獼猴桃軟腐病主要病原菌的分離、鑒定及其生長特性研究

石 浩 王仁才 王芳芳 王 琰 卜范文 周 倩

(1 湖南農(nóng)業(yè)大學園藝園林學院， 湖南 長沙 410128；2 湖南應用技術學院農(nóng)林科技學院， 湖南 常德 415100；3 湖南省園藝研究所，湖南 長沙 410125)

獼猴桃(kiwifruit)是一種在國內(nèi)外都十分受歡迎的經(jīng)濟作物，富含維生素C、可溶性膳食纖維、原花青素、黃酮等功能物質(zhì)[1-2]，具有較高的食用價值。近幾年來，隨著其栽種規(guī)模的逐年增加，各種病害也接踵而至[3]。其中對獼猴桃采后危害最嚴重的是獼猴桃軟腐病，在我國陜西、貴州、四川、湖南、江西等地病害現(xiàn)象嚴重，發(fā)病率高達35%以上，對獼猴桃商品果的質(zhì)量造成了具大的影響[4]，對農(nóng)戶也造成了一定的經(jīng)濟損失。1982年新西蘭人Hawthorne等[5]首次對獼猴桃軟腐病進行了報道，隨后意大利、韓國和中國也陸續(xù)進行了相關報道[6-9]。獼猴桃軟腐病病狀主要表現(xiàn)為果實病灶部出現(xiàn)1～3 cm直徑大小、灰暗色的凹陷病斑，病斑處果肉腐化較為嚴重，果肉呈現(xiàn)乳白色。果實發(fā)病后期，在較高溫濕度環(huán)境下，果實病部處出現(xiàn)菌絲，同時表皮滲出一定的組織液。研究表明，無任何損傷的獼猴桃果實也能發(fā)病，且各部位均有病害出現(xiàn)的情況。損傷果發(fā)病情況更嚴重，發(fā)病時間提前，在無損傷果實軟化前期病害較難發(fā)現(xiàn)，而一旦出現(xiàn)病害后，7～9 d內(nèi)可導致整個果實完全腐爛[10]。因此通過分子技術手段，在果實未發(fā)病時及時發(fā)現(xiàn)病原菌，并進行相應病害防治十分必要。目前有關獼猴桃果實軟腐病病原菌鑒定的研究報道不多，同時國內(nèi)外學者對引起軟腐害病原菌的報道存在一定的爭議，且不同品種間病原菌狀況也有所差異[11-12]，為此有必要對湖南地區(qū)獼猴桃軟腐病害進行進一步的研究。目前常采用對病菌基因間隔序列(internal transcribed spacer, ITS)、β-微管蛋白基因(β-tubulin)和延伸因子(EF-1α)測序結(jié)果構建發(fā)育樹的方法來判定病原菌種類[13-14]。本試驗通過對軟腐病原菌分離，ITS測序鑒定病原菌并對病原菌生長特性研究，以期進一步了解獼猴桃軟腐病的主要病菌，間接確定獼猴桃安全貯藏和影響病害發(fā)生的關鍵因子，為研發(fā)獼猴桃采后病害防控及保鮮技術提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

獼猴桃(品種：紅陽)軟腐病病菌感染果和好果，于2017年采自湖南省湘西州獼猴桃園，將果實裝入保鮮袋中，保藏于4℃冰箱備用。

1.2 主要儀器與設備

CP223C電子分析天平，奧豪斯儀器(上海)有限公司；SX-500高壓蒸汽滅菌鍋，海珂淮儀器有限公司；DSZ2000X倒置生物顯微鏡，北京中顯恒業(yè)儀器儀表有限公司；GZ-400-GII恒溫光照培養(yǎng)箱，韶關市廣智科技設備有限公司；PHS-25型PH計，上海儀電控股(集團)公司；T100TM Thermal Cycler PCR儀，美國Bio-Rad公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 獼猴桃軟腐病病原菌的分離與純化 取剛產(chǎn)生軟腐病病狀的獼猴桃果實，用無菌水沖洗雜質(zhì)后除去果實表面水分，然后用已高溫滅菌的解剖刀刮取獼猴桃發(fā)病果實病健交界處的組織，用75%乙醇噴洗消毒約10 s，再用大量無菌水洗去殘余乙醇，用已滅菌的濾紙吸干無菌水，挑取少許待分離的材料組織采用點接法接種于PDA平板上，在27℃培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)3～5 d后，可在平板表面觀察到系列獼猴桃軟腐病病原菌的混合菌落[15]。

