食品中低聚果糖的高效液相色譜檢測(cè)法研究

□ 馮博洪 曹 萍 趙 娜 青島譜尼測(cè)試有限公司

在食品生產(chǎn)領(lǐng)域，低聚果糖（FOS）成為一種新型甜味劑，在乳制品、糖果、飲料中廣泛應(yīng)用。檢測(cè)食品中FOS 的含量，對(duì)于控制食品質(zhì)量具有重要意義。

1 材料和方法

1.1 材料來源

本研究材料是從市場(chǎng)上購買得到的某品牌奶粉和米粉。

1.2 儀器試劑

儀器主要有：HPLC 儀，蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，NH2色譜柱，離心機(jī)，超聲波清洗器、電子天平等。試劑主要有：GF2 標(biāo)品、GF3 標(biāo)品、GF4 標(biāo)品，乙腈，石油醚，乙酸鋅與六氰合亞鐵酸鉀等。

1.3 溶液配制

配制FOS 標(biāo)準(zhǔn)溶液：取3 個(gè)10 mL容量瓶，分別精準(zhǔn)稱量GF2、GF3、GF4 標(biāo)品各200 g，將標(biāo)品置于瓶?jī)?nèi)，加入超純水直至刻度線，然后將其液稀釋到不同濃度，分別是0.5、5、50 mg/mL，然后超聲處理，時(shí)間為3 min，經(jīng)0.5 μm 的濾膜過濾。再取等量配好的標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于容量瓶中，加入超純水直至刻度線，重復(fù)超聲、過濾的處理步驟，待檢。

1.4 樣品預(yù)處理

脫脂。取2 個(gè)100 mL 燒杯，精準(zhǔn)稱量奶粉、米粉各3.0 g，將其置于燒杯內(nèi)，放在通風(fēng)櫥中；先加入50 mL石油醚，進(jìn)行超聲處理，時(shí)間為20 min再離心處理，轉(zhuǎn)速為4 800 r/min、時(shí)間5 min；最后去除上層清液，留下沉渣在通風(fēng)櫥內(nèi)揮發(fā)，于60 ℃下干燥，研磨為粉末狀待檢。

提取。取樣本粉末2.0 g，加入20 mL 蒸餾水，先進(jìn)行超聲提取，溫度為60 ℃，時(shí)間15 min；再離心處理，轉(zhuǎn)速為8 000 r/min，時(shí)間為5 min；取上層清液置于25 mL 容量瓶?jī)?nèi)。

脫蛋白。采用亞鐵氰化鉀—乙酸鋅法，對(duì)樣品溶液進(jìn)行脫蛋白處理，然后離心，轉(zhuǎn)速為8 000 r/min、時(shí)間5 min；取上層清液置于25 mL 容量瓶?jī)?nèi)，加入蒸餾水定容。

1.5 HPLC 色譜條件

色譜柱是NH2分析柱，4.6 mm×300 mm，5 μm。使用乙腈和水作為流動(dòng)相，實(shí)施梯度洗脫，洗脫程序是：①前20 min，70%～65%的乙腈，30% ～35% 的 水； ②第20 ～22 min，65% 的 乙 腈，35% 的 水；③第22 ～25 min，65% ～70% 的乙腈，35%～30%的水；④第25 ～28 min，70%的乙腈，30%的水。氣體壓力恒定為0.5 MPa，漂移管的溫度為85 ℃，載氣流速為2.0 L/min。

2 結(jié)果和分析

2.1 回歸方程

標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，根據(jù)溶液濃度和峰面積，計(jì)算回歸方程。其中，GF2 是y=1.271x+5.387，R2值=0.999 6， 定量范圍是0.67 ～14.0 mg/mL；GF3是y=1.339x+5.337，R2值=0.999 7，定量范圍是0.67 ～14.0 mg/mL；GF4 是y=1.250x+5.361，R2值=0.999 8，定量范圍是1 ～20 mg/mL?？?見，F(xiàn)OS 的 檢 測(cè) 范 圍 是0.67 ～14.0 mg/mL，線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均＞99.9%，標(biāo)準(zhǔn)曲線的可信度高。

2.2 色譜圖

按照色譜條件進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)加標(biāo)圖譜的保留時(shí)間，確定FOS 組分。對(duì)色譜圖（圖1、圖2）分析，可見食品樣本經(jīng)超聲處理、梯度洗脫后，F(xiàn)OS的分離度高、基線平穩(wěn)，沒有雜質(zhì)出現(xiàn)。

2.3 含量測(cè)定值

根據(jù)回歸方程，計(jì)算奶粉和米粉中的FOS 含量，見下表1。①從食品樣品來看，米粉中的GF2、GF3、GF4含量均高于奶粉；②從FOS 的組分來看，GF2 含量最高、GF4 含量最低、GF3 居中。

圖1 米粉色譜圖

圖2 奶粉色譜圖

表1 奶粉和米粉中的FOS 含量統(tǒng)計(jì)表

2.4 回收率

奶粉和米粉的樣品溶液各選取3 份，加入定量的FOS 混標(biāo)溶液，檢測(cè)3 次計(jì)算回收率。奶粉的加標(biāo)回收率分別是98.8%、97.1%、95.2%，米粉分別是100%、99.6%、97.3%?？梢姡@兩種樣品的回收率在95.2%～100%，說明HPLC 法的回收率良好。

3 結(jié)論

文章以奶粉和米粉為對(duì)象，采用HPLC 法測(cè)定FOS 含量。結(jié)果顯示：該方法的精密度和回收率高，檢測(cè)過程中沒有雜質(zhì)干擾，是一種可靠的檢測(cè)方法。