不同樣本類(lèi)型對(duì)EBV DNA檢測(cè)結(jié)果的影響

胡如政

摘要：目的：對(duì)臨床血漿樣本、外周血PBMC樣本與咽拭子樣本的EBV DNA陽(yáng)性率以及相關(guān)計(jì)數(shù)情況進(jìn)行對(duì)比，以分析有關(guān)樣本對(duì)最終檢驗(yàn)結(jié)果所帶來(lái)的影響，評(píng)價(jià)樣本及方法的靈敏度。方法：在本院所有所收治接診的疑似為EBV感染的90例患兒作為本次研究的對(duì)象，對(duì)其采取血漿樣本、PBMC樣本及咽拭子樣本的采集，并觀察所有患兒最終結(jié)果的陽(yáng)性率是否有明顯的差異，對(duì)其敏感度情況進(jìn)行觀察，評(píng)價(jià)相關(guān)樣本的影響作用。結(jié)果：90例患兒最終檢查的結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，三種檢驗(yàn)結(jié)果彼此之間的陽(yáng)性率之間形成了明顯不同，從低到高依次為血漿、外周血PBMC和咽拭子標(biāo)本，尤其以咽拭子標(biāo)本為最高且明顯高于外周血PBMC與血漿檢查，靈敏度最強(qiáng)（P<0.05）。但在EBV DNA方面，外周血PBMC與咽拭子的相關(guān)結(jié)果未呈現(xiàn)明顯不同（P>0.05），兩項(xiàng)結(jié)果接近，而且明顯比血漿檢查結(jié)果更高（P<0.05）。結(jié)論：在臨床對(duì)EB病毒篩查的過(guò)程中。咽拭子標(biāo)本的敏感性最強(qiáng)，陽(yáng)性率最高，在EBV DNA方面與外周血PBMC接近，但是其陽(yáng)性率卻明顯較高，可以結(jié)合實(shí)際情況選擇相應(yīng)的標(biāo)本進(jìn)行疾病監(jiān)測(cè)，以促使早期診斷積極進(jìn)行干預(yù)。

關(guān)鍵詞：EB病毒;小兒;DNA;咽拭子;外周血PBMC;血漿;結(jié)果;影響

【中圖分類(lèi)號(hào)】R446.5? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A? 【文章編號(hào)】1673-9026（2020）07-034-01

引言：

EB病毒是臨床常見(jiàn)的一種皰疹病毒，尤其在小兒群體中發(fā)生感染的情況更多，作為一種傳染性單核細(xì)胞增多癥的病原體，在小兒群體中尤為常見(jiàn)，一般以呼吸道感染為主要癥狀，嚴(yán)重情況下可以累及全身多個(gè)臟器產(chǎn)生問(wèn)題，感染之后以B淋巴細(xì)胞為主要攻擊的細(xì)胞，在其中增殖并感染其他細(xì)胞^[1]。而此類(lèi)病毒感染之后帶來(lái)的較為典型性癥狀影響包括了發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大，引起咽峽炎等一系列問(wèn)題，主要以呼吸道癥狀和全身癥狀為主。EB病毒的感染很容易被漏診，進(jìn)行診斷和治療的過(guò)程中，尤其要關(guān)注其方法和標(biāo)本的使用，合理選取標(biāo)本進(jìn)行前期檢查診斷，為后續(xù)干預(yù)提供診斷依據(jù)和支持^[2]。針對(duì)這一特點(diǎn)，本次研究主要是采取實(shí)時(shí)熒光聚合酶聯(lián)反應(yīng)（PCR）定量檢測(cè)，對(duì)不同的樣本陽(yáng)性率、EBV DNA情況進(jìn)行對(duì)比，以評(píng)價(jià)哪一種標(biāo)本陽(yáng)性率更高敏感性更強(qiáng)一些。

1.資料與方法

1.1一般資料

90例患兒均為本院所收治高度疑似為EBV感染的患兒群體，其年齡在4-12歲之間，平均（6.14±1.36）歲，伴有明顯的淋巴結(jié)腫大、咽喉疼痛、發(fā)熱咳嗽等問(wèn)題，臨床診斷為肺炎、支氣管炎等等。所有患兒既往體健，沒(méi)有明確的免疫系統(tǒng)疾病或者凝血功能障礙等一系列問(wèn)題，在此之前沒(méi)有使用過(guò)抗病毒、抗感染治療，基礎(chǔ)情況接近，不會(huì)影響最終結(jié)果準(zhǔn)確性。

