廣東地區(qū)新型冠狀病毒實驗室檢測專家共識(全文)

廣東省科學技術廳新冠肺炎防控指揮辦科研攻關組實驗室檢測協(xié)作組

自新型冠狀病毒疫情暴發(fā)以來,截至2020年5月6日8時,全球214個國家和地區(qū)出現(xiàn)新型冠狀病毒感染病例報道,對全球公共衛(wèi)生構(gòu)成巨大威脅。面對疫情的挑戰(zhàn),中國迅速建立了一系列預防控制和醫(yī)療救治措施,使國內(nèi)疫情得到緩解?？焖倬珳实膶嶒炇覚z測在新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)病因診斷中起著至關重要的作用。為提高對COVID-19 實驗室檢測方法的認識并總結(jié)相關經(jīng)驗,廣東省科學技術廳迅速組織廣東省內(nèi)病毒學、臨床檢驗、臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學等專業(yè)領域的病毒專家、檢驗專家及臨床醫(yī)師,總結(jié)國內(nèi)外新型冠狀病毒實驗室檢測技術研究現(xiàn)狀,結(jié)合廣東省一線防治及檢測經(jīng)驗,制定適用于實驗室檢測人員的新型冠狀病毒檢測共識。本共識涵蓋新型冠狀病毒病原學、核酸檢測、血清學篩查、生物安全防控等方面,并針對檢測實際工作中遇到的問題提出建議,以期提高實驗室對新型冠狀病毒的檢測水平,助于控制疫情發(fā)展。

1 病原學

新型冠狀病毒屬于β 冠狀病毒亞科Sar becovirus亞屬,為單股、正義鏈RNA 病毒,常為多形性包膜病毒,顆粒呈圓形或橢圓形,直徑60～140 n m。新型冠狀病毒基因組編碼4種主要的結(jié)構(gòu)蛋白,包括刺突蛋白(S)、衣殼蛋白 (N)、膜蛋白 (M)和包膜蛋白 (E)。其基因序列與SARS病毒基因序列相似,可能均起源于蝙蝠。兩者S蛋白在一級氨基酸序列上的同源性為87.2%,最小受體結(jié)合域的相似性為83.9%,但在基因特征上有明顯區(qū)別[1]。新型冠狀病毒S蛋白介導受體結(jié)合和膜融合,由S蛋白上的S1 B 結(jié)構(gòu)域識別宿主細胞表面的血管緊張素酶2受體從而進入細胞。病毒和宿主細胞膜融合后,病毒RNA 在宿主細胞胞漿內(nèi)進行復制和轉(zhuǎn)錄。病毒結(jié)構(gòu)蛋白及新合成的RNA 基因組在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及高爾基體進行組裝修飾,隨后新的子代病毒粒子出芽至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)/高爾基體中間管腔中,通過囊泡釋放[2]。新型冠狀病毒的S蛋白結(jié)合血管緊張素酶2的親和力比SARS病毒高約10～20倍,可能有助于新型冠狀病毒在人群中的傳播[3]。2020年2月11日,國際病毒分類學委員會的冠狀病毒研究小組建議把新型冠狀病毒命名為嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒2 (severe acute repiratory syndrome coronavirus 2,SARS-Co V-2),WHO 將新型冠狀病毒肺炎命名為COVID-19。

新型冠狀病毒對紫外線及熱敏感,通常56 ℃30 min可被滅活。該病毒為包膜病毒,對大部分影響膜的有機溶劑均敏感,包括乙醚、75%乙醇、含氯消毒劑、過氧乙酸和氯仿等脂溶劑,但氯已定不能有效滅活病毒[4]。新型冠狀病毒可在氣溶膠和物體表面保持穩(wěn)定性長達數(shù)小時或數(shù)天[5]。

