食品中氯霉素類藥物殘留量檢測(cè)方法研究進(jìn)展

梁泳欣

番禺海關(guān)綜合技術(shù)服務(wù)中心 廣州番禺 511400

1 氯霉素類藥物的危害分析

隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，氯霉素能夠有效地對(duì)細(xì)菌感染所導(dǎo)致的疾病起到抑制的作用，具有很大的醫(yī)療作用，但同時(shí)也存在一定的缺陷，作為一種抗生素藥物，氯霉素會(huì)在人體中積累到一定的量時(shí)就會(huì)對(duì)人體健康產(chǎn)生致命性傷害，抑制骨髓細(xì)胞內(nèi)線粒體蛋白質(zhì)的合成，對(duì)人和動(dòng)物骨髓細(xì)胞和肝細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，能引起再生障礙性貧血，并伴有白細(xì)胞和血小板減少現(xiàn)象，新生兒、早產(chǎn)兒灰色綜合癥等，還會(huì)誘發(fā)致病菌的耐藥性。這種對(duì)人體健康會(huì)產(chǎn)生極大威脅的藥物引起了人們極大的關(guān)注，要求相關(guān)部門要進(jìn)一步增強(qiáng)對(duì)食品安全的監(jiān)察力度，并注重對(duì)食品中氯霉素殘留物進(jìn)行一系列的檢測(cè)工作，從而確保食品的安全。到目前為止，國(guó)內(nèi)外用于氯霉素類化合物的檢測(cè)方法已近十幾種，本文選取幾種常用方法進(jìn)行簡(jiǎn)要概述[1]。

2 食品中氯霉素類藥物殘留量檢測(cè)方法的研究

2.1 微生物檢測(cè)方法的應(yīng)用

通過利用氯霉素對(duì)部分特定的微生物起到抑制感染這種特性，采取微生物學(xué)檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)這些藥物是否殘留在食品中。目前將以牛奶作為檢測(cè)對(duì)象，采取微生物法檢測(cè)法來(lái)檢測(cè)牛奶中是否殘留氯霉素這類藥物，該方法是通過快速檢測(cè)試紙而獲取較為精準(zhǔn)的數(shù)值結(jié)果。此外，對(duì)于鰒發(fā)光桿菌的應(yīng)用，簡(jiǎn)單來(lái)說，氯霉素能夠在一定程度上對(duì)發(fā)光微生物的發(fā)光效應(yīng)起到抑制作用，通過利用該特性來(lái)對(duì)氯霉素在食品中的實(shí)際殘留量展開檢測(cè)，根據(jù)其原理能夠建立起發(fā)光微生物發(fā)光抑制效應(yīng)與對(duì)應(yīng)氯霉素濃度對(duì)數(shù)含量等之間的具體線性關(guān)系，最終所取得的數(shù)值結(jié)果若屬于該方法所建立的線性關(guān)系之間的幅度內(nèi)，就代表著該食物中含有氯霉素類藥物。采取微生物檢測(cè)方法來(lái)對(duì)食品中的氯霉素類藥物殘留量進(jìn)行檢測(cè)具有簡(jiǎn)便快捷、低成本等優(yōu)勢(shì)特征，并且也適用于對(duì)多種抗生素的同時(shí)檢測(cè)占有一定的優(yōu)勢(shì)，但同時(shí)存在敏感性和專一性低，易漏檢，且容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的缺陷，應(yīng)用規(guī)模受到一定的限制，因此僅僅在水產(chǎn)品養(yǎng)殖領(lǐng)域中進(jìn)行應(yīng)用。

