芮懷瑾,劉郁,白云,聶錦濤,潘晶晶,丁雪兒
(1.徐州工業(yè)職業(yè)技術(shù)學(xué)院化學(xué)工程學(xué)院,江蘇徐州221140;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省肉類(lèi)生產(chǎn)與加工質(zhì)量安全控制協(xié)同創(chuàng)新中心,江蘇南京210095)
玉米須(Stigma maydis)是禾本科作物玉米的干燥花柱和柱頭,是我國(guó)傳統(tǒng)中藥材,具有利尿、消腫、降壓、止血等功效。玉米在我國(guó)各地均有種植,產(chǎn)量極高,2019年全國(guó)玉米產(chǎn)量達(dá)到26 077萬(wàn)噸,其中玉米須占玉米產(chǎn)量的5%。玉米須中含有多種生物活性成分,如黃酮類(lèi)、多糖類(lèi)、氨基酸類(lèi)、揮發(fā)性成分、有機(jī)酸、生物堿等,其藥用價(jià)值和保健功能較高[1]。Deng等發(fā)現(xiàn),玉米須多糖可以有效降低高血脂癥小鼠體內(nèi)總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白膽固醇的含量[2];宋有洪等從玉米須的生物活性成分和藥理保健功能進(jìn)行綜合論述,闡明玉米須應(yīng)用前景廣闊,應(yīng)加大其高附加值研發(fā)力度[3]。
牛蒡(Arctium lappa Linn)為菊科牛蒡?qū)僦参铮幨惩?,含有菊糖、綠原酸、咖啡酸、蘆丁、槲皮素、槲皮苷等多種功能性成分[4-5],具有降血脂、降血糖、降血壓、消炎、防癌等功效[6-8]。已有部分研究者利用牛蒡的保健功能進(jìn)行了產(chǎn)品研制,如牛蒡茶、牛蒡酸奶、牛蒡飲料等,并不斷有新的產(chǎn)品被開(kāi)發(fā)研究,未來(lái)市場(chǎng)發(fā)展趨勢(shì)良好[9-11]。
植物復(fù)合飲料常會(huì)因果膠及蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)而出現(xiàn)渾濁、產(chǎn)生沉淀的現(xiàn)象。為解決這類(lèi)問(wèn)題,生產(chǎn)過(guò)程中一般添加果膠酶或纖維素酶進(jìn)行過(guò)濾澄清處理,以改善飲料的穩(wěn)定性[12-13]。但這類(lèi)游離酶制劑存在難回收、易失活、成本高的問(wèn)題,而固定化酶因可以反復(fù)使用、穩(wěn)定性高逐漸受到關(guān)注[14-15]。
目前,對(duì)以玉米須和牛蒡?yàn)樵系漠a(chǎn)品研發(fā)類(lèi)型較多,但將兩者復(fù)合研究尚屬空白,且原料浸提液的制備多以感官評(píng)價(jià)為指標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)單一,沒(méi)有考慮兩者包含的生物活性成分的提取效果。有研究證明,玉米須和牛蒡含有大量黃酮,抗氧化活性較高,應(yīng)用價(jià)值較高[16-17]。本試驗(yàn)以玉米須和牛蒡?yàn)樵?,以黃酮含量為浸提液制備條件選擇依據(jù)研制復(fù)合飲料。以殼聚糖固定化復(fù)合酶為澄清劑,研究其在玉米須牛蒡復(fù)合飲料中的澄清效果,評(píng)價(jià)其多次使用操作穩(wěn)定性。通過(guò)降低產(chǎn)品生產(chǎn)成本,加快玉米須和牛蒡加工產(chǎn)業(yè)鏈的升級(jí),充分利用產(chǎn)量?jī)?yōu)勢(shì),推動(dòng)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。
牛蒡干:市售;成熟玉米須:徐州市區(qū)菜場(chǎng),清洗、晾干,粉碎,過(guò)40目篩。
維生素C、檸檬酸、白砂糖均為食品級(jí):浙江一諾生物科技有限公司;果膠酶(酶活20 U/mg)、纖維素酶(酶活50 U/mg)、殼聚糖(分析純)、DPPH(分析純)、蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%)、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(純度≥98%):美國(guó)Sigma公司;亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙醇、硫酸、蒽酮等(均為分析純):南京化學(xué)試劑有限公司。
