車前草對(duì)重金屬銅和鎳的積累及生理響應(yīng)

劉麗杰，劉凱，孫玉婷，王璐瑤，丁美云，張東向，金忠民

(齊齊哈爾大學(xué)生命科學(xué)與農(nóng)林學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006)

重金屬是指密度在5.0 g/cm3以上的金屬元素，大約有45種元素.近年來(lái)，由于人類的生產(chǎn)和生活活動(dòng)造成了重金屬對(duì)環(huán)境的污染，尤其是對(duì)土壤的污染[1-2].植物修復(fù)技術(shù)從20世紀(jì)90年代開始作為一種治理污染土壤的新技術(shù)被推廣應(yīng)用[3].植物修復(fù)技術(shù)成本低、適應(yīng)性廣、操作方便、不破壞生態(tài)環(huán)境，并且不會(huì)引起二次污染.植物修復(fù)能夠使重金屬的移動(dòng)性降低，從而避免重金屬進(jìn)入食物鏈[4]，因此重金屬的植物修復(fù)技術(shù)表現(xiàn)出一定的市場(chǎng)經(jīng)濟(jì)價(jià)值和更加廣闊的發(fā)展前景.

車前草(Plantagoasiatica)，又叫車輪菜、牛甜菜，是一種多年生草本植物.我國(guó)是車前草資源比較豐富的國(guó)家，南方和北方都有分布.車前草具重金屬富集作用，且是一種生物量大，生長(zhǎng)速度非?？斓闹参?，因此具有很大的潛力成為土壤污染的修復(fù)植物.目前，關(guān)于車前草對(duì)重金屬的積累方面已經(jīng)有一定的研究，比如車前草對(duì)重金屬Cu、P b、Cd、Ni、Zn等的吸附，主要集中在車前草對(duì)單一金屬離子的吸附特性上[5-9]，關(guān)于車前草吸附重金屬離子(尤其是復(fù)合金屬離子)的機(jī)理以及重金屬對(duì)車前草生理代謝方面的研究還比較少.因此，本研究利用生理生化的研究方法，對(duì)重金屬Cu2+和Ni2+單一及復(fù)合污染下車前草對(duì)重金屬的積累特性及生理生化指標(biāo)進(jìn)行了研究，旨為探究車前草如何抵御外界逆境脅迫，同時(shí)為為植物修復(fù)土壤污染提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 供試材料

試驗(yàn)所用車前草種子，購(gòu)于齊齊哈爾市齊豐種子公司.2019年3～6月在齊齊哈爾大學(xué)生命科學(xué)與農(nóng)林學(xué)院植物生理與代謝實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行車前草盆栽試驗(yàn).2019年3月對(duì)車前草種子進(jìn)行播種，所用土壤采自齊齊哈爾市嫩江邊，沒(méi)有經(jīng)過(guò)重金屬處理.將播種后的花盆放到適宜的光照、水分和溫度條件下，長(zhǎng)出幼苗后待用.

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)采用Cu和Ni 2因素4水平交互試驗(yàn)，具體處理見表1.取已經(jīng)風(fēng)干并過(guò)篩的土壤1 kg，均勻混合裝入花盆(直徑為16 cm，高度為16 cm)中，按表1中的濃度梯度加入重金屬溶液，用CuSO4·5H2O和Ni (NO3)2·6H2O換算成質(zhì)量，配成500 mL溶液加入到稱好的土壤中，每個(gè)處理重復(fù)20次，以不加任何重金屬的土壤作為對(duì)照.車前草幼苗生長(zhǎng)3周后，將長(zhǎng)勢(shì)較一致并且狀況良好的幼苗移栽到重金屬處理后的花盆中，每盆栽3株.在車前草生長(zhǎng)的過(guò)程中，根據(jù)土壤的水分情況適當(dāng)澆水，保證植株正常生長(zhǎng).在2019年6月下旬收獲重金屬處理和對(duì)照的車前草植株，測(cè)定株高，并用自來(lái)水沖洗植株上的土壤，再用去離子水洗凈，擦干，備用.

