白細胞表達趨勢在監(jiān)測癌前病損和OSCC早期診斷中的價值研究

李騰艷 聶敏海 陳瀟 劉旭倩

口腔鱗狀細胞癌(oral squamous cell carcinoma, OSCC)是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤之一，多發(fā)生在40歲以上男性，好發(fā)于舌、頰、牙齦等部位[1]，常對患者生命造成極大威脅。目前OSCC的治療方法主要是以手術為主的序列治療，術后復發(fā)幾率大；手術的切除范圍較大，術后對軟硬組織的修復困難。有研究發(fā)現，約 1.1%的 OSCC 是由口腔扁平苔蘚(oral lichen planus, OLP)等癌前病損(precancerous lesions)發(fā)展而來[2]。OLP 是發(fā)生于口腔黏膜的慢性炎癥性病變，其所有類型 OLP 均有惡變可能[3]。有大量的研究報告了炎癥與腫瘤間的密切關系，如王站等[4]研究發(fā)現C反應蛋白、淋巴細胞數目、中性粒/淋巴細胞比值與腎透明細胞癌的病理分級密切相關， 杜曉娟等[5]發(fā)現 IL-6可促進BxPC-3胰腺癌細胞生長增殖。在對OSCC的研究中有相似的發(fā)現，Pandya等[6]發(fā)現淋巴細胞、中性粒細胞等炎細胞在OSCC浸潤前沿表達異常，Arjunan等[7]發(fā)現慢性牙周炎患者相關致病因子通過誘導炎癥發(fā)生、促血管生成而促進OSCC增殖、浸潤，de Sousa等[8]證實OSCC的發(fā)生、發(fā)展與實體瘤中免疫細胞的聚集有關，在對口腔鱗狀細胞癌患者外周血的研究中發(fā)現血清中IL-8高于正常人，且與病理分級呈正相關[9]，IL-32在外周血中呈明顯的高表達[10], TH17細胞的頻率明顯增加[11]，OSCC患者手術前后外周血中CD4+、CD8+、B細胞等表達具有差異性[12]，在與OLP和口腔白斑(oral leukoplakia, OLK)的對比研究中發(fā)現，OSCC組織中T細胞與巨噬細胞的數量以及IL-10表達多于OLP或OLK[13]。本研究通過對 NOM、OLP患者及OSCC 患者血常規(guī)報告中的白細胞及其各分類參數作回顧性分析，發(fā)現NOM、OLP患者及OSCC 患者多個指標表達呈現一定的變化趨勢，提示參考白細胞及各分類參數指標表達趨勢的變化作為輔助依據來監(jiān)測OLP等癌前病損的惡變和對 OSCC 進行早期診斷的可能性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018-05-01～2019-05-30來西南醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院門診要求拔除智齒的患者、OLP患者及住院部經病理確診為OSCC患者的血常規(guī)檢測報告，其中，要求拔除智齒患者的口腔黏膜無明顯異常，口腔局部及全身無明顯炎癥性疾病，口腔黏膜為正?？谇火つ?normal oral mucosa, NOM)(在后續(xù)的研究與分析中將其作為正常對照組)。共收集智齒拔除者血常規(guī)報告55 例、OLP 患者血常規(guī)報告61 例、OSCC患者血常規(guī)報告52 例(表 1)。收集利用的血常規(guī)檢查報告均為患者初次就診時測得，尚未經過任何治療，排除具有系統(tǒng)性疾病和全身其他感染性疾病患者。

表 1 患者基本情況

1.2 觀察指標

觀察指標為血常規(guī)報告中的白細胞計數(WBC)及其各分類參數指標即單核細胞數目(MONO)、單核細胞率(MONO-R)、嗜酸性粒細胞數目(EOS)、嗜酸性粒細胞率(EOS-R)、嗜堿性粒細胞數目(BASO)、嗜堿性粒細胞率(BASO-R)、淋巴細胞數目(LYM)、淋巴細胞率(LYM-R)、中性粒細胞數目(NEU)、中性粒細胞率(NEU-R)。