2 實驗室診斷方法

依據(jù)明確的流行病學接觸史、全身癥狀和肺炎影像學改變等可作出COVID-19 臨床診斷,但實驗室檢測是明確其病原學診斷、發(fā)現(xiàn)和排查者的重要依據(jù)。常用方法包括病毒核酸檢測、血清學檢測及一般實驗室檢測等;標本包括鼻咽拭子、口咽拭子、痰、其他下呼吸道分泌物、血液、糞便、唾液等。由于疾病發(fā)展過程中病毒載量、血清學指標等會發(fā)生動態(tài)變化,如何在特定階段采取合適的實驗室檢測方法對臨床醫(yī)師進行COVID-19 確診至關重要(圖1、表1)。

圖1 在臨床標本中檢測新型冠狀病毒載量或在血液中檢測特定抗體[6]

表1 新型冠狀病毒肺炎發(fā)展過程中適用的檢測方法及標本

2.1 一般檢查 常規(guī)血液檢查白細胞計數(shù)通常正常或減少,淋巴細胞計數(shù)減少(嚴重者呈現(xiàn)進行性淋巴細胞減少),C-反應蛋白正?；蛏?降鈣素原在大多數(shù)情況下處于正常水平。在嚴重情況下可能會出現(xiàn)谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酸激酶、乳酸脫氫酶和肌紅蛋白升高以及D-二聚體水平升高。重型、危重型患者常有IL-6、IL-10 等炎癥因子升高[7]。

2.2 核酸檢測 新型冠狀病毒核酸檢測可以應用多種分子診斷技術,包括實時熒光PCR、基因測序、等溫擴增、POCT 分子診斷系統(tǒng)等 (表2),其中實時熒光PCR 和基因測序被列入國家衛(wèi)生健康委員會 COVID-19 診療規(guī)范[4], 是確診COVID-19的重要病原學證據(jù)。各實驗室應根據(jù)受檢對象群體、樣品量及具備的條件,選擇最適宜的檢測技術。目前,應用最廣的是實時熒光PCR,也是以下闡述的重點。

2.2.1 試劑選擇參考意見 (1)選擇包含 “內(nèi)標”的試劑?！皟?nèi)標”可檢測人細胞的序列 (如含有一個單鏈RNA 分子的RNase P),可以監(jiān)測標本中是否采集到足夠的人體細胞。(2)為提高檢測的敏感性,建議選擇含至少新型冠狀病毒基因的兩個位點(開放讀碼框1a/b、核衣殼蛋白N 或包膜蛋白E)[8],以及核酸模板加樣量及擴增反應體系較大的試劑。(3)由于檢測試劑對不同基因區(qū)域的擴增敏感性可能存在差異,多個靶標間也可能存在相互競爭作用,建議選用引物不同的試劑盒對可疑結(jié)果進行復核。

2.2.2 標本前處理 (1)口咽拭子和鼻咽拭子：可直接用于核酸提取,當實驗室安全防護條件不充分時可增加病毒滅活步驟[8],但增加病毒滅活步驟可能會降低核酸檢測的靈敏度[9]。(2)抗凝血液：1 500×g離心10 min,吸取血漿提取核酸。 (3)肺泡灌洗液和糞便：應充分振蕩混勻后進行病毒滅活。(4)痰液：痰液需液化后再提取核酸。痰液標本中如果預加了蛋白酶K,應先在55 ℃孵育15 min后再進行病毒滅活[10]。 (5)病毒滅活：采集標本時,使用含胍鹽的病毒滅活保存管可以立即滅活病毒;使用病毒保存液取材的樣本則可在恒溫箱或水浴箱56 ℃,30～45 min進行滅活[11]。

2.3 核酸提取和加樣 核酸提取分為手工提取和儀器自動提取兩種。手工提取過程繁多,有交叉污染的可能;機器自動提取效率高,對操作人員更安全,建議采用基于磁珠吸附的自動化核酸提取方法。核酸提取要避免出現(xiàn)核酸氣溶膠導致的“假陽性”,可通過噴灑核酸清除劑、75%乙醇噴灑擦拭(不適用于自動提取儀的磁棒)、紫外燈消毒等方法最大程度地減少該環(huán)節(jié)的污染。

