利用精密儀器快速檢測(cè)降糖類(lèi)保健食品中非法添加化學(xué)品的相關(guān)技術(shù)現(xiàn)狀研究

糖尿病是常見(jiàn)慢性病之一，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)還無(wú)法治愈糖尿病，因此糖尿病患者不得不終身服藥，各種形式的降糖保健品應(yīng)運(yùn)而生。我國(guó)《食品安全法》明確規(guī)定，保健食品不得添加化學(xué)藥品，但仍有不少具有降血糖功效的保健食品被檢出含有非法添加的化學(xué)成分。這種非法添加的行為，對(duì)公眾健康造成了巨大危害。本文對(duì)近年來(lái)降糖類(lèi)中成藥和保健食品中非法添加化學(xué)藥物的儀器檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行研究對(duì)比，以其為相關(guān)檢測(cè)部門(mén)提供理論參考，消費(fèi)者身體健康及合法權(quán)益受到保護(hù)。

保健食品

《保健食品管理辦法》中對(duì)保健食品的定義是“保健食品系指表明具有特定保健功能的食品。即適宜于特定人群食用，具有調(diào)節(jié)機(jī)體功能，不以治療疾病為目的食品”。

降糖類(lèi)保健食品中的非法添加化學(xué)藥品

不法商家為謀取不正當(dāng)利益，違反國(guó)家法律法規(guī)，未經(jīng)國(guó)家有關(guān)部門(mén)的批準(zhǔn)或允許，在健康產(chǎn)品中人為添加具有一定功能的化學(xué)成分，以達(dá)到增強(qiáng)產(chǎn)品特定功效的目的即視為非法添加。治療糖尿病的保健食品多數(shù)顯效緩慢，而添加有降糖功效的違禁化學(xué)藥品后，療效迅速，但若長(zhǎng)期服用會(huì)引起較嚴(yán)重的副作用。在降糖類(lèi)保健品中常見(jiàn)的非法添加化學(xué)藥品有鹽酸二甲雙胍、鹽酸苯乙雙胍、鹽酸丁二胍、鹽酸比格列酮、甲苯磺丁脲、格列本脲和格列齊特等。這些化學(xué)藥物是用于醫(yī)治糖尿病的常用藥，降糖效果明顯，但長(zhǎng)期大量服用，會(huì)造成低血糖和腎功能損害，甚至導(dǎo)致死亡。

降糖類(lèi)保健食品中非法添加的常用儀器檢測(cè)技術(shù)

髙效液相色譜法（LC）。劉暢等人采用HPLC技術(shù)，建立了降糖保健品中違禁添加的格列美脲、格列吡嗪、格列本脲、鹽酸吡格列酮、瑞格列奈、格列齊特、格列喹酮、鹽酸二甲雙胍及鹽酸苯乙雙胍等9種降糖化學(xué)藥物的檢測(cè)方法，采用TIANHE Kromasil C18柱 (250 mm×4.6 mm，5μm)，甲醇 -0.1% 磷酸二氫鈉溶液(用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0±0.05)(70∶30)為流動(dòng)相檢測(cè)分析格列類(lèi)及其他類(lèi)藥物，甲醇-離子對(duì)試液為流動(dòng)相檢測(cè)分析雙胍類(lèi)藥物。分離度、線性相關(guān)性好 ，檢出限為0.40～0.86μg/ml，定量限為1.2～2.6μg/ml，平均回收率為98.8%～104.3%。

歐貝麗等人建立HPLC-DAD法快速篩查檢測(cè)中成藥及保健品中違法添加的鹽酸二甲雙胍、鹽酸丁二胍和鹽酸苯乙雙胍等3種化學(xué)降糖藥物，采用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器光譜法，以Zorbax Extend-C18(250 mm×4.6 mm，5μm)為 色 譜 柱，甲醇-0.1%乙酸溶液(含10 mmol·L-1辛烷磺酸鈉)(60∶40)為流動(dòng)相，通過(guò)保留時(shí)間、DAD紫外吸收光譜以及質(zhì)譜的分子離子峰和二級(jí)碎片信息，對(duì)降糖類(lèi)中成藥及保健品中非法添加的3種雙胍類(lèi)降糖藥物成分進(jìn)行鑒定，通過(guò)測(cè)定235 nm處紫外吸收的峰面積代入線性方程，準(zhǔn)確計(jì)算出添加物的含量。

液質(zhì)聯(lián)用法（LC-MS）。錢(qián)葉飛等人建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)檢測(cè)中成藥及保健品中非法添加的降糖及降脂類(lèi)化學(xué)成分的方法，采 用 Waters Acquity BEH-C18（2.1 mm×100 mm，1.7μm）色譜柱分離，以0.1%甲酸水溶液和乙腈作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，以三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜為檢測(cè)器，電噴霧離子源正、負(fù)離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)14種降糖降脂類(lèi)藥物，以保留時(shí)間、碎片離子比對(duì)和峰面積進(jìn)行定性定量分析，14種降糖、降脂類(lèi)藥物在0.1～500 ng.ml-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.996，檢出限為0.0002～3.940 6ng.ml-1，回收率80%～120%。