從混合菌落中挑取較規(guī)則的單一菌落接種在PDA平板上，在27℃培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)3～5 d，重復純化3次，得單菌落。單菌落培養(yǎng)7～10 d后，觀察菌絲和孢子形態(tài)。同時取出菌落孢子，用無菌水沖洗后稀釋孢子，在PDA平板上將孢子均勻涂抹培養(yǎng)，待長成菌落后挑取部分菌落培養(yǎng)在PDA斜面上，4℃冰箱保存[15-16]。

1.3.2 獼猴桃軟腐病病原菌形態(tài)學鑒定與致病性驗證 將已經(jīng)分離好的單株病原菌，重新接種在新鮮培養(yǎng)基上，27℃條件下培養(yǎng)一個月，期間每隔1～2 d觀察一次菌絲的生長情況，包括菌落的形態(tài)、長度，菌絲的密集度、顏色和形狀等。培養(yǎng)一個月后，觀察菌產(chǎn)生孢子的數(shù)量、結(jié)構、形態(tài)等，結(jié)合文獻[17-18]初步判斷病原菌的種類。

取10個完好的獼猴桃果實(未染病)，其中4個果實接種分離得到的軟腐病病原菌菌絲，4個果實接種軟腐病病原菌孢子懸浮液，2個果實接種無菌水(對照)。采用針刺接種法接種，培養(yǎng)10 d后觀察果實發(fā)病情況，并對癥狀與原發(fā)病果進行比較。同時對接種后獼猴桃病果重新進行分離、純化及鑒定病原菌，確定是否為同一種病菌[19]。

1.3.3 獼猴桃軟腐病病原菌的分子鑒定 培養(yǎng)7～10 d后，應用CTAB法[20]提取純化后病原菌的DNA，以真菌通用ITS4、ITS5為引物?？侾CR反應體系為24 μL，包括2 μL含有20～30 ng DNA模板、1 μL 10 μmol·L-1引物、12.5 μL Premix Ex Taq@Version 2.0及8.5 μL雙蒸水。PCR擴增程序：94℃預變性30 s；94℃變性30 s，55℃退火30 s，72℃延伸30 s，共32個循環(huán)；72℃延伸7 min[15]?；厥誔CR產(chǎn)物送至生工生物工程(上海)股份有限公司測序，再根據(jù)所得序列，采用MEGA7軟件構建系統(tǒng)發(fā)育樹。

1.3.4 獼猴桃軟腐病病原菌生物學生長特性分析 參考丁仁惠等[21]的方法并稍作修改。將直徑為5 mm左右的菌餅分別接種于下列不同培養(yǎng)基、碳源、氮源、pH值、培養(yǎng)溫度的環(huán)境中培養(yǎng)，3 d后采用十字交叉法測量菌落直徑并記錄菌絲密集度，設3次重復。無菌水為對照(CK)，除pH值處理外，其余均為自然pH值，除溫度處理試驗外，其余處理均27℃培養(yǎng)。菌絲生長抑制率計算公式如下：

菌抑制率=(菌絲長對照-菌絲長處理)/菌絲長處理×100%。

培養(yǎng)基：土豆葡萄糖培養(yǎng)基(potato dextrose agar, PDA)、馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基(potato saccharose agar, PSA)、水-瓊脂培養(yǎng)基(water agar, WA)、沙氏培養(yǎng)基(sabouraud agar, SDA)、察氏培養(yǎng)基(czapek agar, CA)、高氏1號培養(yǎng)基(Gauze,s Medium No.1)、燕麥培養(yǎng)基(oat meal agar, OMA)、玉米粉培養(yǎng)基(corn meal medium, CMM)、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(luria bertani, LB)、酵母蛋白胨葡萄糖培養(yǎng)基(yeast extract peptone glucose agar, YPGA)。