2.4 核酸擴增 (1)安全防護：建議按三級防護要求進行防護,當條件不允許且各工作區(qū)分工作業(yè)時,擴增區(qū)工作人員可按二級防護佩戴防護用品。(2)核酸擴增：將擴增體系放入擴增儀,啟動擴增程序。(3)擴增產(chǎn)物處理：將擴增產(chǎn)物用一次性醫(yī)療垃圾袋裝好扎緊,轉(zhuǎn)移至擴增產(chǎn)物廢物處理區(qū)。

2.5 結(jié)果判斷 陰性：無Ct值或Ct值為40。陽性：Ct值<37,可報告為陽性?；覅^(qū)：37≤Ct值≤40,建議重復實驗。若重做結(jié)果Ct值<40,擴增曲線有明顯起峰,該樣本判斷為陽性,否則為陰性(如使用商品化試劑盒,則以廠家提供的說明書為準)。

建議報告方式為“陽性” “陰性”和 “可疑陽性”,應對3種報告方式進行充分的結(jié)果解釋,并對下一步工作提出建議。

2.6 實驗室確診標準 我國國家衛(wèi)生健康委員會在2020年3月頒布的 《新型冠狀病毒感染的肺炎實驗室檢測技術指南》中指出[12],實驗室確診陽性病例需滿足以下兩個條件中的一個：(1)同一份標本中新型冠狀病毒2個靶標 (ORF1ab、N)實時熒光PCR 檢測結(jié)果均為陽性。如果出現(xiàn)單個靶標陽性的檢測結(jié)果,則需要重新采樣,重新檢測。如果仍然為單靶標陽性,判定為陽性。(2)同一患者的2種類型標本實時熒光PCR 檢測結(jié)果同時出現(xiàn)單靶標陽性,或同種類型標本2次采樣檢測結(jié)果均出現(xiàn)單個靶標陽性,可判定為陽性。根據(jù)廣東省檢測工作積累的經(jīng)驗,對于陽性檢測結(jié)果的判讀可參考表3。

表2 各種常用新型冠狀病毒核酸檢測技術比較

當2個靶標無特異性擴增,可報告 “陰性”。陰性結(jié)果可能是病毒載量低于檢出限或標本中沒有病原體或其核酸存在,建議應結(jié)合臨床癥狀、影像學檢查及實驗室檢查進行綜合診斷,以防漏診誤診。當臨床體征及其他檢查提示高度懷疑新型冠狀病毒感染時,建議對整個檢測環(huán)節(jié) (如樣本的采集、流轉(zhuǎn)及處理等環(huán)節(jié))進行綜合分析,不排除新型冠狀病毒早期感染、復發(fā)感染或合并其他呼吸道病毒感染等。如條件允許,建議采集深咳痰液或肺泡灌洗液等敏感性更高的樣本進行復測。

2.7 質(zhì)量控制

2.7.1 規(guī)范的臨床核酸檢測實驗室 合理的實驗室分區(qū)、接受過培訓的檢測人員、合理的操作流程和嚴格的質(zhì)量管理體系。

2.7.2 標本采集的時機和部位 疑似感染患者在不同的疾病期、不同部位的標本,病毒濃度會有差異。采集多個部位的標本進行檢測,可以提高檢出率。病毒必須在細胞內(nèi)才能復制,因此,采集到含有病毒的細胞是避免“假陰性”的重要環(huán)節(jié)之一。

2.7.3 標本采集 標本采集人員應熟練掌握采集方法。采集拭子標本時,須采集到含有人體細胞的標本。含“內(nèi)標”的擴增試劑,可以監(jiān)控取材是否合格。

2.7.4 標本運輸 標本采集后,置于含病毒保存液或樣本保存液 (含病毒裂解液)的專用運送管中,在4～6 ℃狀態(tài)下保存并盡快運輸送檢,以降低運輸過程中病毒核酸RNA 的降解。

