一例番鴨副黏病毒和鴨疫里默氏桿菌混合感染的診治

李新正 邢啟銀 韓占兵

番鴨又稱瘤頭鴨、麝香鴨、鴛鴦鴨，屬雁形目、鴨科、棲鴨屬鳥類，原產(chǎn)地在南美洲和中美洲的熱帶雨林，馴化后被引入世界各地。番鴨在我國已有300多年的飼養(yǎng)歷史，福建和臺灣地區(qū)是傳統(tǒng)的番鴨養(yǎng)殖區(qū)域，目前已經(jīng)逐步引入我國北方各省。在2020年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布的《國家畜禽遺傳資源目錄》中，番鴨被列為特種畜禽，按照《中華人民共和國畜牧法》管理。目前我國番鴨養(yǎng)殖以中小養(yǎng)殖戶為主，管理粗放，飼養(yǎng)環(huán)境條件差，場地消毒不嚴(yán)格，導(dǎo)致番鴨副黏病毒病、番鴨細(xì)小病毒病、鴨疫里默氏桿菌?。▊魅拘詽{膜炎）、禽霍亂時有發(fā)生，甚至暴發(fā)禽流感，嚴(yán)重影響到養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。2020年6月，河南省新密市一番鴨養(yǎng)殖場70日齡留種番鴨發(fā)病，出現(xiàn)大群采食量下降、個別精神差、有扭頭等神經(jīng)癥狀，發(fā)病后每天死亡率1%左右。養(yǎng)殖戶帶有癥狀的病鴨和病死鴨來河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院禽病實(shí)驗(yàn)室就診，經(jīng)病理剖檢、實(shí)驗(yàn)室診斷，檢測結(jié)果為副黏病毒和鴨疫里默氏桿菌混合感染，檢測過程和治療情況介紹如下：

一、發(fā)病情況

該養(yǎng)殖戶從外地購進(jìn)60日齡種番鴨3 000只，引入5天后個別番鴨出現(xiàn)精神沉郁、羽毛松亂、食欲減少、排黃白色稀便，隨著病情發(fā)展出現(xiàn)食欲廢絕，排黃色、暗紅色、綠色或墨綠色水樣糞便，70日齡時病情加重前來就診。觀察患病鴨，兩腿發(fā)軟、不愿運(yùn)動，離群呆立、愛蹲伏，強(qiáng)行驅(qū)趕時行動蹣跚。后期嚴(yán)重患鴨出現(xiàn)陣發(fā)性扭頭轉(zhuǎn)圈和頭向后仰等神經(jīng)癥狀，部分病鴨出現(xiàn)甩頭、咳嗽，并伴隨呼嚕而發(fā)出啰音。發(fā)病早期每天死亡10多只，來診時每天死亡已達(dá)到30多只。

二、剖檢病變

剖檢可見肝臟腫大，在肝外膜上附著一層黃白色纖維蛋白滲出物，去掉被膜，肝質(zhì)地發(fā)硬，表面有數(shù)量不等、大小不一的灰黃色壞死灶；脾臟腫大1～2倍，表面布滿粟粒或芝麻大小、灰白色的壞死灶；心包腔內(nèi)積有黃白色纖維蛋白滲出物，使心包和心壁粘連；氣囊增厚，在氣囊上有黃白色纖維素性滲出物；胰臟腫脹出血，表面有灰白色光滑的壞死點(diǎn)；腸道漿膜出血，剖開腸腔在十二指腸、回腸、空腸可見散在性、大小不一的出血和局灶性壞死。剖開痂皮后可見出血或潰瘍灶，腺胃黏膜與肌胃角質(zhì)層下出血。

三、實(shí)驗(yàn)室診斷

1. 細(xì)菌分離鑒定

在無菌條件下采集發(fā)病番鴨的肝臟、脾臟，分別劃線接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和血液瓊脂培養(yǎng)基上，在37℃條件下分別培養(yǎng)于普通培養(yǎng)箱和5%二氧化碳培養(yǎng)箱。從生長良好的培養(yǎng)基中將單個菌落進(jìn)一步純化培養(yǎng)，然后進(jìn)行革蘭氏染色鑒定。

2. 病毒分離鑒定

①病料采集與處理

采集早期死亡和癥狀典型的病鴨的腦組織，將病料研磨成漿，加入無菌PBS液制成1∶5懸液，按每毫升加入青霉素、鏈霉素各2 000單位，反復(fù)凍融3次，再按3 000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，吸取上清液，用除菌過濾器除菌。

②分離病毒

選用10～11日齡SPF雞胚30枚，雞胚尿囊腔接種上述上清液0.2毫升，在37.8℃條件下繼續(xù)孵化，每天照蛋4次，廢棄24小時內(nèi)死亡雞胚，將24～72小時內(nèi)死亡雞胚冷藏后收集尿囊液，同時剖解觀察胚體病變。