2.2 氣相色譜法的應(yīng)用

采用氣相色譜法來(lái)對(duì)食品中氯霉素類藥物的殘留進(jìn)行檢測(cè)首先需要在食物樣品中進(jìn)行乙酸乙脂的提取濃縮工作之后，把提取物溶于水中，之后使用正己烷進(jìn)行脫脂--凈化--衍生化等一系列操作，最后采取氣相色譜儀來(lái)對(duì)成品進(jìn)行檢測(cè)，最終的數(shù)值結(jié)果還需要通過對(duì)比范圍的方法來(lái)確認(rèn)食品中是否殘留氯霉素類藥物。氣相色譜法在近些年得到了改良，在監(jiān)測(cè)的過程中對(duì)蝦類樣品的食物前期展開了改良操作，增加了提取時(shí)間并且引入了超聲波這種輔助手段，這對(duì)提升數(shù)值結(jié)果的準(zhǔn)確性帶來(lái)重要的作用。

2.3 液相色譜法的應(yīng)用

在對(duì)食品中氯霉素類藥物殘留量進(jìn)行檢測(cè)的過程中采取液相色譜法的應(yīng)用首先是通過提取了蛋白沉淀劑以及選取了取溶劑的流程，例如采用甲醇來(lái)成為首選展開實(shí)驗(yàn)，對(duì)CAP、FFa、FF等具體含量進(jìn)行測(cè)定來(lái)展開評(píng)判工作。如食品中CAP 的含量數(shù)值在1至400ug/kg之間，而FFa的具體含量在10至2000ug/kg之間，F(xiàn)F的含量數(shù)值在20之2000ug/kg 之間時(shí)，也就是說最后的數(shù)值在三者的含量?jī)?nèi)，就基本上可判定該食物樣品中存在氯霉素的殘留情況。液相色譜適宜于分離、分析高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、有生理活性及相對(duì)分子量比較大的物質(zhì)，因而廣泛應(yīng)用于藥物殘留的分析檢測(cè)[2]。

2.4 質(zhì)譜法的應(yīng)用

主要有氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatographmass spectrometer,GC-MS)和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(liquid chromatographymass spectrometry,LC-MS/MS)法。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 22338—2008《動(dòng)物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測(cè)定》[15]規(guī)定了水產(chǎn)品中氯霉素類 (CAP、氟甲砜霉素和甲砜霉素) 殘留的氣相色譜-質(zhì)譜 (GC-MS) 和液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜 (HPLC-MS/MS) 的測(cè)定方法。GC-MS法的樣品用乙酸乙酯提取，4%氯化鈉溶液和正己烷液-液萃取，經(jīng)Florisil柱凈化后，以甲苯為反應(yīng)介質(zhì)，用N, O雙 (三甲基硅基) 三氟乙酰胺-三甲基氯硅烷于70℃衍生化60min，用氣相色譜/負(fù)化學(xué)電離源質(zhì)譜測(cè)定，內(nèi)標(biāo)工作曲線法定量，對(duì)CAP的檢出限為0.1μg/kg；HPLC-MS/MS法的樣品用飽和乙腈正己烷提取，提取液用LC-Si固相萃取柱進(jìn)行凈化，CAP采用內(nèi)標(biāo)法定量分析，對(duì)CAP的檢出限為0.1μg/kg[3]。

2.5 免疫分析法的應(yīng)用

酶聯(lián)免疫法的測(cè)定原理是在氯霉素全抗原中加入氯霉素抗體,再加入酶標(biāo)記物，用四甲基聯(lián)苯胺(tetramethyl benzidine,TMB)底物顯色，樣本和標(biāo)準(zhǔn)液中氯霉素含量與吸光度呈反比。氯霉素在0.05～4.05 ng/m L范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,回收率在85%以上。這種方法的應(yīng)用能夠預(yù)防由于放射性同位素所造成的不必要危害，并且采取免疫分析法所涉及到的檢測(cè)儀器及其設(shè)備的操作相對(duì)簡(jiǎn)單，能夠在一定程度上降低由于操作流程繁瑣而造成的實(shí)驗(yàn)誤差率，同時(shí)也具備良好的檢測(cè)靈敏度，值得加大應(yīng)用推廣率。