高效液相色譜法檢測食品中的甲醛含量

□ 曹 萍 趙 娜 馮博洪 青島譜尼測試有限公司

甲醛是一種有機(jī)化學(xué)物，化學(xué)式是CH2O，會刺激人體的眼、鼻等部位，常作為化工原料使用[1]。甲醛具有良好的抑菌作用，一些不法商家將其用于食品加工進(jìn)行防腐，人體攝入后會引起嘔吐、腹痛，嚴(yán)重者昏厥死亡，被WHO 組織列入一類致癌物清單[2—3]。文章分析了HPLC 法檢測食品中甲醛含量的應(yīng)用效果，以期為食品安全管理工作提供支持。

1 材料和方法

1.1 材料

本研究材料是從市場上隨機(jī)購買的某品牌肉類零食。

1.2 儀器

使用儀器主要有HPLC儀、電子秤、恒溫水浴鍋，離心機(jī)、組織搗碎機(jī)與Welch XB—C18色譜柱等。使用的試劑有100 μg/mL 的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，甲醇，乙腈，2，4—二硝基苯肼，純化水等。

1.3 制備樣品溶液

使用組織搗碎機(jī)將樣品磨碎，在電子秤上精準(zhǔn)稱量2 g，將其放置在50 mL 離心管中。向離心管內(nèi)加入磷酸鹽緩沖溶液和2，4—二硝基苯肼—乙腈溶液（兩者比例為1 ∶1），震蕩離心管促使均勻混合。置于恒溫水浴鍋內(nèi)，在60 ℃條件下反應(yīng)60 min，結(jié)束后將其取出，自然冷卻至室溫。最后使用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速為2 000 r/min，持續(xù)時間10 min，取上層清液在濾紙上過濾，上機(jī)檢測。

1.4 制備標(biāo)準(zhǔn)溶液

使用50 mL 離心管，加入不同體積數(shù)的甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，再加入磷酸鹽緩沖溶液和2，4—二硝基苯肼—乙腈溶液（兩者比例為1 ∶1）至20 mL，混合均勻后配置成濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別是0、0.1、0.5、1.0、2.0 μg/mL與3.0 μg/mL。置于恒溫水浴鍋內(nèi)，在60 ℃條件下反應(yīng)60 min，結(jié)束后將其取出，自然冷卻至室溫。使用離心機(jī)進(jìn)行離心處理，取上層清液在濾紙上過濾，上機(jī)檢測。

1.5 色譜條件

色 譜 柱 是Welch XB—C18，5 μm×4.6 mm×250 mm，流動相是乙腈—水（體積比為7 ∶3），流速為0.6 mL/min。反應(yīng)溫度為37 ℃，檢測波長設(shè)置為355 nm，進(jìn)樣量為10 μL，采用等度洗脫。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性回歸方程

繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，可見在0～3.0 μg/mL范圍內(nèi)，具有良好的線性關(guān)系。以溶液濃度為x 軸，以峰面積為y 軸，計算回歸方程是：y=430 320x—2 325.6；相關(guān)系數(shù)r 為0.999 6，經(jīng)實(shí)驗(yàn)測定，最低檢出限為0.08 mg/kg。

2.2 精密度

配置樣品溶液濃度為2.0 μg/mL，按照1.5 的條件依次進(jìn)樣重復(fù)3 次，得到3 個峰面積值，計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD），評價測定方法的精密度，見表1。結(jié)果顯示：3 次進(jìn)樣的峰面積均值為858 362.4，RSD 值為0.008 4%＜1，說明該測定方法的精密度較高。

表1 3 次進(jìn)樣測定結(jié)果的精密度統(tǒng)計表

2.3 回收率

在磨碎的組織樣品中，分別加入2、10、40 mL 甲醛標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照1.5 的條件依次進(jìn)樣，每個重復(fù)3 次， 計算加標(biāo)回收率和RSD值，見表2。結(jié)果顯示：平均回收率 在90.71% ～94.40%，RSD 值 在0.98%～4.31%，說明回收率良好。

表2 加標(biāo)回收率統(tǒng)計表

2.4 甲醛測定結(jié)果

采用HPLC 法檢測9 個食品樣本的甲醛含量，包括生鮮豬肉、熏肉、臘肉等，共檢出2 個陽性樣本，含量分別是0.08 mg/kg 和30.15 mg/kg。

3 結(jié)論

甲醛是一種致癌物質(zhì)，用于食品加工會危害人體安全[3]。本研究采用HPLC 法檢測食品中的甲醛含量，結(jié)果顯示最低檢出限是0.08 mg/kg，精密度和回收率良好，滿足檢測要求。