FA1004電子天平:常熟市百靈天平儀器有限公司;JYL-C012九陽(yáng)料理機(jī):九陽(yáng)股份有限公司;UV-7504紫外可見(jiàn)分光光度計(jì):上海欣茂儀器有限公司;HH型恒溫水浴鍋:江蘇金壇鐘大儀器廠。
1.2.1 殼聚糖固定化復(fù)合酶的制備
參考頡向紅等的方法,并做適當(dāng)修改[15,18]。取1 g殼聚糖溶解于100 mL 1%冰醋酸溶液中,攪拌均勻,用注射器滴入10%氫氧化鈉-乙醇溶液,加入少許5%戊二醛,得到殼聚糖微球。按復(fù)合酶(纖維素酶與果膠酶質(zhì)量比為1∶2)∶殼聚糖質(zhì)量比為1∶10的比例混合,在80 r/min轉(zhuǎn)速下振蕩1 h,4℃條件下固定6 h,用蒸餾水清洗過(guò)濾,即得到殼聚糖固定化復(fù)合酶。
1.2.2 黃酮含量的測(cè)定
參考方敏等的方法,并作適當(dāng)修改[19]。準(zhǔn)確稱(chēng)取20 mg干燥至恒重的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品,用95%乙醇溶解,并定容到50 mL,充分混勻后得到0.4 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取 0.0、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、12.0 mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL容量瓶中,加入95%乙醇溶液12 mL,5%亞硝酸鈉溶液2 mL,混勻后靜置6 min,加入10%硝酸鋁溶液2 mL,混勻、靜置6 min,加入10%氫氧化鈉溶液20 mL,定容至50 mL。靜置15 min后,以空白試劑做參比,在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取適當(dāng)量的樣液按上述方法操作,于510 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,計(jì)算樣液中黃酮含量。
1.2.3 多糖含量的測(cè)定
參考惠秋沙的方法,并作適當(dāng)修改[20]。準(zhǔn)確稱(chēng)取100 mg干燥至恒重的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品,蒸餾水溶解并定容至100 mL,充分混勻后得到1.00 mg/mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別吸取 0.0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mL 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液置于25 mL容量瓶中。加硫酸蒽酮溶液定容至刻度線。沸水浴15 min,冷卻后于625 nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo),葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取適量玉米須復(fù)合飲料溶液,置離心管中3 000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min,精密量取10 mL,加入無(wú)水乙醇40 mL,靜置過(guò)夜。抽濾,按順序加入無(wú)水乙醇、丙酮、乙醚洗滌沉淀。將帶粗多糖的濾紙于烘箱中烘干后置于60 mL熱水中溶解趁熱抽濾。濾液用蒸餾水定容至100 mL,搖勻。按照測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法操作測(cè)定625 nm波長(zhǎng)處其吸光度,計(jì)算飲料中多糖含量。
1.2.4飲料工藝流程
1.2.5 主要工藝要點(diǎn)
1.2.5.1 玉米須浸提液的制備
1)單因素試驗(yàn)
稱(chēng)取粉碎后的玉米須10 g,以水做提取劑,按照1.2.2測(cè)定浸提液中黃酮的吸光度,以吸光度表示黃酮含量,并以其為指標(biāo),進(jìn)行單因素試驗(yàn),考察的因素水平為料液比 1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50、1 ∶60(g/mL),浸提時(shí)間 40、50、60、70、80 min,浸提溫度 50、60、70、80、90 ℃,pH 值 6、6.5、7、7.5、8。
2)正交試驗(yàn)
