牛羊布魯氏桿菌病的綜合診斷與防治

張莉，吳妍妍，李益濤，王標(biāo)，齊亞銀*

（1.省部共建綿羊遺傳改良與健康養(yǎng)殖國家重點實驗室 新疆石河子 832000；2.石河子大學(xué)動物科技學(xué)院 新疆石河子 832000；3.新疆天山軍墾牧業(yè)有限責(zé)任公司 新疆石河子 832000）

布魯氏桿菌病是一種人畜共患病，布魯氏桿菌為革蘭氏陰性菌，對外界環(huán)境抵抗力很強(qiáng)，可以在水、土壤及動物組織中存活幾個月，布魯氏桿菌有很強(qiáng)的侵襲能力，可以通過直接接觸而經(jīng)皮膚和黏膜侵入機(jī)體，造成感染[1]。當(dāng)前，布魯氏桿菌在牛羊中感染在部分地區(qū)已經(jīng)十分普遍，可以通過臨床癥狀進(jìn)行初步診斷，確診需要通過實驗室檢測方法。

1 臨床表現(xiàn)

牛羊感染布魯氏桿菌后通常呈現(xiàn)慢性發(fā)病經(jīng)過，病畜及帶菌動物是主要傳染源，牛羊感染后一般潛伏期為2 周到6 個月，患病母畜出現(xiàn)流產(chǎn)和胎衣停滯，伴有乳腺炎、子宮炎和陰道炎?；疾」蟪霈F(xiàn)生殖系統(tǒng)疾病，如睪丸發(fā)炎，陰囊腫大。剖檢死亡病畜可見母畜的胎衣呈黃色膠凍樣浸潤，胎衣表面覆蓋纖維蛋白絮片及膿液，胎衣增厚并有出血點，淋巴結(jié)、脾臟和肝臟有腫大和壞死，公畜的精囊有出血點，睪丸和附睪有炎癥壞死灶。

2 實驗室檢測方法

布魯氏桿菌最常用的實驗室檢測方法包括虎紅平板凝集試驗和細(xì)菌學(xué)檢查方法。可以采集患病牛羊的血液，通過虎紅平板凝集試驗確診是否有布魯氏桿菌抗原，細(xì)菌學(xué)檢查方法是取發(fā)病羊的組織病料，通過涂片染色鏡檢并分離培養(yǎng)，看是否符合布魯氏桿菌特征。此外，PCR 方法也可以用于布魯氏桿菌的檢測。杜琳等[2]建立了布魯氏桿菌多重PCR 檢測方法，可以用于生鮮乳中布魯氏桿菌的檢測，該方法根據(jù)布魯氏桿菌保守抗原Omp31、Omp25 序列設(shè)計特異性檢測引物，預(yù)期擴(kuò)增片段大小分別為472bp、140bp，該檢測方法的靈敏度可達(dá)1× 105CFU/mL，可以用于生鮮乳中布魯氏桿菌的快速檢測。李秀梅等[3]通過環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)與橫向流動試紙條法快速檢測布魯氏桿菌，根據(jù)布魯氏桿菌OMP25 基因設(shè)計4 條特異性引物和1 條異硫氰酸熒光素（FITC）標(biāo)記的探針，生物素標(biāo)記LAMP 擴(kuò)增產(chǎn)物能夠特異性地與FITC 標(biāo)記的探針雜交，優(yōu)化后的擴(kuò)增溫度為63℃，時間為50min，LAMP-LFD 方法可特異性地檢出布魯氏桿菌，最低檢測下限為5.4× 102CFU/mL，結(jié)果判定較直觀，適合于基層實驗室、應(yīng)急檢測或現(xiàn)場布魯氏桿菌監(jiān)測。

3 防控措施

牛羊布魯氏桿菌病需要采取綜合防控措施，首先，應(yīng)該加強(qiáng)對牛羊布魯氏桿菌病的監(jiān)測，可以通過采血進(jìn)行布魯氏桿菌病檢測，發(fā)現(xiàn)陽性帶菌的動物要及時淘汰，在采樣過程中注意人員防護(hù)并防止交叉感染。加強(qiáng)對牛羊引種時的監(jiān)測，不引進(jìn)帶有布魯氏桿菌病的牛羊，最好是堅持自繁自養(yǎng)[4]。加強(qiáng)布魯氏桿菌病的宣傳教育，讓基層養(yǎng)殖人員了解布魯氏桿菌病的危害，提高飼養(yǎng)人員防病意識。定期對養(yǎng)殖環(huán)境進(jìn)行消毒，地面要徹底消毒，及時清理牛羊糞便，空氣要經(jīng)常通風(fēng)換氣，保持空氣清新。預(yù)防牛羊布魯氏桿菌病要選擇合適的疫苗進(jìn)行免疫接種，選擇疫苗免疫的合適時機(jī)并注意疫苗的有效保護(hù)期。對發(fā)病死亡的病畜要深埋并經(jīng)過無害化處理，防止布魯氏桿菌病蔓延構(gòu)成牛羊飼養(yǎng)的潛在威脅。牛羊布魯氏桿菌病感染后治愈率較低，而且治療困難，一旦感染后會終生攜帶病菌，給養(yǎng)殖場帶來很大威脅，有條件的飼養(yǎng)場可以采取布魯氏桿菌病的凈化措施，凈化區(qū)域環(huán)境是控制布魯氏桿菌病的有效措施，發(fā)現(xiàn)布魯氏桿菌病陽性患畜要及時撲殺，減少疫病傳播的風(fēng)險。在實施凈化過程中可以根據(jù)養(yǎng)殖場的實際情況采用合適的凈化方案[5]。在牛羊等養(yǎng)殖場禁止養(yǎng)犬，犬可能是布魯氏桿菌的攜帶者，會造成布魯氏桿菌的擴(kuò)散傳播。同時做好滅蚊滅蜱工作，消滅一切傳播媒介。在牛羊的飼養(yǎng)過程中一定要加強(qiáng)人員防護(hù)，由于布魯氏桿菌病的傳染性很強(qiáng)，飼養(yǎng)人員進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)必須穿工作服，戴口罩和手套，在采血取樣和注射疫苗時防止皮膚扎傷，工作后要及時洗手消毒。

4 結(jié)語

布魯氏桿菌病的防控形勢十分嚴(yán)峻，每年患病動物數(shù)量都呈上升趨勢，布魯氏桿菌病的流行監(jiān)測與防控需要長期堅持下去不能松懈，只有積極開展牛羊布魯氏桿菌病的診斷與防治，才能為布魯氏桿菌病的凈化奠定基礎(chǔ)，保障養(yǎng)牛業(yè)、養(yǎng)羊業(yè)的健康發(fā)展。