1.3 統(tǒng)計學方法

利用SPSS 20.0軟件對數據進行統(tǒng)計學分析，對各組數據進行正態(tài)性檢驗及方差齊性檢驗，正態(tài)方差齊者采用方差分析，方差不齊者采用 Kruskal-Walliss秩和檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結 果

3 組WBC對比見表 2。3 組單核細胞相關參數(MONO、MONO-R) 對比如表 3。3 組嗜酸性粒細胞相關參數(EOS、EOS-R)對比如表 4。 3 組嗜堿性粒細胞相關參數(BASO、BASO-R)對比如表 5。

表 2 各組間WBC比較情況

表 3 各組間單核細胞參數(MONO、MONO-R)比較情況

表 4 各組間嗜酸性粒細胞參數(EOS、EOS-R)比較情況

表 5 各組間嗜堿性粒細胞參數(BASO、BASO-R)比較情況

3 組中性粒細胞相關參數(NEU、NEU-R)對比如表 6。3 組淋巴細胞相關參數(LYM、LYM-R)對比如表 7。

表 6 各組間中性粒細胞參數(NEU、NEU-R)比較情況

表 7 各組間淋巴細胞參數(LYM、LYM-R)比較情況

綜上，OSCC、OLP、NOM 3 組 WBC、NEU、NEU-R 指標差異無統(tǒng)計學意義。OSCC組MONO和MONO-R兩項參數均高于OLP組和NOM組，而LYM和LYM-R兩項指標低于NOM組；在嗜酸性粒細胞的參數比較上，OSCC組EOS、EOS-R高于OLP組，OSCC組BASO、BASO-R低于OLP組和NOM組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

3 結 論

白細胞參數在OSCC與OLP患者中存在差異，呈現出一定的變化趨勢，OSCC患者與OLP患者比較，其單核細胞和嗜酸性粒細胞參數變化呈上升趨勢，而其嗜堿性粒細胞參數呈現下降趨勢，推測炎癥反應在OLP癌變過程中發(fā)揮了一定作用，提示可以將白細胞參數作為監(jiān)測OLP即癌前病損惡變、早期診斷OSCC的參考依據的可能性。

4 討 論

OLP是臨床常見的口腔癌前病損之一，診斷、治療不及時可發(fā)生癌變，最常見發(fā)展為OSCC。OSCC是口腔頜面部最常見的惡性腫瘤之一，因腫瘤的生長特點及發(fā)生部位的特殊性，治療困難，預后較差，對患者生命和生活質量造成極不利影響。白細胞是人體血液中的一大類與炎癥反應有關的細胞，其各分類分別在炎癥反應過程中發(fā)揮著一定的作用。本研究希望通過對NOM、OLP患者、OSCC患者的血常規(guī)中的白細胞及其各分類參數指標的變化趨勢進行分析，發(fā)現有意義的參數變化趨勢，尋找可能有意義的監(jiān)測OLP等癌前病損、早期診斷OSCC的指標，指導臨床工作的開展。

本研究發(fā)現OLP患者相對NOM而言，在白細胞總數及分類參數上差異均不具有統(tǒng)計學意義，未表現出明顯的變化趨勢，而OSCC患者相比較OLP患者而言，其單核細胞和嗜酸性粒細胞參數變化呈現上升趨勢，嗜堿性粒細胞參數變化呈現下降趨勢。白細胞的變化是機體炎癥反應的一種表現，據此，炎癥在OLP等癌前病損惡變、OSCC發(fā)生過程中發(fā)揮了一定作用，而這個作用可通過白細胞參數變化趨勢表現出來，所以白細胞的參數變化趨勢可能作為輔助監(jiān)測OLP等癌前病損、早期診斷OSCC的有效指標。