通過(guò)單因素試驗(yàn)獲得各因素水平,設(shè)計(jì)四因素三水平正交試驗(yàn)確定玉米須浸提液最佳制備條件,因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。
表1 玉米須浸提條件正交試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factor and level of orthogonal experiment of extracting conditions for corn silk
1.2.5.2 牛蒡浸提液的制備
1)單因素試驗(yàn)
稱(chēng)取粉碎后的牛蒡10 g,以水做提取劑,按照1.2.2測(cè)定浸提液中黃酮的吸光度,以吸光度表示黃酮含量,并以其為指標(biāo),進(jìn)行單因素試驗(yàn),考察的因素水平為料液比 1 ∶20、1 ∶30、1 ∶40、1 ∶50、1 ∶60(g/mL),浸提時(shí)間 30、40、50、60、70 min,浸提溫度 50、60、70、80、90 ℃,pH 值 6、6.5、7、7.5、8。
2)正交試驗(yàn)
經(jīng)過(guò)單因素試驗(yàn)獲得各因素水平,設(shè)計(jì)四因素三水平正交試驗(yàn)確定牛蒡浸提液最佳制備條件,因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表2。
1.2.5.3 飲料的配制
1)單因素試驗(yàn)
以感官評(píng)分為指標(biāo),進(jìn)行單因素試驗(yàn),考察牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比 2 ∶8、3 ∶7、4 ∶6、5 ∶5、6∶4,檸檬酸添加量 0.06%、0.08%、0.1%、0.12%、0.14%,白砂糖添加量 2%、4%、6%、8%、10%,殼聚糖固定化復(fù)合酶添加量0.4%、1.2%、2.0%、2.8%、3.6%對(duì)飲料感官品質(zhì)的影響。
表2 牛蒡浸提條件正交試驗(yàn)因素水平表Table 2 Factor and level of orthogonal experiment of extracting conditions for burdock
2)正交試驗(yàn)
經(jīng)過(guò)單因素試驗(yàn)獲得各因素水平,設(shè)計(jì)四因素三水平正交試驗(yàn)玉米須牛蒡飲料的最佳配方,因素水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表3。
表3 飲料工藝正交試驗(yàn)因素水平表Table 3 Factor and level of orthogonal experiment of beverage processing
1.2.6 感官評(píng)定
參照寧楚潔等和徐輝對(duì)玉米須飲料和牛蒡飲料感官評(píng)價(jià)體系的建立,做適當(dāng)修改[11,21]。選20名專(zhuān)業(yè)的感官鑒評(píng)人員(10男10女),鑒評(píng)人員利用其視覺(jué)、嗅覺(jué)、味覺(jué)逐一評(píng)價(jià)飲料的色澤、組織狀態(tài)、氣味、風(fēng)味,進(jìn)行綜合評(píng)分,并去掉最高值與最低值取其平均值。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表4。
表4 飲料感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Table 4 Standard of sensory evaluation of beverage
續(xù)表4 飲料感官評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)Continue table 4 Standard of sensory evaluation of beverage
圖1 料液比、浸提時(shí)間、浸提溫度、pH值對(duì)玉米須浸提液黃酮含量的影響Fig.1 Effects of liquid-solid ratio,extraction time,extraction temperature,and pH value on flavonoids content in corn silk extract solution
1.2.7 飲料澄清度的測(cè)定
取最適添加量的殼聚糖固定化復(fù)合酶于復(fù)合飲料中,連續(xù)澄清操作,反復(fù)使用10次,每次使用后用蒸餾水反復(fù)清洗殼聚糖固定化復(fù)合酶,分別測(cè)定復(fù)合飲料在900 nm波長(zhǎng)下的透光率,以此表示復(fù)合飲料的澄清度[14-15]。
