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    不同殺菌劑對(duì)滁菊黑斑病病菌孢子萌發(fā)及菌絲生長(zhǎng)的影響

    2020-11-24 05:19:06湯士勇
    關(guān)鍵詞:生長(zhǎng)

    湯士勇,賈 丹

    (滁州職業(yè)技術(shù)學(xué)院 食品與環(huán)境工程學(xué)院,安徽 滁州 239000)

    滁菊是四大藥菊之一,藥食兩用,也是國(guó)家地理標(biāo)志產(chǎn)品。[1]黑斑病是滁菊葉部的主要病害,危害嚴(yán)重年份,常造成葉片枯死達(dá)30%~50%,單株花朵減少30%~50%。[2]許高娟、葉琪明等研究表明菊花黑斑病的病原是鏈格孢屬真菌。[3-5]本試驗(yàn)在前期病原菌的分離鑒定中參考趙喜婷等的方法[6],分離鑒定出滁菊黑斑病的病原菌也為鏈格孢屬真菌。滁菊無(wú)公害生產(chǎn)中,病蟲(chóng)害防治以預(yù)防為主,在現(xiàn)蕾后一般禁止噴施農(nóng)藥,因此,滁菊葉部病害的藥物防治主要是在苗期進(jìn)行。本研究選取生產(chǎn)中常用的幾種高效、低殘留、低抗藥性的殺菌劑,擬通過(guò)對(duì)滁菊黑斑病病原菌室內(nèi)抑菌效果的測(cè)定,為篩選防治滁菊苗期黑斑病藥劑提供理論依據(jù)。

    1 材料和方法

    1.1 材料

    1.1.1供試菌株

    供試菌株從滁州職業(yè)技術(shù)學(xué)院校內(nèi)滁菊生產(chǎn)實(shí)訓(xùn)基地發(fā)病滁菊植株葉片上分離獲得,經(jīng)純化及致病性鑒定并通過(guò)形態(tài)學(xué)及分子鑒定確定為鏈格孢(Alternariaalternata)。

    1.1.2供試藥劑

    病原菌室內(nèi)毒力測(cè)定的農(nóng)藥劑型及來(lái)源見(jiàn)表1。

    表1 供試農(nóng)藥劑型及來(lái)源

    1.2 方法

    1.2.1孢子萌發(fā)率測(cè)定

    采用孢子萌發(fā)率測(cè)定法測(cè)定不同殺菌劑對(duì)鏈格孢(Alternariaalternata)孢子萌發(fā)抑制作用。用取樣器吸取0.5mL孢子懸液與0.5mL農(nóng)藥母液(濃度梯度為2×0.2、2×1.0、2×5.0、2×25.0、2×125.0μg/mL,含1%葡萄糖)等量混合均勻。加入凹玻片,架放于帶有淺層水的培養(yǎng)皿中加蓋保濕,置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24h后檢測(cè)孢子萌發(fā)率,計(jì)算孢子萌發(fā)抑制率并進(jìn)行毒力回歸分析,得出EC50。每處理重復(fù)3次,以含1%葡萄糖的蒸餾水作為對(duì)照。

    孢子萌發(fā)率(%)=萌發(fā)孢子數(shù)/檢查孢子總數(shù)×100。

    孢子萌發(fā)抑制率(%)=(對(duì)照孢子萌發(fā)率-處理孢子萌發(fā)率)/對(duì)照孢子萌發(fā)率×100。

    1.2.2菌絲生長(zhǎng)速率測(cè)定

    采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定不同殺菌劑對(duì)黑斑病病原鏈格孢(Alternariaalternata)菌絲生長(zhǎng)的抑制作用。在含藥PDA平板(藥劑濃度梯度為0.2、1.0、5.0、25.0、125.0μg/mL)上接種直徑5mm的菌餅,25℃恒溫箱中黑暗培養(yǎng)7d,用十字交叉法測(cè)量菌落直徑,計(jì)算抑菌率并進(jìn)行毒力回歸分析,得出EC50,每處理重復(fù)3次,以不加藥劑的PDA平板為對(duì)照。

