中肋骨條藻規(guī)?；囵B(yǎng)及在中國明對蝦育苗中的應用

文/侯仕營 董濟軍 劉朋 劉振華 李錫勇 王磊

本文將養(yǎng)殖生產中發(fā)現(xiàn)的中肋骨條藻分離、保存，并進行室內水泥池規(guī)?；囵B(yǎng)，指數(shù)生長狀態(tài)可維持72h，實現(xiàn)了短期內大量繁殖。中國明對蝦幼體投喂實驗表明，利用4萬個cell/mL中肋骨條藻投喂組與未投喂組比較，Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需時間縮短24h，Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育成活率分別為93.3%、68%，差異顯著。利用中肋骨條藻所育中國明對蝦苗活力強，變態(tài)期成活率高，育苗周期短，具有良好的經濟效益。

中肋骨條藻隸屬硅藻門、中心硅藻綱、圓篩藻目、骨條藻科、骨條藻屬，屬于溫帶、熱帶海洋硅藻類，從北極到赤道、從外海高鹽度到沿海低鹽度水團均有分布。中肋骨條藻富含海產動物幼體生長發(fā)育所需的高度不飽和脂肪酸、必需氨基酸等營養(yǎng)物質，是中國明對蝦、日本囊對蝦、梭子蟹等蝦蟹類育苗初期的優(yōu)質生物餌料，因其繁殖速度快，易于收獲，被廣泛應用。自然環(huán)境中篩選的中肋骨條藻，具備較強的環(huán)境適應能力，經過實驗室純化后，在餌料車間規(guī)?；囵B(yǎng)操作簡單，生長繁殖速度快，不易污染，可在短時間內培養(yǎng)大量藻株，能夠滿足水產動物規(guī)?；缟a需要。

中國明對蝦工廠化育苗，密度高、產量高、效益好，可有效防控疾病，提高育苗成活率，降低養(yǎng)殖成本。同時，工廠化育苗對餌料、水質要求較高，提供適口、足量、營養(yǎng)豐富的餌料已成為中國明對蝦工廠化育苗成功的關鍵因素。

一、藻種來源

2018年4月，乳山市瑞力水產品養(yǎng)殖場室外南美白對蝦養(yǎng)殖池，水溫14℃，鹽度22，pH值8.3，目測池塘水色為淺褐色，鏡檢發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻密度較高。取樣后，在山東省海洋經濟藻類資源開發(fā)與利用工程技術協(xié)同創(chuàng)新中心采用微吸管分離法多次分離培養(yǎng)，得到中肋骨條藻藻株，置于F/2＋Si培養(yǎng)液中，溫度為20℃，鹽度25，光照強度3000lx～6000lx，日光暗比12L:12D，進行不充氣擴大培養(yǎng)，擴大培養(yǎng)的藻種保存于藻種庫。

二、培養(yǎng)池及設施設備

（一）二級培養(yǎng)池

培養(yǎng)車間頂部為透明波紋玻璃鋼瓦，培養(yǎng)池為玻璃鋼育苗池，編號為1號～4號，池規(guī)格為2m×2m×0.8m。

（二）三級培養(yǎng)池

培養(yǎng)車間長度為30m，頂部為透明塑料大棚，設有遮陽網，可根據(jù)需要調節(jié)光照強度。培養(yǎng)池為東西走向水泥池，池號為5號～17號，池規(guī)格為2m×8m×0.8m。

（三）其他設備

渦旋增氧機、沉淀池、砂濾罐、消毒配水池、海水鍋爐、水泵、pH計、分光光度計、顯微鏡等。

三、中肋骨條藻的培養(yǎng)

（一）培養(yǎng)用水處理

自然海區(qū)海水沉淀，二次砂濾，用300目篩絹網過濾，注入消毒配水池備用。

（二）培養(yǎng)池準備

培養(yǎng)池內加入5cm海水，用漂白粉（有效氯含量為30%）80mg/L～100mg/L清洗，并保存消毒10h以上。注入90cm經沉淀過濾的海水，漂白液（有效氯30%）15mg/L消毒，用淀粉碘化鉀檢查余氯，并加入Na2S2O3消除余氯，加入用消毒海水配制的F/2＋Si培養(yǎng)液。

（三）接種

在光線達到5000lx以上時，上午8:00～10:00，用消毒的抽水泵將指數(shù)生長期的中肋骨條藻藻液接種到相應的培養(yǎng)池，培養(yǎng)池水位控制在1m左右，二級、三級培養(yǎng)接種比例為1:20～1:30。

（四）日常管理

1.充氣

利用渦旋增氧機持續(xù)充氣，增氧機功率為2.2kW·h，充氣至微沸騰，延長中肋骨條藻指數(shù)生長期，避免藻體下沉進入衰竭期，防止藻液表面產生菌膜。

2.控光

光照度在1000lx～15000lx時中肋骨條藻均可正常繁殖生長，為配合養(yǎng)殖生產順利開展，在光照度高時要利用遮陽網調節(jié)，從而控制中肋骨條藻繁殖生長速度。

3.控溫

采用保溫、加熱、通風、熱交換器等措施，調節(jié)中肋骨條藻培養(yǎng)溫度，使溫度保持在20℃～24℃。

4.調pH

培養(yǎng)池pH控制在7.5～8.5，鏡檢發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻細胞數(shù)達到200萬個cell/mL以上時，加大充氣量降低pH，當pH值高達9.0以上時，可通過添加30mg/L的醋酸調節(jié)，延長指數(shù)生長期。