1.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
每個(gè)試驗(yàn)均做3次。試驗(yàn)數(shù)據(jù)利用Origin10.0系統(tǒng)計(jì)算方差,差異由Duncan’s多重比較法獲得,5%為顯著水平。
2.1.1 玉米須浸提液制備條件的單因素試驗(yàn)
玉米須浸提液制備條件的單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖1。
玉米須浸提液中的黃酮含量在制備過(guò)程中受諸多因素影響。由圖1(A)可以看出,玉米須浸提液吸光度隨著料液比的變化而不斷提高。當(dāng)料液比達(dá)到1∶50(g/mL)時(shí)吸光度最高,之后有所下降,但未形成顯著差異(P>0.05),因此為節(jié)約提取劑用量,選擇最適料液比為 1 ∶50(g/mL)。由圖 1(B)可以看出,隨著浸提時(shí)間的延長(zhǎng),玉米須浸提液吸光度不斷升高。浸提時(shí)間為70 min時(shí),吸光度浸提逐漸趨于平衡,浸提80 min時(shí),吸光度未見(jiàn)顯著增加(P>0.05),因此為節(jié)省工藝時(shí)間,選擇最適浸提時(shí)間為70 min。由圖1(C)可以看出,隨著浸提溫度的升高,玉米須浸提液吸光度逐漸升高,當(dāng)溫度達(dá)到70℃后,吸光度無(wú)顯著變化(P>0.05)。因此為減少能源消耗,選擇最適浸提溫度為70℃。由圖1(D)可以看出,浸提液pH值為7.0時(shí)吸光度顯著高于其他處理組(P<0.05),pH值可能影響黃酮類(lèi)化合物的極性,影響其在水中的溶解性,因此選擇最適浸提pH值為7.0。
2.1.2 玉米須浸提液制備條件的正交試驗(yàn)結(jié)果
正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表5。
由表5可知,通過(guò)極差(R)結(jié)果分析4個(gè)因素影響玉米須浸提液吸光度的大小順序?yàn)椋毫弦罕龋緋H值>浸提時(shí)間>浸提溫度。通過(guò)直觀分析得出玉米須浸提液最佳制備條件為A2B3C3D2,另外9組試驗(yàn)中直接得到的最優(yōu)組合為A1B3C3D3。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明,A2B3C3D2工藝浸提液的吸光度為0.769,顯著高于A1B3C3D3的吸光度 0.718(P<0.05),最終確定玉米須浸提液最佳制備條件為:料液比1∶50(g/mL),浸提時(shí)間80 min,浸提溫度80℃,pH 7.0。
表5 玉米須浸提條件正交試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Results of orthogonal experiment of extracting conditions for corn silk
2.2.1 牛蒡浸提液制備條件的單因素試驗(yàn)結(jié)果
牛蒡浸提液制備條件的單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖2。
圖2 料液比、浸提時(shí)間、浸提溫度、pH值對(duì)牛蒡浸提液黃酮含量的影響Fig.2 Effects of liquid-solid ratio,extraction time,extraction temperature,and pH value on flavonoids content in burdock extract solution
由圖2可以看出,在以水為提取劑進(jìn)行牛蒡浸提液的制備過(guò)程中,料液比對(duì)吸光度影響較大,料液比為1∶40(g/mL)時(shí)浸提液吸光度顯著高于其他處理組(P<0.05),故選擇最適料液比為 1 ∶40(g/mL)。隨著牛蒡浸提時(shí)間的延長(zhǎng),吸光度不斷升高,當(dāng)浸提時(shí)間到達(dá)60 min后,牛蒡黃酮浸提逐漸趨于平衡,與浸提70 min的吸光度未見(jiàn)顯著差異(P>0.05)。與玉米須黃酮類(lèi)似,牛蒡黃酮類(lèi)化合物均為生物活性物質(zhì),高溫條件下浸提時(shí)間過(guò)長(zhǎng)容易導(dǎo)致活性降低,同時(shí)為節(jié)約工藝時(shí)間,故選擇最適浸提時(shí)間為60 min。隨著浸提溫度的升高,浸提液吸光度逐漸升高,當(dāng)溫度到達(dá)70℃后,黃酮浸提效果未見(jiàn)顯著提高(P>0.05),當(dāng)溫度升高至90℃后,黃酮類(lèi)化合物可能由于失活、分解,吸光度下降,故選擇最適浸提溫度為70℃。浸提液pH值對(duì)牛蒡中黃酮的浸提效果影響幅度變化較大,這可能與玉米須浸提液pH值的影響原理一樣,即浸提液的pH值影響黃酮的極性。當(dāng)浸提液pH值為7.0時(shí),吸光度最高,故選擇最適pH值為7.0。
