血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)與老年特發(fā)性間質(zhì)性肺炎相關(guān)性分析

葉舒婷 趙敏華 李夢遠(yuǎn) 張 英

特發(fā)性間質(zhì)性肺炎（idiopathic interstitial pneumonia，IIP）是一組病因不明的進(jìn)行性下呼吸道疾病，好發(fā)于老年人[1]。該病發(fā)病機制復(fù)雜，診治困難，大部分患者因肺纖維化導(dǎo)致肺動脈高壓、肺源性心臟病，IIP 缺乏特效的治療方法，患者生存時間較短[2-3]。血清學(xué)標(biāo)志物是目前常用的一種非創(chuàng)性診斷方法，既往研究顯示結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）、血小板衍生生長因子-BB（platelet-derived growth factor-BB，PDGF-BB）與纖維化的發(fā)生發(fā)展有關(guān)[4-5]。本研究檢測老年IIP 患者血清中CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)水平，并分析二者與IIP 的相關(guān)性。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選取2015 年3 月—2019 年10 月在浙江省臺州市立醫(yī)院呼吸內(nèi)科接受治療的老年IIP 患者99 例作為研究對象。依據(jù)不同病理類型分為特發(fā)性肺纖維化（IPF）組53 例；除IPF 外的其他類型IIP（nIPF-IIP）組46 例，其中包括非特異性間質(zhì)性肺炎（NSIP）18 例，隱源性機化性肺炎（COP）17例，呼吸性細(xì)支氣管炎伴間質(zhì)性肺疾?。≧B-ILD）11例。另外選擇同期在我院進(jìn)行老年健康體檢者40 名作為對照組。本研究方案經(jīng)臺州市立醫(yī)院倫理委員會審核通過，符合《赫爾辛基宣言》倫理原則。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn) （1）均經(jīng)臨床、影像學(xué)等檢查確診為IIP 患者：IPF 診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《特發(fā)性肺纖維化診斷和治療中國專家共識》[6]，nIPF-IIP 診斷參照美國胸科學(xué)會/歐洲呼吸學(xué)會官方共識[7]；（2）臨床資料完整；（3）年齡≥60 歲；（4）所有研究對象及家屬均簽署知情同意書。

1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) （1）合并心臟、腎臟等其他器官組織纖維化者；（2）呼吸系統(tǒng)疾病者；（3）合并感染者；（4）免疫系統(tǒng)檢查異常者。

2 方 法

2.1 檢測指標(biāo)及方法 （1）一般資料：包括性別、年齡、病程、是否吸煙等；（2）標(biāo)本提?。捍稳赵绯?:00抽取研究對象空腹?fàn)顟B(tài)肘靜脈血5mL，置于離心機中以5000r/min 轉(zhuǎn)速離心10min（離心半徑為10cm），移取上清液放入2mL 凍存管中，分離血清標(biāo)記后于-80℃冰箱凍存待測，然后采用SIEMENS ADVIA2400 全自動生化分析儀（德國）檢測總膽固醇（TC）（氧化酶法）、三酰甘油（TG）（甘油磷酸氧化酶-過氧化物酶法）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）（勻相測定法）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）（勻相測定法）、超敏C 反應(yīng)蛋白（hs-CRP）（免疫散射比濁法）以及同型半胱氨酸（Hcy）（氧化酶法）等生化指標(biāo)，所有試劑盒均購自寧波美康生物科技有限公司（批號150214、160521、160512、161224、170514、150630）；（3）血清CTGF 和PDGF-BB 測定：于相同條件下采集所有研究對象空腹血液標(biāo)本，分離血清置-80℃保存待測，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗法（ELISA）檢測血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)，定量測定試劑盒購自上海億欣生物科技有限公司（批號150327、150619）。

2.2 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 24.0 統(tǒng)計軟件，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（） 表示，多組間比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t 檢驗；計數(shù)資料采用例數(shù)（n）和百分比（%）描述，行χ2檢驗。然后采用ROC 曲線分析血清CTGF、PDGF-BB 表達(dá)界限值，采用Logistic 逐步回歸分析老年IIP 肺纖維化的相關(guān)影響因素，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 三組研究對象一般資料及生化指標(biāo)比較 三組研究對象hs-CRP 和Hcy 比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），IPF 組血清hs-CRP 和Hcy 表達(dá)水平明顯高于對照組和nIPF-IIP 組（P＜0.05），nIPF-IIP 組血清hs-CRP 和Hcy 表達(dá)水平明顯高于對照組（P＜0.05）；性別、年齡、病程、吸煙、TG、TC、HDL-C、LDLC 等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性，見表1。

表1 三組研究對象一般資料及生化指標(biāo)比較

3.2 三組研究對象血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)水平比較 nIPF-IIP 組血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)水平明顯高于對照組，IPF 組血清CTGF 和PDGFBB 表達(dá)水平明顯高于對照組與nIPF-IIP 組（P＜0.05）。見表2。

表2 三組研究對象血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)比較（）

表2 三組研究對象血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)比較（）

注：IPF 組為特發(fā)性肺纖維化患者；nIPF-IIP 組為除特發(fā)性肺纖維化外的其他類型的特發(fā)性間質(zhì)性肺炎患者；對照組為健康體檢者；CTGF 為結(jié)締組織生長因子；PDGF-BB 為血小板衍生生長因子-BB；與對照組比較，aP＜0.05；與nIPF-IIP 組比較，bP＜0.05