1.3 測(cè)定及計(jì)算方法

在進(jìn)行重金屬含量測(cè)定時(shí)，將車前草葉片和根部烘干，采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)定[10].測(cè)定車前草的株高、地上和地下部分鮮重.在進(jìn)行生理指標(biāo)測(cè)定時(shí)用鮮樣：MDA含量測(cè)定采用硫代巴比妥酸法；葉綠素含量測(cè)定采用丙酮法；POD活性的測(cè)定采用愈創(chuàng)木酚法[11]；SOD活性測(cè)定采用Spycbaha的方法[12]；CAT活性測(cè)定采用過(guò)氧化氫還原法[13].

重金屬富集系數(shù)=植物體內(nèi)重金屬含量/土壤(或沉積物)中重金屬含量(栽種車前草之前的含量)×100%

轉(zhuǎn)移系數(shù)=地上部分的重金屬含量/地下部分的重金屬含量

耐性系數(shù)=植物在重金屬脅迫下的最大根長(zhǎng)/對(duì)照條件下的最大根長(zhǎng)

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)和分析

采用Excel 2010進(jìn)行圖表制作，利用SPSS20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)進(jìn)行數(shù)據(jù)間的差異顯著性分析.

表1 Cu2+和Ni2+的不同配比組合

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理下車前草葉片和根中重金屬Cu2+、Ni2+的含量

隨著重金屬Cu2+濃度的增加，車前草幼苗根中重金屬Cu2+含量呈先升高后下降趨勢(shì)(圖1).Cu-Ni復(fù)合處理時(shí)，促進(jìn)了根中Cu2+含量的增加.與對(duì)照相比，處理7、處理10、處理11、處理14和處理15根中Cu2+含量顯著增加(P<0.05)；葉中重金屬 Cu2+含量明顯低于根，單獨(dú)Cu2+處理以及Cu-Ni復(fù)合處理后的變化趨勢(shì)與根相同，隨著重金屬Ni2+濃度的增加，車前草根中Ni2+含量逐漸增加，低濃度Cu2+處理對(duì)Ni2+含量的影響不大，當(dāng)Cu2+濃度達(dá)到700 mg/kg以后，Ni2+含量隨之增加，與對(duì)照相比，處理7、處理10、處理11、處理14和處理15的Ni2+含量顯著增加(P<0.05)；車前草葉片中Ni2+含量顯著低于根中的含量(P<0.05)，并且隨著Cu2+和Ni2+含量的增加呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，處理15 Ni2+含量達(dá)到最大值，為540 mg/kg(圖2).

同種器官的不同字母代表差異顯著(P<0.05).Different letters of the same organs represent significant differences(P<0.05).圖1 不同重金屬處理后車前草葉片和根中Cu2+含量分布Figure 1 Distribution of Cu2+ contents in the leaves and roots of Plantago asiatica under different heavy metals treatments

不同器官的不同字母代表差異顯著(P<0.05)Different letters of the same organs represent significant differences(P<0.05).圖2 不同重金屬處理后車前草葉片和根中Ni2+含量分布Figure 2 Distribution of Ni2+ contents in the leaves and roots of Plantago asiatica under different heavy metal treatments

2.2 不同處理下車前草對(duì)Cu2+和Ni2+的富集系數(shù)、轉(zhuǎn)移系數(shù)和耐性系數(shù)變化

富集系數(shù)指植物中某種重金屬的含量與灌溉溶液中該種重金屬含量的比值.隨著重金屬 Cu2+濃度的增加，車前草對(duì)Cu2+的富集系數(shù)呈現(xiàn)整體下降的趨勢(shì)；Cu-Ni復(fù)合處理下，富集系數(shù)先上升后下降，除了處理1(Cu2+為200 mg/kg，Ni2+為100 mg/kg)外，其他處理與對(duì)照相比差異顯著(P<0.05)(圖3).隨著Ni2+濃度的增加，車前草對(duì)Ni2+的富集系數(shù)也呈現(xiàn)整體下降的趨勢(shì)；Cu-Ni復(fù)合處理后促進(jìn)了富集系數(shù)的下降.與對(duì)照相比，只有處理7差異顯著(P<0.05).