2.2.2 牛蒡浸提液制備條件的正交試驗(yàn)結(jié)果
正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表6。
由表6可以看出,通過(guò)極差(R)結(jié)果分析影響牛蒡浸提液的吸光度大小順序?yàn)椋毫弦罕龋窘釙r(shí)間>pH值>浸提溫度。9組試驗(yàn)中直接找出的最優(yōu)制備條件組合為試驗(yàn)號(hào)9,即A3B3C2D1,而直觀分析得出的最佳制備條件為A3B3C1D1。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表明,直觀分析的最佳組合A3B3C1D1得到的牛蒡浸提液的吸光度為0.782,A3B3C2D1的吸光度為0.709,兩者形成顯著差異(P<0.05)。因此,牛蒡浸提液最佳制備條件為:料液比1 ∶50(g/mL),浸提時(shí)間 70 min,浸提溫度 60 ℃,pH 6.5。
表6 牛蒡浸提條件正交試驗(yàn)結(jié)果Table 6 Results of orthogonal experiment of extracting conditions for burdock
2.3.1 玉米須牛蒡復(fù)合飲料制備工藝的單因素試驗(yàn)結(jié)果
玉米須牛蒡復(fù)合飲料制備工藝的單因素試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖3。因殼聚糖固定化復(fù)合酶對(duì)飲料感官品質(zhì)的影響不顯著,本文未分析該因素的影響結(jié)果。
圖3 牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比、檸檬酸添加量、白砂糖添加量對(duì)飲料感官品質(zhì)的影響Fig.3 Effects of compound of juice of burdock and corn silk,citric acid amount and sugar amount on sensory quality of beverage
由圖3(A)可知,牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比對(duì)飲料感官評(píng)分的影響隨著體積比的變化而改變。體積比為2∶8時(shí),玉米須味道過(guò)重,顏色較淺;體積比為6∶4時(shí),牛蒡味過(guò)重,味道較苦,顏色過(guò)深,風(fēng)味均不佳,感官評(píng)分低,都不受歡迎。體積比為4∶6時(shí),牛蒡與玉米須的味道和諧,色澤鮮亮,感官評(píng)分顯著高于其他處理組(P<0.05),故選擇最適牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比為 4 ∶6。由圖 3(B)、(C)可知,檸檬酸和白砂糖的添加量不適當(dāng)使得飲料的糖酸比不佳,會(huì)影響飲料風(fēng)味,即味道過(guò)淡、過(guò)甜或過(guò)酸,均不受歡迎,感官評(píng)分較低。檸檬酸添加量0.10%的感官評(píng)分顯著高于其他處理組(P<0.05),白砂糖添加量8%的感官評(píng)分顯著高于其他處理組(P<0.05),故選擇最適檸檬酸添加量為0.10%,最適白砂糖添加量為8%。
2.3.2 玉米須牛蒡復(fù)合飲料制備工藝的正交試驗(yàn)結(jié)果正交試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表7。
表7 飲料工藝正交試驗(yàn)結(jié)果Table 7 Results of orthogonal experiment of beverage processing