1.2方法

對(duì)所有患兒都進(jìn)行血液標(biāo)本和咽拭子標(biāo)本采集，抽取靜脈全血2ml，使用乙二胺四乙酸進(jìn)行抗凝然后離心分離血漿，留取血漿100ul進(jìn)行EBV DNA提取，剩余全血標(biāo)進(jìn)行外周血的單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）EBV DNA提取。咽拭子標(biāo)本方面，按照有關(guān)要求進(jìn)行采集，并密封進(jìn)行送檢，無(wú)法及時(shí)檢測(cè)的存儲(chǔ)于零下20攝氏度環(huán)境，盡早進(jìn)行檢測(cè)^[3]。使用ABI 7300/7500熒光定量擴(kuò)增儀配合相關(guān)試劑，按照相關(guān)操作規(guī)范進(jìn)行DNA模板提取，并在反應(yīng)管內(nèi)加入陰性質(zhì)控品、質(zhì)控品和參考品以及待檢測(cè)標(biāo)本各2ul進(jìn)行檢測(cè)。

1.3觀察指標(biāo)

觀察所有患兒在三種標(biāo)本同樣方法檢測(cè)之后的陽(yáng)性率、EBV DNA對(duì)數(shù)值方面是否形成了明顯差異。

1.4統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)利用SPSS.20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x+s）進(jìn)行表示，采用t檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)，表示差異較為顯著，具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

分別采取三種標(biāo)本的結(jié)果對(duì)比發(fā)現(xiàn)，以咽拭子標(biāo)本的陽(yáng)性率最高，明顯高于外周血PBMC與血漿（P<0.05），而在EBV DNA方面，其結(jié)果與外周血PBMC相近（P>0.05），但均明顯大于血漿檢查（P<0.05）。三種標(biāo)本的最終陽(yáng)性率與EBV DNA結(jié)果情況對(duì)比詳見(jiàn)表1.

3.結(jié)論

EB病毒感染的問(wèn)題在臨床兒科十分常見(jiàn)，其發(fā)生率相對(duì)較高，由于免疫力差異導(dǎo)致患兒的臨床癥狀也有明顯不同，早期進(jìn)行診斷對(duì)于后續(xù)治療影響十分明確^[4]。根據(jù)不同標(biāo)本差異發(fā)現(xiàn)，咽拭子的陽(yáng)性率更高，這主要是其分泌物是病毒傳播的主要載體，故而其陽(yáng)性率更高。而外周血PBMC作為感染病毒后主要載體，感染之后主要攻擊B淋巴細(xì)胞上受體，所以其陽(yáng)性率比血漿要更高一些。

如上所述，在臨床不同標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，咽拭子檢查的陽(yáng)性率最高，在早期診斷的過(guò)程中選取相關(guān)方法取得的效果更好一些，有助于早期診斷和早期疾病治療。

參考文獻(xiàn)：

[1] 陳世知，謝運(yùn)蘭，梅嚴(yán)花，et al.傳染性單核細(xì)胞增多癥患者不同標(biāo)本EBV-DNA檢測(cè)的臨床價(jià)值[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2018，39（02）：53-55+58.

[2] Lorusso F ，Caleca M P ，Bellavia C ，et al.The EBV-DNA Can be Used as a Diagnostic and Follow-up Parameter of the Rhinopharyngeal Tumors in the Non-Endemic Population of the Western Sicily[J].Indian Journal of Otolaryngology and Head & Neck Surgery，2018，71-71.

[3] 張晴，崔蕾，馬宏浩，et al.血漿及全血EB病毒DNA對(duì)EB病毒相關(guān)噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥患兒預(yù)后的影響[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志，2020，35（15）：1138-1143.

[4] 彭惠軒，麥彩喜，陳廣道.EB病毒DNA檢測(cè)對(duì)兒童傳染性單核細(xì)胞增多癥的診斷價(jià)值及其影響因素[J].國(guó)際醫(yī)藥衛(wèi)生導(dǎo)報(bào)，2018，024（004）：491-493.