同種重金屬不同字母代表差異顯著(P<0.05).Different letters of the same metal represent significant differences(P<0.05).圖3 車前草對(duì)銅和鎳的富集系數(shù)變化Figure 3 Changes of enrichment coefficient of Cu2+ and Ni2+ of Plantago asiatica

轉(zhuǎn)移系數(shù)指植物地上部分重金屬濃度與根中該種重金屬濃度的比值.在本研究中車前草的Cu2+轉(zhuǎn)移系數(shù)逐漸降低，但變化不顯著(圖4).Cu-Ni復(fù)合處理使轉(zhuǎn)移系數(shù)下降更快，但只有處理7、處理11、處理14和處理15( Cu2+為1200 mg/kg，Ni2+為200 mg/kg)下降達(dá)到顯著水平(P<0.05)；隨著重金屬Ni2+濃度的增加，車前草的Ni2+轉(zhuǎn)移系數(shù)表現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，Cu-Ni復(fù)合處理促進(jìn)了轉(zhuǎn)移系數(shù)的升高.除了處理1、處理2、處理4和處理5與對(duì)照相比差異不顯著外，其余處理均顯著高于對(duì)照(P<0.05).

同種重金屬不同字母代表差異顯著(P<0.05).Different letters of the same metal represent significant differences(P<0.05).圖4 車前草對(duì)銅和鎳的轉(zhuǎn)移系數(shù)變化Figure 4 Changes of transfer coefficient of Plantago asiatica of Cu2+ and Ni2+

耐性系數(shù)可用來(lái)評(píng)價(jià)植物對(duì)重金屬的耐性，指植物在重金屬脅迫下的最大根長(zhǎng)與對(duì)照條件下的最

圖5 車前草對(duì)銅和鎳的耐性系數(shù)變化Figure 5 Changes of tolerance coefficient of Plantago asiatica to Cu2+ and Ni2+

大根長(zhǎng)的比值.由圖5可知，Cu2+的增加對(duì)車前草耐性系數(shù)的變化影響較小，但隨著Ni2+的增加，車前草的耐性系數(shù)則呈現(xiàn)先升后降的趨勢(shì)，除了處理1以外，均顯著高于對(duì)照(P<0.05)，處理10(Cu2+為700 mg/kg，Ni2+為150 mg/kg)達(dá)到最大值1.4.

2.3 不同濃度重金屬處理下車前草生長(zhǎng)特性指標(biāo)的變化

重金屬Cu 和Ni單一和復(fù)合處理都使車前草的株高降低，單獨(dú)Ni處理時(shí)與對(duì)照差異不顯著，單獨(dú)Cu處理以及復(fù)合處理組的株高都顯著低于對(duì)照(P<0.05)(圖6).

圖6 不同重金屬處理下車前草株高變化Figure 6 Plant height changes of Plantago asiatica under different heavy metal treatments

重金屬Cu 和Ni單一和復(fù)合處理都使車前草的地上部分和地下部分生物量減少.單獨(dú)Cu處理時(shí)，Cu2+濃度達(dá)到700 mg/kg以上時(shí)，生物量顯著低于對(duì)照(P<0.05)；單獨(dú)Ni處理時(shí)，Ni2+濃度達(dá)到200 mg/kg，生物量顯著低于對(duì)照(P<0.05)；Cu-Ni復(fù)合處理后，除了處理5和處理6以外，其他處理的生物量均顯著低于對(duì)照(P<0.05)(圖7).

圖7 不同重金屬處理下車前草生物量變化Figure 7 Biomass changes of Plantago asiatica under different heavy metal treatments

2.4 不同重金屬處理下車前草葉片MDA含量的變化

由圖8可知，單獨(dú)Cu2+處理時(shí)，MDA含量都顯著高于對(duì)照(P<0.05)；單獨(dú)Ni2+處理時(shí)，MDA含量葉都高于對(duì)照，但差異都不顯著；兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，MDA含量都顯著高于對(duì)照(P<0.05).