由表7可知,通過(guò)極差(R)結(jié)果判斷出影響飲料感官品質(zhì)的大小順序?yàn)椋号]蚪嵋汉陀衩醉毥嵋后w積比>檸檬酸添加量>白砂糖添加量>殼聚糖固定化復(fù)合酶添加量。其中復(fù)合酶作為改善加工工藝、提高產(chǎn)品澄清度進(jìn)行使用,不能影響產(chǎn)品風(fēng)味,該特點(diǎn)通過(guò)極差結(jié)果得到證明。通過(guò)直觀分析得出復(fù)合飲料的最佳制備工藝為A1B2C2D2或A1B2C2D3,與9組試驗(yàn)中直接找出的最優(yōu)組合試驗(yàn)號(hào)2,即A1B2C2D2重合。因此,確定玉米須牛蒡復(fù)合飲料的最佳制備工藝為:牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比3∶7,檸檬酸添加量0.10%,白砂糖添加量8%,殼聚糖固定化復(fù)合酶添加量2.8%。
2.4.1 飲料黃酮含量的測(cè)定結(jié)果
蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖4。
圖4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.4 Standard curve of rutin standard
如圖4所示,蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為y=0.009 5x+0.000 1,R2=0.999 5。將最佳制備工藝得到的復(fù)合飲料中黃酮吸光度帶入方程,計(jì)算得到飲料中黃酮含量為0.306 mg/mL。
2.4.2 飲料多糖含量的測(cè)定結(jié)果
葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖5。
圖5 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.5 Standard curve of glucose standard
如圖5所示,葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程為y=0.050 2x-0.003 2,R2=0.999 5。將最佳制備工藝得到的復(fù)合飲料中多糖吸光度帶入方程,計(jì)算得到飲料中多糖含量為0.661 mg/mL。
最佳制備工藝得到的飲料在不同澄清次數(shù)下的透光率,結(jié)果見(jiàn)圖6。
圖6 殼聚糖固定化復(fù)合酶澄清玉米須牛蒡復(fù)合飲料的操作穩(wěn)定性Fig.6 Stability of chitosan immobilized complex enzyme on clarification of corn silk and burdock compound beverage
隨著澄清次數(shù)的增加,透光率逐漸下降,該結(jié)果與林建城和秦珂等結(jié)果類(lèi)似,酶反復(fù)作用于不同原料,可能均會(huì)因?yàn)槊副旧聿糠质Щ罨蚧厥論p失使得澄清效果降低[14,22]。澄清操作8次后,透光率下降至78.3%,肉眼觀察無(wú)明顯變化,外觀可接受,說(shuō)明固定化酶具有較好的操作穩(wěn)定性,若應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐,可直接降低飲料生產(chǎn)成本。
通過(guò)單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),以吸光度表示黃酮含量,并以其為指標(biāo),確定了以水為提取劑的玉米須浸提液和牛蒡浸提液的最佳制備條件。玉米須浸提液最佳制備條件為料液比1∶50(g/mL),浸提時(shí)間80 min,浸提溫度80℃,pH 7.0;牛蒡浸提液最佳制備條件為料液比 1∶50(g/mL),浸提時(shí)間 70 min,浸提溫度60℃,pH 6.5。同樣利用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),以感官評(píng)分為指標(biāo),確定了玉米須牛蒡復(fù)合飲料的最佳工藝配方,即牛蒡浸提液和玉米須浸提液體積比3∶7,檸檬酸添加量0.10%,白砂糖添加量8%,殼聚糖固定化復(fù)合酶添加量2.8%,對(duì)復(fù)合飲料的感官品質(zhì)的影響順序?yàn)榕]蚪嵋汉陀衩醉毥嵋后w積比>檸檬酸添加量>白砂糖添加量>殼聚糖固定化復(fù)合酶添加量。最佳工藝條件下得到的復(fù)合飲料中的黃酮含量為0.306 mg/mL,多糖含量為0.661 mg/mL。殼聚糖固定化復(fù)合酶對(duì)飲料感官品質(zhì)無(wú)顯著影響,并起到較好的澄清效果,且可以反復(fù)使用,操作穩(wěn)定性較好,在實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中可降低飲料加工成本,具有較好的應(yīng)用前景。