碳源：甘露醇、麥芽糖、蔗糖、乳糖、D-山梨醇、可溶性淀粉、木糖、肌醇、D-半乳糖9種碳源代替PDA培養(yǎng)基中的葡萄糖。

氮源：氯化銨、酵母粉、甘氨酸、尿素、硝酸鉀、蛋白胨、硝酸銨、L-丙氨酸、L-賴氨酸9種氮源代替CA培養(yǎng)基中的硝酸鈉。

pH值分別為4、5、6、7、8、9、10、11、12、13的PDA培養(yǎng)基。

培養(yǎng)溫度分別為4、5、10、15、20、25、28、30、35℃。

菌餅置離心管中，離心管分別置于60～90℃(溫度梯度為5℃)的恒溫水浴鍋中處理30 min，冷卻后接種至PDA培養(yǎng)基上，確定病原菌致死溫度。

1.3.5 數(shù)據(jù)處理 采用WPS 2019對試驗數(shù)據(jù)進行處理和分析。采用Statistix 8.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 獼猴桃軟腐病病原菌培養(yǎng)形態(tài)學觀察

從軟腐獼猴桃果實中分離出兩種主要病原菌，分別接種于PDA培養(yǎng)基上，圖1-a-1～4為其中一種菌(占總菌落數(shù)54.8%)，圖1-b-1～4為另一種菌(占總菌落數(shù)34.4%)。圖1-a-1和圖1-b-1均為培養(yǎng)5～7 d的菌絲，其中圖1-a-1中菌絲為純白色的密集卷毛狀，病原菌的菌絲較稀疏，菌落圓形，絨毛狀，無特殊氣味；圖1-b-1中菌絲非常稠密，長圓形，灰色、近棒狀，無特殊氣味。圖1-a-2和圖1-b-2分別為兩種菌培養(yǎng)30 d后生長形態(tài)，其中，圖1-a-2中產(chǎn)生黑色的零散子座，有孔口，上部有不平整凸起；圖1-b-2中菌絲干枯，呈現(xiàn)灰黑色。顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，圖1-a-3菌絲有隔膜和分枝，白色；圖1-a-4分生孢子有兩種形態(tài)，α形分生孢子透明橢球，β分生孢子透明，線狀和一端有鉤狀結(jié)構，分生孢子以α形為主初步鑒定為間座殼菌(Diaporthephaseolorum)，記作NJDMJ[15]；圖1-b-4菌絲同樣有隔膜和分枝，黑色，菌絲直徑為1.0～4.9 μm，可初步鑒定為葡萄座腔菌(Botryosphaeriadothidea)，記作PTZQJ[18]。

注：a、b分別表示同一種病原菌，其中，1為培養(yǎng)5～7 d的病原菌菌絲； 2為培養(yǎng)30 d時的病原菌形態(tài)，3和4均為顯微觀察到的病原菌形態(tài)。Note: a and b show the same pathogenic bacteria. Among them, 1 is the mycelium of pathogenic bacteria cultured for 5 to 7 days, 2 is the mycelium of pathogenic bacteria cultured for 30 days, 3 and 4 are microscopic observation of pathogenic bacteria morphology.圖1 軟腐病病狀的獼猴桃果實中分離的病原菌形態(tài)Fig.1 Morphology of pathogens isolated from kiwifruit fruits with soft rot disease

2.2 獼猴桃軟腐病病菌感染果及接種后獼猴桃好果的發(fā)病癥狀

圖2-a、b為獼猴桃軟腐病病菌感染果的發(fā)病癥狀，有明顯的暗褐色病斑圈。圖2-c～e分別為接種白色菌絲病原菌，黑色菌絲病原菌，以及白色菌絲病原菌、黑色菌絲病原菌混合孢子后的獼猴桃發(fā)病癥狀?？芍?，在室溫27℃和濕度80%左右環(huán)境下培養(yǎng)7～10 d，接種菌絲(圖2-c、d)或菌液(圖2-e)侵染均能使果實發(fā)病。接種病原菌后，獼猴桃果實最顯著特征是果實表面有明顯的凹陷和似圓形的水漬狀病斑，中央病斑呈暗褐色圓形，拇指按壓后尤為明顯，觸摸時有類似氣囊觸感，剝除果皮后果實內(nèi)部可見乳白色圓形或橢圓形病斑，同時有組織液滲出，后期還長出肉眼可見的菌絲，隱約有腐臭氣味。進一步對接種后發(fā)病獼猴桃中的病原菌進行分離純化，得到的病原菌生長形態(tài)、菌絲、孢子均與接種的病原菌一致，可初步鑒定為同一病原菌。