3.3 血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)診斷IIP 的ROC曲線分析 由SPSS 24.0 統(tǒng)計軟件作ROC 曲線，并根據(jù)約登指數(shù)計算出兩組間的敏感度和特異度。結(jié)果顯示，血清CTGF 表達(dá)對于鑒別IPF 組和nIPF-IIP組以及nIPF-IIP 組和對照組的敏感度和特異度均較高，兩組間界限值分別為14.25ng/mL、5.18ng/mL；血清PDGF-BB 表達(dá)鑒別IPF 組和nIPF-IIP 組以及nIPF-IIP 組和對照組的敏感度和特異度均較高，兩組間界限值分別為59.43pg/mL、25.67pg/mL。14.25ng/mL、5.18ng/mL 為血清CTGF 判別IPF 組和nIPF-IIP 組、nIPF -IIP 組和對照組的標(biāo)準(zhǔn)值，59.43pg/mL、25.67pg/mL 為血清PDGF-BB 判別IPF 組和nIPF-IIP 組、nIPF-IIP 組和對照組的標(biāo)準(zhǔn)值。見表3。

3.4 老年特發(fā)性間質(zhì)性肺炎肺纖維化影響因素Logistic 回歸分析 以老年IIP 有無肺纖維化為因變量（否＝0、是＝1），以血清hs-CRP、Hcy、CTGF、PDGF-BB等作為自變量（連續(xù)變量形式進(jìn)入分析）進(jìn)行二分類Logistic 逐步回歸分析可知，患者血清hs-CRP、Hcy、CTGF、PDGF-BB 升高是老年IIP 患者肺纖維化的危險因素（P＜0.05），見表4。

表3 血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)診斷IIP 的ROC 曲線分析

表4 老年特發(fā)性間質(zhì)性肺炎肺纖維化影響因素Logistic回歸分析

4 討論

IIP 疾病譜病因龐雜、分類混亂，診斷與鑒別診斷復(fù)雜，治療非常棘手[8]。多種因素產(chǎn)生的肺損害均可導(dǎo)致肺纖維化的發(fā)生（包括毒性物質(zhì)、自身免疫性疾病、藥物、感染和創(chuàng)傷等），眾多因素所導(dǎo)致的肺部組織病理學(xué)表現(xiàn)各不相同，但均有不同程度的炎癥和纖維化[9]。CTGF 是一種在多種纖維增殖性疾病中起關(guān)鍵作用的細(xì)胞因子，具有促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖以及參與細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生、積聚等功能，對肺纖維的分化增殖具有很強的調(diào)控作用，在病理狀態(tài)下，CTGF 的過度表達(dá)與某些增生性或纖維化性疾病的發(fā)生密切相關(guān)[10-11]。PDGF-BB 是已知最強的促肺纖維化增殖、分化的細(xì)胞因子，隨著肺纖維化程度的加重，PDGF 表達(dá)逐漸增強，可通過轉(zhuǎn)化生長因子（TGF-β）介導(dǎo)作用于結(jié)締組織，對肺纖維化起維持性作用[12-13]。

本研究發(fā)現(xiàn)，IPF 組血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)水平高于對照組和nIPF-IIP 組，且nIPF-IIP 組血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)水平明顯高于對照組；本研究多因素回歸分析也發(fā)現(xiàn)，血清CTGF、PDGF-BB升高是老年IIP 患者肺纖維化的危險因素。這表明血清CTGF 和PDGF-BB 表達(dá)對肺纖維化的血清學(xué)診斷有重要意義。既往研究發(fā)現(xiàn)，血清CTGF 啟動子中存在Smads 結(jié)合元件，該元件突變后，既可以減少CTGF 的基礎(chǔ)表達(dá)，又可消除TGF-β 誘導(dǎo)的CTGF表達(dá)[14]。IIP 患者的血清CTGF 可提供肺纖維化發(fā)生發(fā)展的信息，并反映血清TGF-β 的生物活性[15-17]。說明血清CTGF 和PDGF-BB 在IIP 的發(fā)生發(fā)展中起到重要作用。本研究ROC 結(jié)果顯示，血清CTGF 表達(dá)對于鑒別IPF 組和nIPF-IIP 組以及對照組和nIPFIIP 組的敏感度和特異度分別為（82.37%、85.54%，84.25%、85.31%），而血清PDGF-BB 表達(dá)鑒別IPF 組和nIPF-IIP 組以及nIPF-IIP 組和對照組的敏感度和特異度分別為（80.56%、87.73%，81.27%、86.52%），由此說明可將CTGF 和PDGF-BB 作為無創(chuàng)評估肺纖維化程度的標(biāo)記物，聯(lián)合檢測CTGF、PDGF-BB 多種肺纖維化相關(guān)血清指標(biāo)有助于提高血清學(xué)肺纖維化診斷的靈敏度及特異度，早期診斷與動態(tài)監(jiān)測肺纖維化對于IIP 的治療、改善預(yù)后具有重要意義。目前對于CTGF、PDGF-BB 在肺纖維化診斷IIP 中的作用報道不多，有待于我們進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清CTGF 和PDGF-BB 在老年IIP患者中表達(dá)升高，二者聯(lián)合檢測能提高診斷準(zhǔn)確性，同時二者表達(dá)升高可以作為預(yù)測老年IIP 肺纖維化發(fā)生風(fēng)險的標(biāo)志物。