2.7.5 標本接收與處理 標本接收后應及時處理,特別是痰液。因為如果標本中加入了痰液消化液,操作時間延長將導致核酸的降解。

2.7.6 質(zhì)控品的使用 試劑盒中配有陽性質(zhì)控品/對照品。也可將陽性樣本的核酸分裝凍存,用作陽性對照以驗證試劑的有效性。實驗室條件允許的情況下,可將陽性標本滅活并經(jīng)考核以后作為陽性質(zhì)控品使用,陽性質(zhì)控品應選用弱陽性的標本。

2.7.7 設置充分的對照 對照包括試劑對照、陰性對照和陽性對照。建議新型冠狀病毒檢測每批次設立1個弱陽性質(zhì)控、3個陰性質(zhì)控。3個陰性質(zhì)控隨機放在臨床樣本中間。弱陽性質(zhì)控檢測結(jié)果為陽性,3份陰性質(zhì)控全部測定為陰性,視為在控;反之為失控。應仔細分析原因,必要時重新檢測。

2.7.8 試劑的檢測性能確認 用已知的陰性和陽性樣本核酸對每批次試劑進行質(zhì)檢,可以確保檢測試劑的質(zhì)量。試劑存在 “檢測下限”,樣品中病毒數(shù)量低于檢測下限時,試劑將無法檢出。

3 血清學檢查

3.1 標本類型及送檢要求 新型冠狀病毒特異性抗體檢測可采用全血 (包括末梢血)、血清或血漿標本。應注意已有研究表明血清56℃30 min滅活會影響新型冠狀病毒特異性抗體檢測結(jié)果,尤其對Ig M 抗體檢測結(jié)果影響更大[13]。新型冠狀病毒抗原在血液中的檢出率尚不明確,必要時可采用尿液、(鼻)咽拭子、痰液、糞便等其他標本進行檢測[14]。樣本采集包裝后使用專用運輸箱及運輸罐,盡快將樣本轉(zhuǎn)運至實驗室。配送調(diào)度相關部門組織專人登記、審核和配送,同時需要專箱專用。

表3 新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果判讀

3.2 檢測原理 新型冠狀病毒血清學檢測常見方法包括膠體金免疫層析、熒光免疫層析、酶聯(lián)免疫吸附測定以及化學發(fā)光法[15-16]。從方法學角度而言,熒光免疫層析、酶聯(lián)免疫吸附測定以及化學發(fā)光法檢測敏感度相對較高,可提供半定量或定量的檢測結(jié)果用于跟蹤抗體濃度動態(tài)變化,但需配備相應的檢測儀器。膠體金免疫層析法通過肉眼判斷結(jié)果即可,簡便快速但敏感度相對較低,僅能提供定性結(jié)果。各檢測方法的比較見表4。

3.3 結(jié)果解釋 新型冠狀病毒血清學檢測包括抗原和抗體檢測,其中特異性抗體Ig M、Ig G 檢測已納入 《新型冠狀病毒肺炎診療方案 (試行第八版)》實驗室檢查部分[4]。新型冠狀病毒特異性Ig M 抗體或Ig G 抗體陽性;血清特異性Ig G 抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性或恢復期較急性期有4倍及以上升高可作為疑似病例的確診條件之一。對于已確診的患者,可通過動態(tài)監(jiān)測新型冠狀病毒抗原與抗體的滴度變化評估療效和疾病轉(zhuǎn)歸。此外,新型冠狀病毒特異性抗體的檢測也可應用于人群感染的回顧性流行病學調(diào)查。值得注意的是,基于抗原抗體結(jié)合的免疫學檢測方法的局限性,標本中的類風濕因子、嗜異性抗體、溶血、纖維蛋白以及其他類型冠狀病毒的抗原交叉反應可導致檢測結(jié)果呈假陽性[17-18]。因此,血清學檢測結(jié)果不能作為新型冠狀病毒感染的獨立確診依據(jù),需結(jié)合患者臨床癥狀、暴露史、其它實驗室檢查結(jié)果及影像學檢查進行綜合判斷。特異性Ig M 抗體和Ig G 抗體檢測結(jié)果解讀見表5。