2.3 獼猴桃軟腐病病原菌分子鑒定

將分離得到的兩種病原菌株所得序列登錄NCBI進行BLAST相似度比對，并將病原菌株的序列與同源性為99%的相關序列在MEGA7軟件上進行系統(tǒng)發(fā)育樹的構建。由圖3可知，黑色菌株PTZQJ與Botryosphaeriasp(葡萄座腔菌)聚在同一枝上，同源性達到99%，這與形態(tài)學鑒定結(jié)果一致。白色菌株NJDMJ與Phomopsissp(擬莖點霉菌)、Diaporthephaseolorum(間座殼菌，擬莖點霉菌有性態(tài))聚在同一枝上，同源性達到99%，該菌株為大豆擬莖點種腐病菌，這與上述形態(tài)學鑒定結(jié)果也一致。

2.4 獼猴桃病原菌生態(tài)學特性

2.4.1 不同培養(yǎng)基對獼猴桃病原菌生長菌絲的影響 由表1可知，在相同培養(yǎng)基下葡萄座腔菌的生長速度總體較間座殼菌快，且菌絲更稠密。如在PSA上葡萄座腔菌的生長速度為17.7 mm·d-1，較間座殼菌的生長速度高2.4 mm·d-1；在YPGA上葡萄座腔菌的生長速度為16.4 mm·d-1，較間座殼菌的生長速度高2.5 mm·d-1。在PSA、YPGA、PDA、SDA上兩種病原菌的生長速度均較快，且菌絲比較稠密，而在LB和WA兩種無糖培養(yǎng)基上，病原菌均無法生長，說明糖是這兩種菌生長的必要條件。此外，兩種病原菌都能在CMM、OMA、高氏1號、CA上生長，但生長效果較差，生長速率在6.1～10.2 mm·d-1之間。

圖3 基于ITS序列構建的獼猴桃病原菌系統(tǒng)發(fā)育樹Fig.3 The phylogenetic tree of kiwifruit pathogens based on ITS sequences

2.4.2 不同碳源對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響 碳源是微生物生長中不可或缺的營養(yǎng)物，是構成微生物細胞的骨架，同時也在微生物生長發(fā)育中提供能量。由表2可知，獼猴桃兩種病原菌對糖的依耐性都很強，其中，在未添加碳源的培養(yǎng)基(CK)上兩種病原菌的生長速率僅為2.3、2.7 mm·d-1，幾乎不生長，而在分別以可溶性淀粉、蔗糖和麥芽糖為碳源的培養(yǎng)基上兩種病原菌生長的效果較好，菌絲生長速率在12.4～17.7 mm·d-1之間，在以D-半乳糖、乳糖、D-山梨糖為碳源的培養(yǎng)基上兩種病原菌菌絲生長速率在9.2～11.9 mm·d-1之間。不同類型的碳源對兩種菌的生長具有較大的差異，可能是因為病原菌對不同碳源的吸收利用不同，如以乳糖為碳源的培養(yǎng)基上間座殼菌的生長速度高于葡萄座腔菌，而以麥芽糖為碳源的培養(yǎng)基上間座殼菌的生長速度低于葡萄座腔菌。

2.4.3 不同氮源對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響 由表3可知，以酵母粉、蛋白胨、甘氨酸、L-丙氨酸和L-賴氨酸為氮源的培養(yǎng)基均較適宜獼猴桃兩種病原菌的生長，葡萄座腔菌生長速率在10.9～11.2 mm·d-1之間，間座殼菌生長速率在9.0～9.7 mm·d-1之間；以氯化銨、硝酸鉀、硝酸銨、尿素為氮源的培養(yǎng)上，葡萄座腔菌生長速率在9.6～10.3 mm·d-1之間，間座殼菌生長速率在8.6～9.2 mm·d-1之間。此外，未添加氮源的培養(yǎng)基(CK)上獼猴桃兩種病原菌的生長速率也較高，在8.8～10.2 mm·d-1之間，可能是因為瓊脂中含有一定量的氮源，但也間接說明兩種病原菌對氮源的吸收利用量較低。

