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    真菌毒素檢測中的誤差來源和控制

    2020-12-03 07:26:29彭冬烏海市檢驗(yàn)檢測中心
    食品安全導(dǎo)刊 2020年19期
    關(guān)鍵詞:制樣粒度毒素

    □ 彭冬 烏海市檢驗(yàn)檢測中心

    真菌毒素廣泛存在于自然界,常見的真菌毒素包括黃曲霉毒素、脫氧學(xué)府鐮刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素、伏馬毒素等,其對人體健康的主要危害包括致癌、致畸等。通常而言,真菌毒素在食品中的含量較低,通常只有ppm或ppb級(jí)別(ppm級(jí)別相當(dāng)于32公斤糧食中的一顆),且真菌毒素分布不均—分布位置比較集中、單一,高污染區(qū)域和低污染區(qū)域的濃度相差數(shù)千倍。因此,如何取樣是檢測真菌毒素的關(guān)鍵,要做到取樣位置恰當(dāng)、取樣量合適。

    1 取樣

    一般而言,取樣原則包括數(shù)量保證、隨機(jī)抽取、機(jī)會(huì)均等、沒有傾向性等方面。同時(shí),較為理想的采樣量一般需要大于1kg,總樣品數(shù)量達(dá)到4kg,縮分樣品量達(dá)到2kg,實(shí)驗(yàn)室樣品量達(dá)到500g。此外,抽取點(diǎn)位要均勻分布,位置合理,隨機(jī)但不能隨意,即科學(xué)布點(diǎn)、選取中央位置,還應(yīng)在易發(fā)生霉變的位置適當(dāng)增加點(diǎn)位。

    2 制樣

    制樣順序是先磨后分,還是先分后磨?真菌毒素的分布位置較為集中,可能一批糧食中的某一個(gè)點(diǎn)位才會(huì)存在真菌毒素,如果采取先分后磨的原則,很可能會(huì)將受污染的點(diǎn)位劃分出去,從而造成檢測結(jié)果出現(xiàn)“未檢出”的尷尬局面。例如,10顆玉米中1顆含有真菌毒素,那么檢出的可能性只有10%,而未檢出的可能性有90%。所以,實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取先研磨后分樣的方法,進(jìn)而保證制樣的均一性,讓樣品更加均一,檢出值更加可靠。

    粒度大小為多少才最合適?粒度太大易導(dǎo)致混合不均勻,存在取樣誤差,提取難度大,導(dǎo)致檢測結(jié)果誤差較大;粒度太小又會(huì)增大雜質(zhì)的提取度。經(jīng)過反復(fù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),20目是檢測真菌毒素的最優(yōu)粒度大小,可使樣品混合更為均勻,提取也更充分,檢測誤差最小。

    科學(xué)分樣是獲得準(zhǔn)確結(jié)果的前提條件之一。本實(shí)驗(yàn)采用四分法分樣,即將樣品混勻后平均分成4份,然后將對角2份混勻后再分成4份……一直執(zhí)行此操作直至完全混勻;或采取分樣器進(jìn)行分樣,然后將樣品混合均勻即可。

    3 真菌毒素檢測方法的選擇

    真菌毒素的檢測有以下3種方法:色譜方法、ELISA及試紙條,其各自的優(yōu)缺點(diǎn)見表1。

    當(dāng)前,實(shí)驗(yàn)室常用的檢測方法為液相色譜法,也可根據(jù)各自需求選用適合自身的方法。例如,現(xiàn)場檢測通常只需判斷樣品有無定性測定,可選用試紙條,方便快捷的同時(shí)降低成本;企業(yè)自檢往往批次多、數(shù)量大,時(shí)間緊,但只需一個(gè)大致范圍—在合格區(qū)間內(nèi)即可,故可選用ELISA進(jìn)行多通量同時(shí)檢測,該方法成本較低、檢測快捷且對人員要求不高。如果需要對樣品精確定量并出具具有法律效力的報(bào)告,則要選用儀器法,常用儀器有高效液相色譜儀和高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用儀,其檢測精度高、檢測限較低,相對而言檢測結(jié)果更為精準(zhǔn)。

    儀器法檢測的簡單檢測過程為:碾磨分樣、萃取、凈化、上機(jī)分析,其中,風(fēng)險(xiǎn)控制點(diǎn)包括如下幾項(xiàng)。①免疫親和柱必須在5~6℃儲(chǔ)存,不得在室溫下放置,也不得冷凍保存,使用前應(yīng)恢復(fù)至室溫。②樣品過柱流速十分關(guān)鍵,因?yàn)榭贵w與毒素反應(yīng)需要時(shí)間,過快過柱會(huì)影響回收率,故自然狀態(tài)過柱是最優(yōu)方法;淋洗可加快過柱速度,洗脫時(shí)需穩(wěn)定流速把真菌毒素全部洗脫下來。③凈化完試樣采用氮吹吹干,用流動(dòng)相復(fù)溶,取樣體積必須精確為1mL,因?yàn)樵擉w積要參與最終的結(jié)果計(jì)算。

    4 真菌毒素檢測的質(zhì)量控制

    質(zhì)量控制一般分為兩部分,即內(nèi)部質(zhì)量控制和外部質(zhì)量控制。內(nèi)部質(zhì)量控制的簡單方法就是隨樣品做空白試樣和質(zhì)控樣進(jìn)行質(zhì)量控制,但質(zhì)控樣的價(jià)格相對昂貴,故可采取有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行高、中、低3個(gè)濃度的加標(biāo)回收以進(jìn)行內(nèi)部評估。外部質(zhì)量控制的常用方法就是參加能力驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間比對,通常選用前者,方便快捷,評估更加準(zhǔn)確。

    5 結(jié)語

    只有合理的取樣、正確的制樣、選對合適的方法、做好質(zhì)量控制,才能更好地檢測真菌毒素,從而減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高檢測的可靠性。

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