3.4 質(zhì)量控制 使用中國國家藥品監(jiān)督管理局批準的試劑盒進行質(zhì)量控制。實驗室開展檢測工作之前根據(jù)試劑說明的性能參數(shù) (如符合率、精密度、正確度等)進行相關性能驗證。當室間質(zhì)評機構(gòu)能提供相應質(zhì)控物時,應參加室間質(zhì)量評價,或與開展相同檢測方法的其它實驗室進行室間比對。

定性試驗：每批次檢測時,建議使用陰性和陽性質(zhì)控品進行質(zhì)控,推薦使用外部質(zhì)控,陽性結(jié)果至少包括檢測值接近臨界值的質(zhì)控品。陽性對照結(jié)果呈陽性,陰性對照結(jié)果呈陰性,則認為該批次有效。定量試驗：每天使用前或重新定標后,應使用檢測試劑盒配套質(zhì)控品或其他三方質(zhì)控品進行質(zhì)控,至少包含2個濃度水平。

表4 新型冠狀病毒血清學檢測常用檢測方法比較

表5 新型冠狀病毒特異Ig M 和Ig G 抗體檢測結(jié)果解讀

4 病毒分離與鑒定

4.1 病毒分離 可從人呼吸道樣本中分離出新型冠狀病毒,但無法在一般實驗室中開展,不推薦作為常規(guī)診斷過程[19]。在生物安全三級實驗室中,將口/鼻咽拭子、嗽口液、鼻咽抽取物或抽取氣管和支氣管分泌物、肺活檢材料、尸檢組織等標本進行相應的前處理。取200μl待檢標本接種于Vero-E6或人小型氣道上皮細胞培養(yǎng)管,于36 ℃培養(yǎng)箱吸附4 h,15 min輕搖一次。200μl PBS洗滌細胞1次,加1 ml維持液繼續(xù)培養(yǎng)。待大部分細胞從邊緣出現(xiàn)病變 (判斷標準見表6)及不規(guī)則形態(tài),細胞內(nèi)顆粒增多,細胞圓縮、脫落,而正常對照細胞形態(tài)良好,此時將培養(yǎng)細胞收集待鑒定。

表6 細胞病變結(jié)果判定

4.2 病毒鑒定 采用熒光定量PCR、RT-PCR、間接免疫熒光法或電鏡觀察鑒定。新型冠狀病毒感染Vero-E6細胞于36 ℃培養(yǎng)箱吸附1 h后繼續(xù)培養(yǎng)48 h,刮取具有明顯病變感染細胞,775×g,10 min 4 ℃離心,吸去上清,加入1.5 ml 2.5%戊二醛與4%多聚甲醛混合固定,4 ℃固定2 h。0.1 mol/L磷酸緩沖液漂洗3 次,1%鋨酸固定,梯度乙醇脫水,利用包埋模具、Epon812純樹脂包埋,常規(guī)超薄切片 (70 n m),醋酸鈾-檸檬酸鉛雙染色,透射電鏡觀察(圖2、圖3)。

5 生物安全及廢棄物處理

新型冠狀病毒已被納入《中華人民共和國傳染病防治法》規(guī)定的乙類傳染病,但按照甲類傳染病的預防、控制措施。對新型冠狀病毒的標本采集、檢測、包裝和運輸、廢棄物銷毀等過程進行如下生物安全防護。

5.1 標本采集的生物安全要求[12](1)標本采集人員應經(jīng)過生物安全培訓,且培訓合格。(2)采樣人員個人防護裝備要求生物安全三級個人防護。接觸了患者血液、體液、分泌物和排泄物,應及時更換外層乳膠手套。(3)必要時可加穿防水圍裙或防水隔離衣。標本采集后,運輸前盡可能對容器外壁做好消毒。 (4)標本的臨時保存：24 h內(nèi)檢測的標本可置于4 ℃保存。需長期保存的標本應在-70 ℃及以下保存,標本避免反復凍融。