5.追加營養(yǎng)鹽

追加營養(yǎng)鹽的主要品種有（NH4）2SO4、K2H2PO4、Na2SiO4、檸檬酸鐵等，比例為N:P:Fe:Si＝10:1:0.1:1，生產過程中根據(jù)培養(yǎng)池內藻體濃度和水體無機鹽剩余量情況添加。

6.中肋骨條藻生長結果

規(guī)模化培養(yǎng)中肋骨條藻生長狀況如圖1所示，指數(shù)生長期可以維持72h，生長速度快，能夠滿足中國明對蝦規(guī)模化育苗生產需要。

（五）收獲

中肋骨條藻繁殖速度快，數(shù)小時內可出現(xiàn)明顯的水色變化，藻體老化，鏡檢可見細胞中空等現(xiàn)象，應在藻體生長旺盛期培養(yǎng)水呈現(xiàn)濃褐色開始收獲投喂使用。生長狀況良好的中肋骨條藻每隔24h收獲1/2，補充過濾海水至淺褐色，加入營養(yǎng)鹽進行連續(xù)培養(yǎng)。

四、中肋骨條藻在中國明對蝦育苗中的應用

（一）無節(jié)幼體期接種

中國明對蝦無節(jié)幼體發(fā)育到II期時接入中肋骨條藻，濃度為3萬～4萬個cell/mL，接種時間一般在上午8:00～10:00。

表1 Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育的成活率

（二）溞狀幼體期投喂

中肋骨條藻作為中國明對蝦育苗餌料，可單獨投喂，也可與其他藻類、蛋黃、豆?jié){、配合飼料等搭配投喂。中國明對蝦溞狀幼體期每天投喂中肋骨條藻量為4萬個cell/mL，Z1期僅投喂中肋骨條藻，Z2期輔助投喂蝦片0.4g/萬尾，Z3期每尾蝦輔助投喂1個～2個鹵蟲無節(jié)幼體或10個～20個輪蟲，分8次投喂。

在育苗池邊用12個50L的塑料桶同步開展育苗試驗，育苗桶內充氣、光照、溫度、水質等條件與育苗池保持一致，每個桶加育苗用水45L，每桶投入健康的中國對蝦Z1期幼體5000尾。1號～3號桶為一組平行試驗，投喂餌料與育苗池保持一致；4號～6號桶為一組平行試驗，投喂中肋骨條藻2萬個cell/mL，其余條件與育苗池保持一致；7號～9號桶為一組平行試驗，投喂中肋骨條藻1萬個cell/mL，其余條件與育苗池保持一致；10號～12號桶為一組平行試驗，Z1期、Z2期投喂蝦片0.5g/萬尾，Z3期每尾蝦投喂15個～20個輪蟲。

（三）幼體生長狀況

1.幼體變態(tài)發(fā)育所需時間

Z1～Z3變態(tài)發(fā)育所需時間，接入中肋骨條藻的1號～9號桶和未接入的10號～12號桶，Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育所需時間均為4天，無顯著差異。Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需時間，1號～6號桶平均2天，7號～9號桶平均2.5天，10號～12號桶平均3天，差異顯著。

2.幼體成活率

Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育的成活率如表1所示。1號～3號桶平均成活率為93.3%，4號～6號桶平均成活率為90.9%，7號～9號桶平均成活率為79.9%，未投喂中肋骨條藻的10號～12號桶平均成活率68%。投喂中肋骨條藻量為4萬個cell/mL的1號～3號桶與未投喂中肋骨條藻的10號～12號桶，平均成活率差異顯著。

五、討論

（一）中肋骨條藻培養(yǎng)

中肋骨條藻規(guī)?；呐囵B(yǎng)受到培養(yǎng)液配方、藻種純化程度、接種密度、培養(yǎng)池水攪動、光照、溫度、pH、營養(yǎng)鹽等多種因素的影響，要確保規(guī)模化培育的成功需要注意以下幾點：藻種純化度要接近100%，才能確保之后培養(yǎng)的純度，提高成功率；接種密度不能過低，確保中肋骨條藻種類的優(yōu)勢生長；光照強度在理化因子中尤為重要，光照強度過低會影響中肋骨條藻的生長，光照強度過高會使藻體短時間內繁殖過剩，導致快速老化，需要配套遮陽網等遮光設備調節(jié)光照度；每天定時鏡檢藻體生長狀況，根據(jù)生長狀況調整管理措施；加強消毒工作，避免交叉生物污染。

（二）中肋骨條藻在中國明對蝦育苗中的應用

中國明對蝦無節(jié)幼體II期接入中肋骨條藻，能夠降低水體透明度、調節(jié)水質，避免幼體出現(xiàn)應激反應。中肋骨條藻富含對蝦幼體發(fā)育所需的高不飽和脂肪酸，使對蝦苗種從Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需的時間顯著縮短，說明中肋骨條藻是中國明對蝦的優(yōu)質餌料，能夠縮短幼體發(fā)育時間。

1號～3號桶與10號～12號桶相對比，對蝦苗種Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育期的平均成活率差異顯著，中肋骨條藻能夠明顯提高中國明對蝦溞狀幼體成活率。究其原因，中肋骨條藻是參與構建生物絮團的重要組分，在育苗過程中合理應用，不但為中國明對蝦提供了優(yōu)質營養(yǎng)元素，也起到凈化水質、抑制有害菌繁殖等重要作用，能夠有效減少疾病發(fā)生，提高養(yǎng)殖生物成活率。