氣相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法高通量檢測食用油中3 類污染物

張巖 陳銀鋼 胡蕊

新沂市檢驗(yàn)檢測中心 江蘇新沂 221400

建立氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜同時(shí)測定食用油中的18種鄰苯二甲酸酯、16 種多環(huán)芳烴和7 種多氯聯(lián)苯的檢測方法。樣品經(jīng)正己烷飽和乙腈超聲提取、固相萃取柱凈化，采用DB-5 毛細(xì)管柱分離，以電子電離源，多反應(yīng)離子監(jiān)測模式定量測定。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

正己烷、乙腈（均為色譜純）美國Tedia 公司；分散固相凈化劑多點(diǎn)鍵合十八烷基（C18）和C18 鍵合鋯膠體（Z-Sep+）美國Sigma-Aldrich 公司。性能檢查標(biāo)準(zhǔn)溶液（performan cecheck standards，PCS）北京環(huán)亞高科有限公司；內(nèi)標(biāo)含有4-氯甲苯-D4（06-43-41）、1，4-二氯苯-D4（106-46-7）、萘-D8（91-20-3）、苊-D10（83-32-9）、菲-D10（85-01-8）、熒 蒽-D10（206-44-0）、 ?-D12（218-01-9） 和 苝-D12（198-55-0）北京環(huán)亞高科有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

安捷倫8890-700DD 氣相色譜-三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜；KQ-300ES 數(shù)控超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；HGC-12A氮吹儀，天津市恒奧科技發(fā)展有限公司。

1.3 方法

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制。標(biāo)準(zhǔn)儲備液：準(zhǔn)確稱取18 種鄰苯二甲酸酯類化合物的標(biāo)準(zhǔn)品各10mg（精確到0.0001g）于10mL 容量瓶中，用正己烷溶解并稀釋至刻度，配制成質(zhì)量濃度為1.00mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)貯備液；準(zhǔn)確稱取16 種PAHs 類化合物的標(biāo)準(zhǔn)品各10mg（精確到0.0001g）于10mL 容量瓶中，用乙腈溶解并稀釋至刻度，配制成質(zhì)量濃度為1.00mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)貯備液；準(zhǔn)確稱取7 種PCBs類化合物的標(biāo)準(zhǔn)品各10mg（精確到0.0001g）于10mL 容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，配制成質(zhì)量濃度為1.00mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)貯備液；以上41 種標(biāo)準(zhǔn)儲備液均于-18℃保存。分別吸取各標(biāo)準(zhǔn)儲備液適量，用丙酮配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。標(biāo)準(zhǔn)工作液：將上述混合標(biāo)準(zhǔn)溶液用丙酮逐級稀釋為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，臨用現(xiàn)配。

食用油樣品前處理方法。用天平稱取樣品油5.0g 于250mL 錐形瓶中，加入25.0mL 乙腈，轉(zhuǎn)入分液漏斗充分搖勻（5min），靜置分層，將油層從分液漏斗下口放出，再用25mL 乙腈萃取兩次，合并3 次乙腈提取液，在雞心瓶中，溫度保持在40℃，旋蒸至干。用4.0mL 正己烷復(fù)溶。將弗羅里硅土（100 目～200 目，層析用）1.0000g 填到容量為3mL 的SPE 小管中，加上墊片，自制弗羅里硅土SPE 小柱。用3.0mL 正己烷潤洗小柱，以小于0.5mL/min 速度將4.0mL 正己烷提取液通過小柱，待完全流過后，用5.0mL 丙酮洗脫，收集洗脫液，保持水浴溫度在40℃左右，用N2 吹干。正己烷定容至1.00mL，以待GC-MS 檢測。