③病毒鑒定

a.檢測血凝性及血凝抑制試驗(yàn) 檢測24～72小時內(nèi)死亡雞胚尿囊液的血凝活性，如能凝集1%雞紅細(xì)胞，判斷存在副黏病毒或禽流感病毒。然后分別選擇副黏病毒陽性血清、禽流感H9N2陽性血清、H5N1（Re-11，Re-12）陽性血清和H7N9（Re-2）陽性血清，分別進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)。倘若已知陽性血清（抗血清）能抑制尿囊液被檢病毒的血凝活性，且不被已知陰性血清所抑制，即可確定病毒種類。

b.動物回歸試驗(yàn) 選擇健康未免疫、易感的20日齡雛番鴨，用上述分離尿囊液每只鴨皮下注射0.2 毫升。飼養(yǎng)1周，觀察是否出現(xiàn)發(fā)病、死亡病例，且與自然死亡病例具有同樣典型病變特征。

四、試驗(yàn)結(jié)果

1. 細(xì)菌分離鑒定結(jié)果

經(jīng)過細(xì)菌分離，該菌不能在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中生長，能在血液瓊脂培養(yǎng)基生長，而且在5%二氧化碳培養(yǎng)箱中生長旺盛、菌落更大。菌落形態(tài)為凸起、邊緣整齊、半透明、有光澤的奶油狀光滑菌落，無溶血現(xiàn)象，純化培養(yǎng)后的細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色鏡檢為革蘭氏陰性小桿菌。根據(jù)病理剖檢變化、培養(yǎng)特性及鏡檢結(jié)果診斷為鴨疫里默氏桿菌感染。

2. 雞胚接種后死胚病變觀察

雞胚接種后28～72小時，出現(xiàn)雞胚死亡，死亡的胚體全身出血發(fā)紅。

3. 病毒血凝特性與血凝抑制試驗(yàn)

收集尿囊液做血凝試驗(yàn)，結(jié)果顯示該病毒能凝集1%雞紅細(xì)胞，判斷有副黏病毒或禽流感病毒感染。進(jìn)一步鑒定病毒，用副黏病毒陽性血清、禽流感H9N2陽性血清、H5N1（Re-11，Re-12）陽性血清、H7N9（Re-2）陽性血清分別做血凝抑制試驗(yàn)。結(jié)果顯示，只有副黏病毒陽性血清能抑制該病毒的血凝現(xiàn)象，診斷為副黏病毒感染。

4. 動物回歸試驗(yàn)

將分離尿囊病毒液采用皮下注射方法攻毒，攻毒后48小時出現(xiàn)副黏病毒臨床癥狀，72小時出現(xiàn)死亡，剖檢癥狀和副黏病毒臨床病例一致。

五、診斷與治療

1. 診斷

根據(jù)臨床癥狀、病理剖檢變化和實(shí)驗(yàn)室診斷，最后確診該病例為副黏病毒和鴨疫里默氏桿菌混合感染。

2. 治療

將出現(xiàn)精神沉郁、食欲減少的病鴨進(jìn)行隔離飼養(yǎng)，淘汰神經(jīng)癥狀的病鴨。加強(qiáng)場區(qū)消毒工作，每天進(jìn)行2次帶鴨消毒。用抗副黏病毒高免抗體注射，每只鴨4毫升；對嚴(yán)重病例第二天再注射1次。氟苯尼考和強(qiáng)力霉素按說明書中的用量飲水服用，中藥清瘟敗毒散拌料飼喂，用藥3天后，大群精神采食恢復(fù)正常，不再有新的病例發(fā)生。

六、小結(jié)

鴨疫里默氏桿菌主要侵害水禽，引起水禽傳染性漿膜炎，是一種急性、敗血性傳染病。國外報道最早發(fā)病在鵝上，近些年在番鴨養(yǎng)殖中也時有發(fā)生，番鴨養(yǎng)殖戶要引起高度重視。預(yù)防該病需要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激，避免呼吸道有害氣體刺激；養(yǎng)殖場地清除石塊和尖銳異物，防止腳蹼刺傷。本文病例番鴨多采用地面散養(yǎng)，飼養(yǎng)環(huán)境條件差，平時不注意消毒，特別是陰雨天地面泥濘，容易導(dǎo)致傳染病的發(fā)生，養(yǎng)殖戶應(yīng)將防控重點(diǎn)放在改善飼養(yǎng)環(huán)境上，做好日常環(huán)境消毒工作。水禽副黏病毒病是由禽副黏病毒引起的一種病毒性、急性傳染病，其發(fā)病率較高，如果養(yǎng)殖戶不進(jìn)行副黏病毒病的免疫接種工作，該病很容易在水禽場發(fā)生，建議種用水禽開產(chǎn)前至少用副黏病毒滅活苗免疫3次。此外，該病例出現(xiàn)的典型傳染性漿膜炎癥狀也與轉(zhuǎn)群應(yīng)激有關(guān)，養(yǎng)殖戶從外地購進(jìn)種鴨近1周，因轉(zhuǎn)群應(yīng)激導(dǎo)致鴨群抵抗力下降，從而引起副黏病毒和鴨疫里莫氏桿菌病混合感染。

（作者聯(lián)系地址：河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院 郵編：450046）