2.4.4 不同pH值對獼猴桃病原菌生長的影響 真菌對環(huán)境pH值要求較高，一旦環(huán)境中的pH值出現(xiàn)異常，會在一定程度改變營養(yǎng)物質(zhì)的供給狀態(tài)，給菌體細胞膜電荷性質(zhì)和穩(wěn)定性帶來負面影響，繼而影響菌體對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力。由表4可知，獼猴桃兩種病原菌菌絲在pH值4.0～13.0的培養(yǎng)基上均可生長，其中，pH值為6.0～9.0時，兩種病原菌菌絲生長速度均較快，葡萄座腔菌菌落生長速率達到了18.1～19.3 mm·d-1， 菌絲也非常濃密，間座殼菌菌落生長速率達到16.2～17.2 mm·d-1。而當pH值達到12時，與pH值6時相比，菌絲生長速率相差5 mm·d-1以上。綜上，獼猴桃病原菌菌絲適合在pH值6左右的中酸性環(huán)境中生長，而在強酸強堿環(huán)境中生長緩慢。

2.4.5 不同培養(yǎng)溫度對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響 由表5可知，獼猴桃兩種病原菌在低溫(4～5℃)條件下幾乎不生長，而培養(yǎng)溫度高于10℃時，病原菌菌絲生長速率開始緩慢增加，在培養(yǎng)溫度為25～30℃條件下兩種病原菌生長最快，其中，培養(yǎng)溫度為28℃時葡萄座腔菌生長速率最快，達到18.8 mm·d-1，培養(yǎng)溫度為25℃時間座殼菌生長速率最快，達到17.4 mm·d-1。 繼續(xù)升高培養(yǎng)溫度至35℃時，兩種病原菌的生長速率均有一定程度的下降，表明培養(yǎng)溫度達到35℃后開始抑制獼猴桃病原菌的生長。

表1 不同培養(yǎng)基對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響Table 1 The effects of different mediums on mycelial growth of kiwifruit pathogens

表2 不同碳源對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響Table 2 The effects of different carbon sources on mycelial growth of kiwifruit pathogens

2.4.6 獼猴桃病原菌致死溫度分析 由表6可知，在80℃水浴處理30 min后，接種于PDA培養(yǎng)基上的獼猴桃兩種病原菌均得到了較大程度的抑制，相對于60℃水浴處理30 min，葡萄座腔菌生長抑制率達到了60.29%，間座殼菌生長抑制率達到了82.31%；85℃水浴處理30 min后，間座殼菌死亡，葡萄座腔菌幾乎死亡；90℃水浴處理30 min后，兩種病原菌均無法生長。因此，確定獼猴桃采后軟腐病原菌的致死溫度為85℃。

表3 不同氮源對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響Table 3 The effects of different nitrogen sources on mycelial growth of kiwifruit pathogens

表4 不同pH值對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響Table 4 The effects of different pH value on mycelial growth of kiwifruit pathogens

表5 不同培養(yǎng)溫度對獼猴桃病原菌菌絲生長的影響Table 5 The effects of different temperatures on mycelial growth of kiwifruit pathogens

表6 獼猴桃病原菌的致死溫度Table 6 The lethal temperature of pathogenic bacteria

3 討論

病原菌鑒定是病害防治的關鍵。通過分離獼猴桃采后軟腐病果上的菌體達到對病原菌初步形態(tài)學鑒定的目的，觀察菌絲、孢子形態(tài)特征，孢子囊的產(chǎn)生方式，孢子釋放方式及分子鑒定，是確定菌類所屬的主要方式[22-23]。本試驗采用上述方法確定獼猴桃軟腐主要病害為葡萄座腔菌和間座殼菌。本試驗結(jié)果與前期軟腐病害果微生物多樣性的結(jié)果基本一致，進一步驗證了這兩種病菌是造成獼猴軟腐的主要病菌。本研究還發(fā)現(xiàn)，將兩種病原菌回接于獼猴桃果實上，均能引起果實發(fā)生類似的病斑，且在后期能產(chǎn)生豐富的分生孢子，這與前人相關研究結(jié)果基本一致[11,17]。相對于陸訓等[15]從軟腐獼猴桃中發(fā)現(xiàn)的病原菌，大豆擬莖點種腐病菌(Phomopsislongicolla)有一定的差別，可能是因為獼猴桃品種(翠玉)不一樣，或來自不同地區(qū)果園所致，在今后試驗中可進一步對來自不同地區(qū)的軟腐紅陽獼猴桃進行病原鑒定，在驗證上述假設的同時以期得到更多不同新種類的病原菌。相對于陸訓等[15]、王小潔等[18]的研究發(fā)現(xiàn)，中華系列獼猴桃感染軟腐病的癥狀(病斑)更加明顯，可能是因為美味系列獼猴桃有毛。

