染色砂糖橘前處理方法討論

□ 陸 武 陳思敏 張 艷 克拉瑪依市食品藥品檢驗(yàn)所

最近市面上發(fā)現(xiàn)了有商家對(duì)砂糖橘進(jìn)行染色的情況，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有相關(guān)產(chǎn)品的檢驗(yàn)方法，為了檢測(cè)出染色成分是否為合成著色劑，最終通過(guò)討論確定了3種樣品前處理方法，分別對(duì)染色橘子的皮和肉進(jìn)行檢驗(yàn)，最終再選擇出最優(yōu)的檢驗(yàn)方法。采用皮和肉分開處理的方法確認(rèn)染色橘子果皮和果肉是否都有合成著色劑。

1 實(shí)驗(yàn)樣品

市面上市民發(fā)現(xiàn)的有染色情況的砂糖橘。

2 實(shí)驗(yàn)原理

食品中人工合成著色劑用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)色譜分離，根據(jù)保留時(shí)間定性和與峰面積比較進(jìn)行定量。

3 實(shí)驗(yàn)試劑

甲醇（色譜級(jí)）、乙腈（色譜級(jí)）、正己烷、鹽酸、冰醋酸、甲酸、乙酸銨、檸檬酸、無(wú)水硫酸鈉、正丁醇、無(wú)水乙醇、氨水、聚酰胺粉、乙酸乙酯、環(huán)己烷、合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)等。

4 儀器和設(shè)備

高效液相色譜儀（帶二極管陣列或紫外檢測(cè)器）、天平、水浴鍋、G3垂融漏斗、凝膠色譜儀、組織搗碎機(jī)、離心機(jī)、漩渦混合器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氮吹儀等。

5 樣品前處理方法

5.1 參 考GB 5009.35-2016標(biāo) 準(zhǔn)方法

參考GB 5009.35-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測(cè)定。

1.試樣制備。稱取5～10 g（精確至0.001 g）經(jīng)粉碎混勻的樣品，放入100 mL小燒杯中，用水反復(fù)洗滌色素，到砂糖橘無(wú)色素為止，合并色素漂洗液為樣品溶液。

2.色素提取。聚酰胺吸附法：向樣品溶液中加檸檬酸溶液，調(diào)pH到6，加熱至60 ℃，將1 g聚酰胺粉加少許水調(diào)成粥狀，倒入樣品溶液中，攪拌片刻，以G3垂融漏斗抽濾，用60 ℃pH為4的水洗滌3～5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗滌3～5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3～5次，直至色素完全解吸，收集解吸液，加乙酸中和，蒸發(fā)至近干，加水溶解，定容至5 mL。經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)高效液相色譜儀分析。

3.測(cè)定。將樣品提取液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入高效液相色譜儀，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。

5.2 參考GB5009.35-2016標(biāo)準(zhǔn)方法

參考GB5009.35-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測(cè)定。

1.試樣制備。稱取5～10 g（精確至0.001 g）經(jīng)粉碎混勻的樣品，放入離心管中。

2.色素提取。加無(wú)水乙醇-氨水-水溶液（7+2+1，體積比）至25 mL，將離心管放到水浴中10～15 min，離心10 min（此步驟重復(fù)3-5次），提取上清液，樣品溶液加檸檬酸溶液調(diào)pH到6，加熱至60 ℃，將1 g聚酰胺粉加少許水調(diào)成粥狀，倒入樣品溶液中，攪拌片刻，以G3垂融漏斗抽濾，用60 ℃pH為4的水洗滌3～5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗滌3～5次，再用水洗至中性，用乙醇-氨水-水混合溶液解吸3～5次，直至色素完全解吸，收集解吸液，加乙酸中和，蒸發(fā)至近干，加水溶解，定容至5 mL。經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)高效液相色譜儀分析。

3.測(cè)定。將樣品提取液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入高效液相色譜儀，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。

5.3 參考SN/T 3638-2013 出口食品中脂溶性著色劑的測(cè)定

1.試樣制備：稱取5～10 g（精確至0.001 g）經(jīng)粉碎混勻的樣品于50 mL離心管中，準(zhǔn)確加入20 mL乙酸乙酯，均質(zhì)2 min， 以4 000 r/min的速度離心8 min，將上清液過(guò)濾到雞心瓶中。再用20 mL乙酸乙酯重復(fù)提取一次，過(guò)濾后用5 mL乙酸乙酯沖洗濾紙，用同一雞心瓶收集濾液，將濾液在40 ℃下蒸發(fā)至近干，用乙酸乙酯-環(huán)己烷定容至10 mL的玻璃管中，待凈化。

2.色素提取凈化。將10 mL溶液按條件凈化，凈化后樣液經(jīng)0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，進(jìn)高效液相色譜儀分析。

3.測(cè)定。將樣品提取液和合成著色劑標(biāo)準(zhǔn)使用液分別注入高效液相色譜儀，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。

6 儀器條件

色譜柱：C18柱。柱溫：35 ℃。進(jìn)樣量：10 μL。

二極管陣列檢測(cè)范圍400～800 nm，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)：254 nm。

7 結(jié)果分析

分別利用3種前處理方法對(duì)染色砂糖橘的果皮和果肉進(jìn)行前處理，然后利用高效液相色譜儀對(duì)合成著色劑進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)實(shí)驗(yàn)比較，3種方法都可以很好的檢測(cè)出樣品中的合成著色劑。但第一種前處理方法相對(duì)于其他兩種操作簡(jiǎn)單，而且可以大大的節(jié)約前處理時(shí)間，所以最終選用第一種前處理方法作為本實(shí)驗(yàn)的最終方法。通過(guò)本次實(shí)驗(yàn)得出，染色砂糖橘的表皮確實(shí)含有合成著色劑，但是果肉中并沒(méi)有檢測(cè)出合成著色劑，最終給市民一個(gè)滿意的答復(fù)。