牛病毒性腹瀉病的研究進(jìn)展

曹潁超，陶曉麗

（臨潁縣畜牧局，河南 臨潁 462600）

1 病原學(xué)

牛病毒性腹瀉病的病原為病毒性腹瀉病毒，在分類上，它和豬瘟病毒、羊的邊界病毒都屬于瘟病毒屬。在電子顯微鏡下，本病毒外觀呈球型，遺傳物質(zhì)為單股正鏈的RNA。該病毒的全長為約為12.5kb，只有一個(gè)開放閱讀框，可以編碼12個(gè)蛋白左右。本病毒有兩個(gè)基因型，不同的基因型之間的差異并不顯著。

2 流行病學(xué)

牛病毒性腹瀉病毒在世界范圍內(nèi)廣泛流行，其流行情況因不同的牛場，飼養(yǎng)管理水平和防控措施不同而又很大的差異。有研究報(bào)道，加拿大牛病毒性腹瀉的抗體陽性率在38%左右，巴西和韓國在60%左右。在牛病毒性腹瀉病毒的流行株當(dāng)中，因地方差異而有很大的不同，如美國流行的毒株是1a亞型，一些歐洲國家流行的毒株是1d亞型。我國關(guān)于此病的報(bào)道可以追溯到20世紀(jì)的四十年代，但是是疑似病例，并沒有得到證實(shí)。直到1980年才從牛場第一次分離到本病的毒株病被證實(shí)我國也有此病的發(fā)生和流行。在隨后的幾年里，我國各地區(qū)之間都有此病的報(bào)道，且感染程度各有不同。在楊得勝的一項(xiàng)調(diào)查當(dāng)中，牛病毒性腹瀉病毒的平均陽性率達(dá)到92.5%，且有3個(gè)牛場是100%感染。從流行得毒株看出，我國的毒株以BVDV-1型為主，2型毒株也有報(bào)道，只不過比較少。

3 臨床癥狀

牛感染病毒性腹瀉病毒后，常表現(xiàn)為亞臨床癥狀，亞臨床癥狀指的是在臨床正呈一過性，外觀上看不到癥狀的出現(xiàn)，可能會(huì)有輕微得體溫升高和白細(xì)胞得減少。有的牛對此病毒比較敏感，就會(huì)表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀，其中以腹瀉為主。當(dāng)感染的牛是犢牛時(shí)，其死亡率相對比較高?；疾∨Ｔ诟篂a后場表現(xiàn)為精神沉郁、食欲減退、分泌物增多等。有的地方流行的毒株是高致病性的話，患病牛就會(huì)出現(xiàn)血便、鼻出血、粘膜出血等癥狀，隨后會(huì)出現(xiàn)貧血、消瘦白細(xì)胞嚴(yán)重減少，中性白血球減少等癥狀。

4 病毒常用的診斷方法

4.1 病毒的分離

病毒的分離并不能確診本病，這只是病毒確診的第一步，但是病毒的分離鑒定是病毒進(jìn)行純化和分型的主要環(huán)節(jié)，且病毒分離的方法的可信度非常高。但是這種方法有自身的缺陷，如花費(fèi)時(shí)間比較長，且只適合小樣本的檢測，對于大批量的樣本的檢測，并不適用。

4.2 RT-PCR技術(shù)

PCR技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室鑒定該病毒最常見的方法，本方法所用的病料也非常易得，如血清、血漿全血、組織等都可以。用核酸提取試劑盒提取基因組RNA，再以RNA為模板進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，即可得到樣本的陰性或者陽性結(jié)果。普通的PCR檢測方法相對于病毒的分離方法速度有很大的提升，可以在較短時(shí)間內(nèi)批量檢測樣本。隨著分子生物學(xué)的研究進(jìn)展，熒光定量PCR技術(shù)也被應(yīng)用到該病毒的檢測上，該檢測方法以其特異性好，靈敏度高等有點(diǎn)被廣泛應(yīng)用到該病的檢測當(dāng)中。

4.3 ELISA試驗(yàn)

ELISA試驗(yàn)是基于抗原抗體反應(yīng)的原理建立的檢測方法，有用該檢測方法檢測血清中的抗原的，也有檢測血清中的抗體的，但是無論是檢測抗原還是抗體，本檢測方法的敏感性、特異性和重復(fù)性都非常好。

4.4 病毒中和試驗(yàn)

機(jī)體受到牛病毒性腹瀉病毒感染之后，機(jī)體會(huì)產(chǎn)生特異性的中和抗體，這種抗體與病毒粒子相結(jié)合，可以應(yīng)用病毒與抗體的這種特性，在體外培養(yǎng)的細(xì)胞上阻止這種結(jié)合，從而使病毒失去感染的能力。中和試驗(yàn)是根據(jù)病毒受待檢血清中和后的感染來判定免疫血清中和病毒的能力的。常見的中和試驗(yàn)的方法有兩種，一種是一定病毒量與相同量的血清進(jìn)行混合，另一種是一定量的血清與等量的病毒進(jìn)行混合。然后把混合液接種到牛腎細(xì)胞，從而測定其效價(jià)。

5 防控

牛病毒性腹瀉病對于養(yǎng)牛業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，因此，必須制定全面的防控策略進(jìn)行該病的防控。首先要做的是對該病進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，包括流行的地區(qū)、流行的毒株類型，群體和個(gè)體的感染情況，發(fā)病情況以及發(fā)病率與死亡率，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行采樣，實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測與診斷、用藥。其次就是提高管理水平，在養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐當(dāng)中要制定合理的生物安全防護(hù)措施，嚴(yán)格規(guī)定牛場的飼養(yǎng)密度，落實(shí)疫苗接種計(jì)劃。最后就是對該病的凈化。對牛群進(jìn)行全滿篩查，一旦查出陽性牛只，立即淘汰，從而凈化整個(gè)養(yǎng)牛場的環(huán)境。