中華系列獼猴桃口感佳、鮮食效果更好，經(jīng)濟效益更高，因此今后應著重對中華系列軟腐獼猴桃病原菌進行研究。同時王小潔等[18]研究表明這兩種菌具有較強抵抗低溫的能力，能產(chǎn)出大量的孢子，尤其是間座殼菌，因此獼猴桃種植過程中，需要進行嚴格的冬季清園處理，殺滅這些軟腐病原菌，以免對果子造成侵染。

本研究通過改變外部環(huán)境因子對獼猴桃葡萄座腔菌和間座殼菌的生長特性進行分析，發(fā)現(xiàn)在pH值5～11范圍內(nèi)病原菌能正常繁衍，同時在中性偏酸的條件下生長最好，這與其寄主獼猴桃果實存在的環(huán)境條件基本吻合。菌株對于惡劣溫度和pH值環(huán)境的適應性較強，存活能力高，在80℃水浴處理30 min或者在pH值4或13的環(huán)境下依然能生長。說明病原菌對外界環(huán)境具有較強的抗性，這與病原菌自身的因素有關，通過改變環(huán)境因素殺滅真菌有一定難度，今后研究可開發(fā)相關植物源殺菌劑，對此類病原菌進行殺菌試驗。本研究結(jié)果表明，在溫度25～30℃的環(huán)境下，菌絲生長旺盛，菌絲密集度較高，且其生長發(fā)育的最適溫度和果實采收時期的氣溫相近，與同屬內(nèi)其他菌種大致相似[21,24]。在采果期間應盡量選擇清晨或傍晚溫度較低時，一方面減少果實呼吸代謝，一方面鈍化病原菌的生長，延長保鮮時間。病菌更喜營養(yǎng)成分均衡且多含有葡萄糖、蔗糖、麥芽糖的培養(yǎng)基，如PSA、YPGA、PDA、SDA。對于氮源來說，兩種菌種均偏愛酵母粉、蛋白胨、甘氨酸等，兩種菌均能利用多種營養(yǎng)，今后對這兩種菌進行擴繁時，可參考此理論依據(jù)。此外，未來研究可進一步補充惰性氣體、紫外光照、輻射等物理手段對病原菌生長特性的影響[25-26]，以期得到防控軟腐病原菌的良好措施。

在研究獼猴桃軟腐病原菌生物學特性的基礎上，需進一步鑒定出屬內(nèi)種間的差異性，從而精準鑒別出每種植物病害的病原菌，分析和完善地域間種群的親緣關系[27]；深入探究致病機理，了解和把握每個環(huán)節(jié)的致病過程，形成一套系統(tǒng)而全面的認識體系，構建抗病分子育種技術體系，從根本上防控病害的發(fā)生[28]。

4 結(jié)論

本研究鑒定出造成獼猴桃果實采后軟腐的主要病害菌為葡萄座腔菌(Botryosphaeriadothidea)和間座殼菌(Diaporthephaseolorum)，這兩種病原菌在PSA、YPGA、PDA、SDA上生長速度較快，菌絲較稠密。同時，兩種病原菌對葡萄糖、淀粉、蔗糖和麥芽糖等碳源利用效果好，對酵母粉、蛋白胨、甘氨酸等氮源利用效果好；最適pH值為5～7，最適溫度為25～30℃，致死溫度為85℃。獼猴桃采后保存時，減少獼猴桃儲運、貯藏過程的中的機械損傷可減輕和延緩果實軟腐，適當?shù)膲A性環(huán)境及0.5～4℃的低溫貯藏，有助于抑制病原菌，從而延長果實的貯藏期。本研究結(jié)果為進一步闡明獼猴桃果實軟腐病害主要病原菌的種類及對獼猴桃貯藏過程中病害的綠色防控供了一定理論依據(jù)。