2 結(jié)果

2.1 薄層色譜法

在劣質(zhì)食用油檢測工作過程中，為了達(dá)到對氧化產(chǎn)物醛、酮類等有效分離及科學(xué)檢測的目的，需要考慮對薄層色譜法的引入及科學(xué)應(yīng)用。具體表現(xiàn)在以下兩個(gè)方面。①在薄層色譜法的支持下，可通過對劣質(zhì)食用油中明顯拖尾斑的科學(xué)分析，并與品質(zhì)良好的食用油薄層色譜特征斑點(diǎn)形狀進(jìn)行比較，獲取應(yīng)用價(jià)值良好的檢測結(jié)果，降低食用油的應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)。②借助薄層色譜法的應(yīng)用優(yōu)勢對食用油品質(zhì)進(jìn)行檢測分析時(shí)，雖然取得了一定的成效，但這種檢測技術(shù)也存在靈敏度及定量準(zhǔn)確度不高的問題，主要適用于低含量摻偽食用油檢測，需要檢測人員在實(shí)踐中結(jié)合實(shí)際情況，合理使用薄層色譜法。

2.2 脂肪酸分析的結(jié)合

有些學(xué)者依照不同植物油脂的脂肪酸和含量不同進(jìn)行檢測，從中選擇不同的參數(shù)進(jìn)行對比，也就是成分分析、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析和脂肪酸酸含量分析等。但脂肪酸參數(shù)法可以更好地分析植物油脂，使用判斷方程來分析相應(yīng)植物油脂也有一定效果，人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)分析法比較精確。有些人則使用平均矢量和直接選擇方法來建立關(guān)于花生油、葵花籽油以及菜籽油的植物油譜，以更好地開展相關(guān)的研究和對比工作。根據(jù)植物油的不同來判斷純油脂，還可以使用直觀對比的方法，將順式油酸和硬脂酸甲酯參數(shù)制作成二維圖紙，確定油脂是否真實(shí)。

2.3 超聲輔助萃取時(shí)間的優(yōu)化

在稱樣量0.5g、加入2mL 正己烷飽和乙腈萃取劑、渦旋1min的條件下，考察10、15、20min3個(gè)超聲萃取時(shí)間的影響，平行3次實(shí)驗(yàn)。超聲時(shí)間為10min 時(shí)一些物質(zhì)的回收率較低。超聲時(shí)間為15min 和20min 時(shí)，各組分的回收率差別不大。因此，為減少耗時(shí)，最終選擇超聲輔助萃取時(shí)間為15min。

2.4 凈化方法的優(yōu)化

在相同的提取條件下，實(shí)驗(yàn)對比了超低溫冷凍除脂法、QuEChERS（quick，easy，cheap，effective，rugged，safe）法和SPE 法凈化，平行3 次實(shí)驗(yàn)。超低溫冷凍除脂法是樣品溶液經(jīng)提取后，將得到的待凈化液放于超低溫冰箱中，轉(zhuǎn)移至玻璃離心管中以4000r/min 離心5min，取上清液待測。QuEChERS法是樣品溶液經(jīng)提取后，取1mL 待凈化液于玻璃離心管中，再加入50mg 的C18 和50mg 的丙基乙二胺（primary secondary amine，PSA）粉末，渦旋1min，以4000r/min 離心5min，取上清液待測。超低溫冷凍除脂雖然操作簡單，試劑用量小，也可有效地除脂，但并不能除去基質(zhì)中的雜質(zhì)和大分子物質(zhì)，被測物質(zhì)的回收率普遍偏低。QuEChERS 法的凈化效果和SPE 柱凈化效果相當(dāng)，但其空白對照組檢測出更多的PAHs 和鄰苯二甲酸酯，影響測定的準(zhǔn)確性。SPE 柱凈化法凈化效果好、回收率高。因此，最終選擇SPE 柱凈化為前處理的凈化方法。

3 結(jié)語

在優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件下，方法靈敏度較高，不同檢測技術(shù)進(jìn)展方面的分析，有利于提高食用油品質(zhì)檢測工作效率及質(zhì)量，高效完成相應(yīng)的工作計(jì)劃，滿足人們在健康方面的實(shí)際需求。因此，未來在提升食用油品質(zhì)檢測水平、優(yōu)化檢測方式的過程中，應(yīng)加強(qiáng)對相關(guān)技術(shù)的重視程度，切實(shí)落實(shí)檢測工作計(jì)劃，促使食用油品質(zhì)檢測朝更加合理、科學(xué)的方向發(fā)展。長此以往，可使我國食用油品質(zhì)檢測技術(shù)達(dá)到更高的水平。