄色| 欧美中文综合在线视频| 免费看不卡的av| 中国国产av一级| 人妻一区二区av| 人人澡人人妻人| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲综合精品二区| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 秋霞伦理黄片| 国产亚洲最大av| 国产精品久久久人人做人人爽| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲国产精品999| 91老司机精品| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 少妇 在线观看| 又大又爽又粗| 老汉色∧v一级毛片| 婷婷色综合大香蕉| 国产深夜福利视频在线观看| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产成人系列免费观看| 2018国产大陆天天弄谢| 国产精品久久久人人做人人爽| av天堂久久9| 中文字幕人妻丝袜一区二区 | 高清黄色对白视频在线免费看| 成年人午夜在线观看视频| 男的添女的下面高潮视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产精品成人在线| 中文字幕亚洲精品专区| 桃花免费在线播放| 在线观看免费视频网站a站| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久av网站| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲av电影在线进入| 亚洲精品国产av成人精品| 男女之事视频高清在线观看 | 欧美成人精品欧美一级黄| 日韩伦理黄色片| 高清在线视频一区二区三区| 777米奇影视久久| 久热这里只有精品99| 国产片内射在线| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲精品av麻豆狂野| 老司机影院毛片| 老司机深夜福利视频在线观看 | 国产伦人伦偷精品视频| 老司机在亚洲福利影院| 久久精品亚洲av国产电影网| 亚洲精品国产av蜜桃| 日本wwww免费看| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 在线观看免费高清a一片| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产精品熟女久久久久浪| 日韩一本色道免费dvd| 妹子高潮喷水视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 国产色婷婷99| 两个人看的免费小视频| 女性生殖器流出的白浆| 2021少妇久久久久久久久久久| 交换朋友夫妻互换小说| 韩国高清视频一区二区三区| 一区二区av电影网| 精品视频人人做人人爽| 我的亚洲天堂| 成人亚洲欧美一区二区av| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 视频在线观看一区二区三区| 如何舔出高潮| 中国三级夫妇交换| 少妇被粗大的猛进出69影院| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产av码专区亚洲av| 在线 av 中文字幕| 国产精品偷伦视频观看了| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 日韩大片免费观看网站| 久久天堂一区二区三区四区| 午夜福利视频精品| 久久99一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 国产 精品1| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 久久人妻熟女aⅴ| a 毛片基地| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 18禁观看日本| 成人三级做爰电影| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲国产最新在线播放| 日韩av不卡免费在线播放| 悠悠久久av| 成人国语在线视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 一级片免费观看大全| 丝袜在线中文字幕| 中国三级夫妇交换| 久久亚洲国产成人精品v| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲av日韩在线播放| 国产亚洲一区二区精品| 少妇人妻久久综合中文| 久久久精品免费免费高清| 最近中文字幕高清免费大全6| 欧美日韩综合久久久久久| av不卡在线播放| 亚洲精品,欧美精品| 乱人伦中国视频| 国产激情久久老熟女| 久久久久精品人妻al黑| 亚洲四区av| 一区二区三区精品91| 乱人伦中国视频| 夫妻午夜视频| 成人免费观看视频高清| 国产精品久久久久久精品电影小说| 午夜av观看不卡| 国产日韩欧美亚洲二区| 久久午夜综合久久蜜桃| 国产高清不卡午夜福利| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲av成人精品一二三区| 国产精品香港三级国产av潘金莲 | 日日爽夜夜爽网站| 国产福利在线免费观看视频| 999精品在线视频| 久久久久视频综合| 在线精品无人区一区二区三| 99久久99久久久精品蜜桃| 美女大奶头黄色视频| 国产成人欧美| 在线观看三级黄色| 亚洲精品美女久久av网站| 高清欧美精品videossex| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 国产在线一区二区三区精| 免费av中文字幕在线| 亚洲中文av在线| a 毛片基地| 日本一区二区免费在线视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 午夜福利视频精品| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 色婷婷av一区二区三区视频| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美精品一区二区免费开放| 一级爰片在线观看| 免费观看性生交大片5| 久久99一区二区三区| 欧美 日韩 精品 国产| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产一区二区三区综合在线观看| 五月天丁香电影| 哪个播放器可以免费观看大片| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 久久99热这里只频精品6学生| 精品免费久久久久久久清纯 | 亚洲人成77777在线视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产麻豆69| 1024香蕉在线观看| 婷婷色综合www| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 国产精品久久久av美女十八| av国产精品久久久久影院| 高清黄色对白视频在线免费看| 18禁动态无遮挡网站| www.精华液| 国产精品一区二区在线观看99| 免费黄色在线免费观看| 亚洲免费av在线视频| 久久亚洲国产成人精品v| 无限看片的www在线观看| 午夜av观看不卡| 国产淫语在线视频| 午夜福利视频精品| 亚洲人成电影观看| 午夜影院在线不卡| 日日摸夜夜添夜夜爱| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 丁香六月天网| xxxhd国产人妻xxx| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲美女搞黄在线观看| 久久久久人妻精品一区果冻| 免费观看人在逋| 国产一级毛片在线| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 国产免费现黄频在线看| 青春草国产在线视频| 在线观看三级黄色| 久久久国产精品麻豆| 亚洲欧美激情在线| 各种免费的搞黄视频| www.av在线官网国产| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲av男天堂| 不卡视频在线观看欧美| 国产精品99久久99久久久不卡 | 亚洲视频免费观看视频| 一本大道久久a久久精品| 最黄视频免费看| 考比视频在线观看| 亚洲欧美清纯卡通| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 中文字幕高清在线视频| 这个男人来自地球电影免费观看 | 黄片播放在线免费| 交换朋友夫妻互换小说| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 国产女主播在线喷水免费视频网站| 九九爱精品视频在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 国产成人精品久久二区二区91 | 69精品国产乱码久久久| 午夜免费观看性视频| 日韩欧美精品免费久久| 69精品国产乱码久久久| 热99久久久久精品小说推荐| 99久国产av精品国产电影| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产毛片在线视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 国产成人免费观看mmmm| 黄色视频不卡| 青草久久国产| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 欧美另类一区|