朱峰等人建立了一種利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用同時(shí)快速篩查、檢測(cè)降糖類(lèi)和減肥類(lèi)保健品中20種非法添加化學(xué)成分的方法，采用Poroshell 120 EC-C18柱 (100 mm×2.1 mm，2.7μm)分 離 ，以5 mmol/L乙酸銨和乙腈為流動(dòng)相梯度洗脫，采用電噴霧離子源正、負(fù)離子模式切換，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式檢測(cè)。20種非法添加化合物的峰面積與質(zhì)量濃度均呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.99，回收率均在75.9%～114.0%范圍內(nèi)，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均低于11.3%，檢出限均在0.3～1.5μg/L范圍內(nèi)。

拉曼光譜法（SERS）。秦劍紅利用薄層色譜法將待檢成分與中藥基質(zhì)進(jìn)行簡(jiǎn)單分離，采用表面增強(qiáng)拉曼光譜技術(shù)對(duì)薄層板上的微量物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。通過(guò)摸索模擬陽(yáng)性樣品中格列類(lèi)藥品的SERS檢測(cè)條件，建立了可用于降糖中成藥中非法添加物的表面增強(qiáng)拉曼光譜檢測(cè)方法。結(jié)果采用有機(jī)溶劑DMF制備所得的銀溶膠可以獲得較好的格列類(lèi)藥物SERS圖譜。

曹玲等人建立檢測(cè)中藥中非法添加化學(xué)降糖藥的拉曼光譜法，采用顯微共聚焦拉曼光譜法，使樣品在顯微鏡下微區(qū)成像，逐點(diǎn)選擇不同的點(diǎn)采集拉曼光譜圖，并與對(duì)照品光譜圖進(jìn)行比對(duì)分析，判斷是否非法添加。結(jié)果在市場(chǎng)監(jiān)督抽樣的中藥中檢出非法添加鹽酸二甲雙胍，檢出結(jié)果進(jìn)一步得到HPLC-MS法驗(yàn)證。

紅外光譜法（IR）。張宏蓮等人建立了降糖中藥及保健品中非法添加2種雙胍類(lèi)藥物的快速檢測(cè)TLC-IR法，采用硅膠GF254薄層板，乙酸乙酯－甲醇－冰醋酸( 5：6：0.5)為展開(kāi)劑，展開(kāi)制備薄層斑點(diǎn)，測(cè)其紅外光譜。方法簡(jiǎn)便易行、專(zhuān)屬性較強(qiáng)，可用于降糖中藥及保健品中摻入的化學(xué)降糖藥物快速檢測(cè)。

張昊天等利用近紅外光譜法同時(shí)快速檢測(cè)中成藥和保健品中的鹽酸二甲雙胍、格列齊特、格列美脲和格列本脲等4種降糖類(lèi)藥物。采集39批次的藥物制劑及多種陰性對(duì)照的光譜，以平均光譜為模型數(shù)據(jù)，建立聚類(lèi)分析模型，利用聚類(lèi)分析模型對(duì)疑似樣本進(jìn)行分析，同時(shí)比較疑似樣本的高效液相色譜結(jié)果。對(duì)8批疑似樣本分別進(jìn)行近紅外聚類(lèi)分析與高效液相色譜法檢測(cè)，聚類(lèi)分析模型檢測(cè)結(jié)果與高效液相色譜法的檢測(cè)結(jié)果一致，重復(fù)性良好。

檢測(cè)方法比較

LC法是檢測(cè)降糖保健食品中非法添加化學(xué)藥物使用最為廣泛的技術(shù)，該方法分離性能好，分析速度快，靈敏度高，適用范圍廣，通過(guò)比較樣品色譜峰與對(duì)照品色譜峰的保留時(shí)間及紫外光譜圖，基本可以準(zhǔn)確判斷樣品是否含有與對(duì)照品一致的化學(xué)成分。但該方法對(duì)有些異構(gòu)體化合物的鑒別存在困難。

LC-MS法把液相的對(duì)物質(zhì)的良好的分離能力和質(zhì)譜對(duì)物質(zhì)的高靈敏高分辨的特性融合于一體，檢測(cè)時(shí)可以同時(shí)得到化合物的保留時(shí)間、分子量、離子碎片等信息，分析需要的樣品量少、分析速度快、結(jié)果可靠，是目前檢測(cè)非法添加的主要確證方法。但由于儀器價(jià)格昂貴，操作相對(duì)復(fù)雜，全面推廣有一定難度。

IR法及SERS法操作簡(jiǎn)便，分析速度快，無(wú)需化學(xué)試劑，易于現(xiàn)場(chǎng)分析，屬于快速無(wú)損檢測(cè)的綠色分析方法，在保健食品分析中應(yīng)用廣泛。但這兩類(lèi)光譜技術(shù)專(zhuān)屬性差，主要用于特定成分的定性分析。SERS法還易受到熒光干擾而影響檢測(cè)靈敏度。