圖2 從新型冠狀病毒咽拭子樣本中分離出病毒陽性的Vero-E6細胞的超薄切片電鏡圖片 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院楊子峰提供) A：細胞胞漿內(nèi)及細胞膜外、細胞突起之間可見大量的病毒顆粒,囊泡內(nèi)壁附著成熟的病毒粒子 (Bar=500 n m,×50 000);B：細胞胞漿內(nèi)外及細胞外突起之間都黏附著大量成熟的病毒粒子 (Bar=500 n m,×30 000)

圖3 新型冠狀病毒陽性患者的肺泡灌洗液經(jīng)離心超薄切片后的電鏡圖像 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院楊子峰提供),可見細胞中有明顯的板層小體,判斷為Ⅱ型肺泡上皮細胞。細胞中大量囊泡內(nèi)富集著大量病毒粒子 (Bar=200 n m,×50 000)

5.2 標本開展實驗活動的生物安全要求[20](1)標本檢測人員應經(jīng)過生物安全培訓,且培訓合格。(2)標本分裝：標本采集后在生物安全二級實驗室的生物安全柜內(nèi)分裝。未滅活標本的分裝人員需采取個人生物安全三級防護要求。(3)未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的操作：應當在生物安全二級實驗室進行,同時采用生物安全三級實驗室的個人防護。(4)病毒培養(yǎng)：應當在生物安全三級實驗室進行。病毒培養(yǎng)物加入裂解劑或滅活劑后可參照未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料的防護等級進行操作。(5)滅活材料的操作：感染性材料或活病毒在采用可靠的方法滅活后,應當在生物安全二級實驗室進行檢測。

5.3 標本運輸和包裝的生物安全要求[20]

5.3.1 國內(nèi)運輸包裝分類 新型冠狀病毒毒株或其它潛在感染性生物材料的運輸包裝分類屬于A類,對應的聯(lián)合國編號為UN2814,包裝符合國際民航組織文件Doc9284 《危險品航空安全運輸技術細則》的PI602分類包裝要求。該材料運輸應按照《可感染人類的高致病性病原微生物菌 (毒)種或樣本運輸管理規(guī)定》 (原衛(wèi)生部令第45號)辦理《準運證書》,如果在固定的申請單位和接收單位之間多次運輸相同品種高致病性病原微生物菌 (毒)種或樣本的,可以申請多次運輸。

5.3.2 國內(nèi)運輸要求 標本采集后,按照A 類感染性物質(zhì)的包裝 (圖4),即三層包裝：主容器(防水、密封、防泄漏,如裝標本的試管等)、輔助容器(防水、耐95 k Pa的壓力、無滲漏,如塑料罐等)和外包裝(在輔助容器外的保護層,具有足夠的強度,如運輸箱或一次性運輸包裝等)對標本進行包裝后,由經(jīng)過生物安全培訓并培訓合格的至少兩名專業(yè)人員乘坐配有生物危害物質(zhì)溢出緊急處理箱的專車運送。如需長途運輸?shù)?標本需置干冰中運輸。

圖4 A 類感染性物質(zhì)的包裝

5.3.3 國際運輸 在國際間運輸?shù)男滦凸跔畈《緲吮净蚨局陸?guī)范包裝,按照《出入境特殊物品衛(wèi)生檢疫管理規(guī)定》辦理相關手續(xù),并滿足相關國家和國際要求。

5.3.4 單位內(nèi)運輸 新型冠狀病毒的呼吸道和血液樣本采集后應盡快送往實驗室。為了避免意外泄漏或溢出,可將標本固定在試管架上,使裝有標本的容器保持直立,并用密封的專用盒、專用運輸箱及運輸罐等二級容器運輸標本。密封口最好有一個墊圈,要定期清除污染。二級容器可以是金屬或塑料制品,可耐高壓滅菌或耐受化學消毒劑的作用。采樣、運輸和接收部門組織需設專人登記、審核和運輸。

