李章嫻
(江門市皮膚醫(yī)院 廣東 江門 529000)
超高效液相色譜法作為化學(xué)成分分離技術(shù)之一,可以在多個(gè)檢測(cè)領(lǐng)域中應(yīng)用,不僅可以應(yīng)用于食品檢測(cè),還可以在藥物檢測(cè)中應(yīng)用,其原理與高效液相色譜法一致,可以快速檢測(cè)小顆粒物質(zhì),不僅適用范圍廣泛,分離速度迅速,而且具備高度自動(dòng)化優(yōu)勢(shì)[1]。在藥物分析方面,超高效液相色譜法的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)更為明顯,可以對(duì)藥物復(fù)雜組分予以準(zhǔn)確、快速分析,具備顯著推廣價(jià)值[2]。報(bào)告如下所見(jiàn)。
于2017年3月—2019年3月?lián)袢?0片利福平作為研究對(duì)象,將其隨機(jī)分成兩組,每組20 片,均選用華潤(rùn)賽科藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)的利福平,批準(zhǔn)文號(hào)為H11020094。
對(duì)照組通過(guò)高效液相色譜法進(jìn)行檢驗(yàn)分析,研究組通過(guò)超高效液相色譜法進(jìn)行檢驗(yàn)分析。首先將藥片研磨成粉,并置于量瓶(50ml)內(nèi),通過(guò)甲醇定容,對(duì)其予以流動(dòng)溶解處理,流動(dòng)相選用乙腈- 0.075mol/L 磷酸二氫鉀溶液(5:5),之后進(jìn)行稀釋,再通過(guò)0.22μm 濾膜進(jìn)行過(guò)濾,形成0.1mg/ml 待測(cè)溶液,之后置于紫外線中予以掃描,紫外線范圍為200~400nm,末端吸收210nm,對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定,并吸取稀釋液20uL,分別注入液相色譜儀、超高效液相色譜儀內(nèi),對(duì)色譜圖進(jìn)行仔細(xì)觀察和記錄。
對(duì)照分析兩組藥片分析時(shí)間以及藥片徹底分離率。
研究所得數(shù)據(jù)均經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件(SPSS17.0)分析,涉及到計(jì)量、計(jì)數(shù)兩種資料,分別以(±s)、(%)兩種不同方式予以表達(dá),另外經(jīng)t 值、χ2兩種不同方式予以檢驗(yàn),如果檢驗(yàn)所得結(jié)果P <0.05,則表示有意義。
研究組藥片分析時(shí)間為(2.34±0.21)min,對(duì)照組為(15.31±2.46)min,研究組比對(duì)照組短,P <0.05;研究組20 片利福平均徹底分離,徹底分離率為100%,對(duì)照組16 片利福平徹底分離,徹底分離率為80.0%,研究組高于對(duì)照組,P <0.05。
本文研究結(jié)果顯示,研究組藥片分析時(shí)間比對(duì)照組短,藥片徹底分離率高于對(duì)照組,可見(jiàn)超高效液相色譜法的效果更佳。超高效液相色譜法從凡德米特方程借鑒經(jīng)驗(yàn),在超高效液相色譜法檢測(cè)過(guò)程中,色譜柱清晰度會(huì)隨著微粒粒徑變化而發(fā)生變化,即粒徑越小越清晰。同時(shí)粒徑不同,色譜柱流速也存在差異,粒徑越小最高柱效點(diǎn)則會(huì)移動(dòng)至更高流速方向。另外微粒越小不僅會(huì)擴(kuò)大寬度范圍,而且還會(huì)擴(kuò)大線速度范圍,因此若要將色譜柱清晰度提高,則可使微粒粒徑縮小,使色譜柱流速提高。若色譜柱內(nèi)微粒微粒縮小,則會(huì)提高色譜分離度。據(jù)相關(guān)研究指出,在填料中,對(duì)于微粒粒徑為2um 時(shí),不僅可以得到最高效果的色譜柱,還可以得到最廣泛的流量范圍,可以使分離度得到最高值,同時(shí)也會(huì)明顯提高微粒的流速[3]。
超高效液相色譜法優(yōu)勢(shì)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①分離度更高。超高效液相色譜法檢測(cè)使用1.7um 超小顆粒技術(shù)。相比于高效液相色譜法所使用的5um 顆粒,其柱效高度可以提高接近3 倍,其分離度最多可以比高效液相色譜高約70%。②分析速度提高。超高效液相色譜法顆粒更小,所得到的柱效則更高,在柱長(zhǎng)較短的情況可以得到相同的柱效,進(jìn)而縮短分離時(shí)間,但不會(huì)改變分離度[4]。③檢測(cè)靈敏度提高。超高效液相色譜法使用顆粒更小,在同等條件下,其色譜峰更窄,這可以增大信噪比,因此可以有效提高其檢測(cè)靈敏度。④基質(zhì)效應(yīng)減少。在超高效液相色譜法檢測(cè)中,通過(guò)最佳線速可以使質(zhì)譜承擔(dān)對(duì)應(yīng)流速,進(jìn)而提高離子化反應(yīng)效率,另外因提高了分離度,減小了色譜峰擴(kuò)展,提高了峰濃度,加速了復(fù)合物內(nèi)成分分離,促進(jìn)了雜質(zhì)分離,使基質(zhì)效應(yīng)減小,可以使檢驗(yàn)重現(xiàn)性提高。從總體上來(lái)看,相比于高效液相色譜法,超高效液相色譜法的應(yīng)用不僅提高了檢測(cè)速度,還提高了檢測(cè)精確度[5]。
綜上,在西藥分析中應(yīng)用超高效液相色譜法的效果確切,不僅可以縮短藥片分析時(shí)間,還可以提高藥片徹底分離率,臨床價(jià)值顯著。【參考文獻(xiàn)】
[1] 張愛(ài)芳. 藥物檢驗(yàn)分析中應(yīng)用超高效液相色譜法的研究[J]. 中國(guó)醫(yī)藥指南,2019,17(21):43-45.
[2]李彤.高效液相色譜和超高效液相色譜儀器的一些最新發(fā)展[J].色譜, 2015,33(10):1017-1018.
[3] 王婉婷, 孫立麗, 金立弟. 超高效液相色譜法在藥物檢驗(yàn)中的運(yùn)用[J]. 國(guó)際感染雜志(電子版),2019,08(01):169-170.
[4] 陳丹龍. 超高效液相色譜法在藥物檢驗(yàn)中的應(yīng)用分析[J]. 科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào),2018,15(13):119,121.
[5] 李麗. 藥物檢驗(yàn)中超高效液相色譜法的應(yīng)用策略[J]. 黑龍江科學(xué),2018,09(18):21-23.