    菌落凈生長(zhǎng)量(mm)=平均菌落直徑(mm)-菌餅直徑(mm)。

    菌絲生長(zhǎng)抑制率(%)=(對(duì)照菌落凈生長(zhǎng)量-處理菌落凈生長(zhǎng)量)/對(duì)照菌落凈生長(zhǎng)量 ×100。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    用Excel整理數(shù)據(jù)并計(jì)算、SPSS進(jìn)行方差、概率單位回歸分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 對(duì)病原菌孢子萌發(fā)的影響

    8種不同殺菌劑對(duì)鏈格孢菌孢子萌發(fā)均有較強(qiáng)的抑制作用,同種藥劑孢子萌發(fā)抑制率隨著藥劑濃度的增加而增加;在濃度為125μg/mL時(shí)百菌清、多菌靈、咪鮮胺3種藥劑孢子萌發(fā)抑制率>90%;在濃度為0.2μg/mL時(shí)甲基硫菌靈、代森錳鋅孢子萌發(fā)抑制率<10%;異菌脲、氟硅唑在25與125μg/mL濃度水平上,丙環(huán)唑在5與25μg/mL濃度水平上孢子萌發(fā)抑制率差異不顯著。見(jiàn)表2。

    表2 不同殺菌劑對(duì)鏈格孢菌孢子萌發(fā)的抑制效果

    不同殺菌劑抑制黑斑病鏈格孢菌孢子萌發(fā)的試驗(yàn)表明:異菌脲、丙環(huán)唑、氟硅唑的EC50值<1μg/mL,效應(yīng)較強(qiáng),其中丙環(huán)唑EC50值最小(0.673μg/mL),效應(yīng)最強(qiáng);代森錳鋅、多菌靈、甲基硫菌靈的EC50值>5μg/mL,效應(yīng)較弱,其中甲基硫菌靈的EC50值最大(19.452μg/mL),效應(yīng)最弱,但甲基硫菌靈的回歸方程斜率最大(0.947)表明:甲基硫菌靈的抑制孢子萌發(fā)效果隨濃度變化較大。見(jiàn)表3。

    表3 不同殺菌劑對(duì)鏈格孢菌孢子萌發(fā)的毒力比較

    2.2 對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的影響

    8種不同殺菌劑對(duì)滁菊葉斑病病原菌的菌絲生長(zhǎng)均有抑制作用,且同一藥劑抑菌率基本隨著濃度的增大而增加。代森錳鋅、百菌清、丙環(huán)唑在濃度為0.2與1.0μg/mL處理間抑菌作用差異不顯著;異菌脲、氟硅唑在濃度為25與125μg/mL處理間抑菌作用差異不顯著;多菌靈在濃度為0.2與1.0μg/mL、1.0與5.0μg/mL處理間差異不顯著;甲基硫菌靈在1.0與5.0μg/mL處理間差異不顯著。在濃度為125μg/mL濃度時(shí)異菌脲的抑菌作用最強(qiáng)(96.10%),在濃度為0.2μg/mL時(shí)代森錳鋅抑菌率最低(8.62%),如表4所示。

    表4 不同殺菌劑對(duì)鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)的抑菌效果

    不同殺菌劑抑制黑斑病鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)的試驗(yàn)表明:百菌清、異菌脲、多菌靈、氟硅唑的EC50值<1μg/mL,效應(yīng)較強(qiáng),其中氟硅唑EC50值最小(0.046μg/mL),效應(yīng)最強(qiáng);代森錳鋅的EC50值為18.787>5μg/mL,效應(yīng)最弱,但是代森錳鋅的回歸方程斜率最大(0.857)表明代森錳鋅的抑制菌絲生長(zhǎng)效應(yīng)隨濃度變化較大。見(jiàn)表5。

    表5 不同殺菌劑對(duì)鏈格孢菌菌絲生長(zhǎng)的毒力比較

    3 結(jié)論與討論

    綜合抑制孢子萌發(fā)試驗(yàn)和抑制菌絲生長(zhǎng)試驗(yàn)結(jié)果,異菌脲、氟硅唑兩種藥劑在抑制滁菊黑斑病鏈格孢菌的孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)兩方面效應(yīng)均較強(qiáng),應(yīng)該作為下一步田間防效試驗(yàn)的優(yōu)先選用藥劑。同時(shí)也發(fā)現(xiàn),同種藥劑對(duì)孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)的效應(yīng)并不完全一致。因此,在田間試驗(yàn)中應(yīng)考慮同種藥劑在黑斑病不同發(fā)病期的防效。

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