圖8 車前草MDA含量變化Figure 8 Changes of MDA content of Plantago asiatica

2.5 不同重金屬處理下車前草葉片葉綠素含量的變化

由圖9可知，單獨(dú)重金屬Cu2+和Ni2+的濃度增加使車前草葉片葉綠素含量先增加后下降，單獨(dú)重金屬Cu2+處理時(shí)，低濃度Cu2+處理時(shí)增加不顯著，但當(dāng)重金屬Cu2+達(dá)到700 mg/kg(處理8)時(shí),葉綠素含量顯著下降(P<0.05)，與對(duì)照相比下降20%；單獨(dú)重金屬Ni2+處理時(shí)，葉綠素含量先增加后下降，在Ni2+濃度為200 mg/kg時(shí),葉綠素顯著低于對(duì)照(P<0.05)；兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，處理5、處理6、處理10葉綠素含量高于對(duì)照，處理7、處理9、處理11、處理13和處理15均顯著低于對(duì)照(P<0.05).

圖9 車前草葉綠素含量變化Figure 9 Changes of chlorophyll content of Plantago asiatica

2.6 不同重金屬處理下車前草葉片抗氧化酶活性的變化

由圖10可知：?jiǎn)为?dú)重金屬Cu2+處理使SOD活性增強(qiáng)，但差異沒(méi)有達(dá)到顯著水平；而單獨(dú)Ni2+處理也使SOD活性增加，但僅在Ni2+濃度達(dá)到200 mg/kg(處理3)時(shí)差異達(dá)到顯著水平(P<0.05)，此時(shí)SOD活性為對(duì)照的1.38倍；兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，SOD活性均顯著高于對(duì)照，處理15(Cu2+濃度為1 200 mg/kg，Ni2+濃度為200 mg/kg)達(dá)到最高值，為對(duì)照的1.77倍.

圖10 車前草SOD活性變化Figure 10 Changes of SOD activity of Plantago asiatica

由圖11可知：?jiǎn)为?dú)重金屬Cu2+處理和單獨(dú)Ni2+處理都使POD活性增強(qiáng)，但差異均沒(méi)有達(dá)到顯著水平；兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，POD活性都高于對(duì)照，除了處理5(Cu2+濃度為200 mg/kg，Ni2+濃度為100 mg/kg)和處理6(Cu2+濃度為200 mg/kg，Ni2+濃度為150 mg/kg)，其他處理均與對(duì)照差異顯著，處理15(Cu2+濃度為1 200 mg/kg，Ni2+濃度為200 mg/kg)達(dá)到最高值，為對(duì)照的2.15倍.

圖11 車前草POD活性變化Figure 11 Changes of POD activity of Plantago asiatica

由圖12可知，重金屬Cu2+和Ni2+單獨(dú)及復(fù)合處理都使CAT活性增強(qiáng)，僅在處理1(Cu2+濃度為0 mg/kg，Ni2+濃度為100 mg/kg)、處理4 (Cu2+濃度為200 mg/kg，Ni2+濃度為0 mg/kg)和處理5(Cu2+濃度為200 mg/kg，Ni2+濃度為100 mg/kg)時(shí)，與對(duì)照相比差異不顯著，其他處理均顯著高于對(duì)照，并且兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，CAT的活性高于Cu2+和Ni2+單獨(dú)處理，在Cu2+和Ni2+均達(dá)到最高值時(shí)(處理15)，CAT活性也達(dá)到最高值，為對(duì)照的4.1倍.