本研究結果與眾多學者的研究結果基本一致，國內外大量研究表明炎癥與腫瘤之間存在密切的聯(lián)系，炎癥反應的存在增加了發(fā)癌的危險性。機體的炎癥狀態(tài)是其抵御病原體的表現，但長期炎性刺激則可能導致癌變[14]，推測長期存在的炎性狀態(tài)在OLP惡變過程中發(fā)揮了重要作用。OLP是一種慢性炎癥性病變，導致機體長期處于一個炎癥與抵御炎癥的狀態(tài)，免疫耐受在機體炎癥與抗炎的長期抗衡中得以形成。Sun等[15]通過對OLP和OSCC中炎癥細胞和炎性細胞因子的研究比較，說明慢性炎癥誘導的免疫抑制可促進腫瘤的發(fā)生。癌基因或抑癌基因是炎癥途徑的調節(jié)因子，它們在癌前細胞中的激活或丟失通過募集炎癥細胞和相關細胞因子驅動腫瘤微環(huán)境的重塑。根據癌前細胞的變化募集到的炎癥細胞和釋放的細胞因子的組成不同，可能促進腫瘤的發(fā)生[16]。曾有學者調查研究[17]發(fā)現，高達 20%的癌癥患者其癌癥病變可能由細菌感染、長期接觸致癌物質或長期慢性炎癥發(fā)展而來； 此外，腫瘤細胞可以激活各種免疫抑制機制[18]，對腫瘤的發(fā)展起促進作用，形成一個惡性循環(huán)。學者研究發(fā)現炎癥細胞因子的刺激可促進宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展[19]，炎癥可能抑制抗腫瘤的免疫反應而促進直腸癌的發(fā)生、發(fā)展[20]。ARID1A 缺陷的 PDAC 細胞顯示促炎細胞程序的上調[21]。這些發(fā)現提示腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與炎癥有著重要的聯(lián)系，在癌癥患者體內存在炎性腫瘤微環(huán)境[22]，炎癥被認為是腫瘤的一個重要特征[23]。

本研究結果提示在OSCC 患者外周血中嗜酸性粒細胞相關參數比 OLP 患者高、嗜堿性粒細胞參數比OLP 患者低。嗜酸性粒細胞增高、嗜堿性粒細胞減少通常發(fā)生在機體發(fā)生超敏反應時。推測OSCC的發(fā)生與超敏反應有一定的關系，而關于腫瘤與超敏反應的關系，目前為止已有大量相關的研究。這些研究多以IgE 和 IgG 為橋梁。有學者發(fā)現 FcεRI-IgE 免疫復合物的形成可激活與急性和慢性過敏反應相關的效應細胞，經研究證實，嗜酸性粒細胞是一種可浸潤腫瘤組織的 IgE 的效應細胞。肥大細胞與嗜酸性粒細胞一樣具有強嗜酸性顆粒，發(fā)揮相應作用，研究發(fā)現腫瘤內的肥大細胞脫顆粒的現象與IgE免疫復合物的形成有關；研究表明 TNF-α可促進抗腫瘤免疫，而肥大細胞是其重要來源。體外實驗表明，針對腫瘤抗原起作用的IgE 能夠引起人單核細胞抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)，而通過其與 FcγRs 的相互作用，具有相同抗原特異性的 IgG 1y 可以指示相同的細胞觸發(fā)抗體依賴性細胞介導的吞噬作用(ADCP)。IgE 抗癌抗體通過與 FcεRI 表達的效應細胞的亞群結合，以介導 ADCC 抗腫瘤。過敏的特征是 T 2顯性免疫應答，以 IL-4、IL-13 和胸腺基質淋巴生成素上調為特征，而在癌組織中也可以觀察到這些介質[24]。研究發(fā)現IgG 4 在黑色素瘤等惡性腫瘤患者的組織中表達[25]，另有研究支持 IgG 4 與癌癥風險增加之間的正相關關系[26]。Karagiannis等[27]發(fā)現與變態(tài)反應患者相比，癌癥患者血清中明顯檢測到識別癌抗原EGFR和 HER2 的IgE和 IgG 。Zennaro等[28]證實腫瘤微環(huán)境有助于“改良的 T H 2 應答”中類向 IgG 的轉變，這一過程與貓過敏患者報告的高度相似[29]。綜上，推測白細胞參數的變化趨勢在癌前病損的惡變過程中呈現一定規(guī)律-單核細胞和嗜酸性粒細胞參數變化呈上升趨勢，而嗜堿性粒細胞呈下降趨勢，該結論可能成為輔助監(jiān)測癌前病損惡變及早期診斷OSCC的有效依據，其機制將在后續(xù)實驗中作進一步探討。