5.4 標本和毒株管理[12,20](1)新型冠狀病毒毒株及其樣本應由專人管理,設立專庫或?qū)９駟为毐４鏄吮尽?(2)準確記錄毒株和樣本的來源、種類、數(shù)量,編號登記,采取有效措施確保毒株和樣本的安全,嚴防發(fā)生誤用、惡意使用、被盜、被搶、丟失、泄露等事件。(3)無保存資質(zhì)的單位,完成檢測后應在一周內(nèi)將陽性標本送交有保存資質(zhì)的單位或按規(guī)定開展復核檢測的單位。如果無需上送,應在一周內(nèi)銷毀。 (4)新型冠狀病毒監(jiān)測期間,可設立有保存條件的各級疾控中心和有生物安全三級實驗室的單位為臨時保存單位。其他單位如因有科研項目或?qū)嶒炄蝿?需要臨時保存和使用新型冠狀病毒生物樣本,可向當?shù)胤止苌锇踩男姓块T提出申請。

5.5 廢棄物的處理[21](1)在生物安全柜中操作時,應在生物安全柜內(nèi)脫除懷疑被污染的手套并丟棄在生物安全柜內(nèi)的醫(yī)療垃圾袋中。(2)生物安全柜中裝醫(yī)療廢棄物的垃圾袋用密封袋轉(zhuǎn)移到黃色醫(yī)療垃圾袋前,須在密封袋封口處內(nèi)外噴75%乙醇或有效氯500～1 000 mg/L 的含氯消毒劑。黃色醫(yī)療垃圾袋在移出生物安全柜前,在封口處和垃圾袋外面噴75%乙醇或有效氯500～1 000 mg/L的含氯消毒劑。(3)操作中如產(chǎn)生迸濺或泄漏,必須通過消毒達到對病原微生物的殺滅。(4)實驗室操作過程中產(chǎn)生的所有廢棄物均須經(jīng)121 ℃30 min壓力蒸汽滅菌,同時設置高壓效果指示物,高壓滅菌后按普通廢棄物處理。

6 小結(jié)與展望

新型冠狀病毒在全球范圍持續(xù)蔓延。本共識聚焦新型冠狀病毒實驗室檢測的重大需求,立足國家最新頒布的COVID-19 診斷標準及國際最新研究進展,利用廣東省科學技術廳新冠肺炎防控指揮辦科研攻關組成員在臨床診療領域中的豐富經(jīng)驗交叉應用,相互印證,尤其是圍繞不同檢測手段結(jié)果不一致的問題,更突出本共識的實用性及前沿性,為不同層級新型冠狀病毒肺炎臨床科室?guī)砹嗽\斷結(jié)果的啟示。同時,伴隨新型冠狀病毒相關診斷產(chǎn)品及檢測手段不斷發(fā)展,實驗室檢測專家共識編寫組也將繼續(xù)致力于COVID-19新型診斷技術的應用,及時對本共識進行補充或修訂,以滿足各級檢驗人員對COVID-19 實驗室診斷檢測技術的需求,以便提高檢測能力及結(jié)果判斷水平,盡早發(fā)現(xiàn)傳染源,有效控制疫情蔓延。

編寫組成員

(按姓氏漢語拼音排序,排名不分先后)

陳 翊 (廣州市婦女兒童醫(yī)療中心)

杜秋伶 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

關文達 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

黃吉城 (廣州海關技術中心)

劉 勇 (廣州金域醫(yī)學檢驗中心)

任健康 (廣州金域醫(yī)學檢驗中心)

松陽洲 (中山大學)

武 婕 (廣東省疾病預防控制中心)

楊子峰 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

葉 楓 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

鄭 磊 (南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院)

鐘南山 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

朱 冰 (廣州市婦女兒童醫(yī)療中心)

咨詢小組成員

(按姓氏漢語拼音排序,排名不分先后)

陳敬賢 (廣州金域醫(yī)學檢驗中心)

陳 凌 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

狄 飚 (廣州市疾病預防控制中心)

蔣析文 (中山大學達安基因股份有限公司)

柯昌文 (廣東省疾病預防控制中心)

林勇平 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

孫寶清 (廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院)

余旻斐 (廣州賽哲生物科技股份有限公司)

曾 軍 (廣州市第一人民醫(yī)院)

張 鈺 (廣東省實驗動物監(jiān)測所)

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突