圖12 車前草CAT活性變化Figure 12 Changes of CAT activity of Plantago asiatica

3 討論

3.1 車前草對(duì)Cu2+和Ni2+的積累及富集特征

重金屬銅(Cu)和鎳(Ni)是植物生長(zhǎng)發(fā)育必需的微量營(yíng)養(yǎng)元素，很容易被植物吸收，但是過(guò)量的銅和鎳會(huì)使植物受到毒害[14-15].在本研究中， 一定濃度的Cu2+和Ni2+處理后，車前草仍然能夠正常生長(zhǎng)，說(shuō)明車前草對(duì)銅和鎳都具有非常強(qiáng)的抗性.隨著重金屬Cu2+和Ni2+濃度的增加，車前草的地上部分和地下部分Cu2+和Ni2+含量也逐漸增加，地下部分Cu2+和Ni2+含量顯著高于地上部分，說(shuō)明車前草根部積累了大部分重金屬Cu2+和Ni2+，少量轉(zhuǎn)移到地上部分，地下部分根作為植物吸收土壤中Cu2+和Ni2+的第一個(gè)器官，對(duì)植物抵抗外界環(huán)境Cu2+和Ni2+毒害起到非常重要的作用，這與陸引罡等[16]的研究結(jié)果一致.銅和鎳復(fù)合處理促進(jìn)了車前草對(duì)Cu2+和Ni2+的吸收,使車前草地上部分和地下部分Cu2+和Ni2+的含量都有所增加，說(shuō)明Cu-Ni復(fù)合污染對(duì)車前草富集Cu和Ni可能有協(xié)同作用，這與車前草在Cd-Pb復(fù)合污染時(shí)對(duì)其富集Cd有協(xié)同作用的研究結(jié)果相似[17].

車前草對(duì)重金屬Cu2+的轉(zhuǎn)移系數(shù)隨著重金屬Cu2+濃度的增加而逐漸減小，說(shuō)明土壤中 Cu2+濃度的增加對(duì)車前草Cu2+從地下部分向地上部運(yùn)輸有一定的抑制作用，這與楊櫻[18]在車前草對(duì)重金屬銅的富集方面的的研究結(jié)果基本一致，并且低濃度重金屬Ni2+可抑制Cu2+向地上轉(zhuǎn)運(yùn)，但隨著Ni2+濃度的增加，車前草對(duì)重金屬Cu2+的轉(zhuǎn)移系數(shù)也逐漸增加，可見Cu-Ni復(fù)合污染對(duì)Cu2+向地上部分轉(zhuǎn)移具有一定的協(xié)同作用；車前草對(duì)重金屬Ni2+的轉(zhuǎn)移系數(shù)隨著重金屬Ni2+的增加而逐漸增加，土壤中Ni2+濃度的增加對(duì)車前草Ni2+從地下部分向地上部運(yùn)輸有一定的促進(jìn)作用，這與高凌顏等[19]對(duì)旱傘草銅富集及吸收的研究結(jié)果相似,當(dāng)銅和鎳復(fù)合處理時(shí)，Cu2+濃度的增加可促進(jìn)Ni2+轉(zhuǎn)移到地上部分，即Cu-Ni復(fù)合污染對(duì)Ni2+向地上部分轉(zhuǎn)移也具有一定的協(xié)同作用.

富集系數(shù)是反映植物對(duì)重金屬離子富集能力大小的指標(biāo)，當(dāng)植物對(duì)某種重金屬的富集系數(shù)大于1時(shí)，便可認(rèn)定該種植物對(duì)此種重金屬具有富集能力，富集系數(shù)越大說(shuō)明植物對(duì)該金屬的吸收能力越強(qiáng)，一般來(lái)說(shuō)，富集系數(shù)大于10的植物可認(rèn)定為對(duì)某種重金屬超富集植物[20].在本研究中Cu2+的富集系數(shù)隨著重金屬Cu2+濃度的提高而逐漸降低，對(duì)照組和處理4(Cu2+濃度為200 mg/kg、Ni2+濃度為0)和處理8(Cu2+濃度為700 mg/kg、Ni2+濃度為0)時(shí)，車前草對(duì)Cu2+的富集系數(shù)都大于1，說(shuō)明車前草是銅富集植物，但沒(méi)有達(dá)到超富集的水平，但Cu-Ni復(fù)合處理降低了車前草對(duì)Cu2+的富集；車前草對(duì)Ni2+的富集系數(shù)也隨著重金屬濃度的提高而逐漸下降，在低濃度Ni2+處理時(shí)，車前草對(duì)Ni2+的富集系數(shù)>1,說(shuō)明車前草也是鎳富集植物，這與魏芳雪等[21]對(duì)車前草的研究結(jié)果基本一致，并且Cu-Ni復(fù)合處理使車前草對(duì)Ni2+的富集系數(shù)進(jìn)一步下降，當(dāng)Cu2+濃度達(dá)到最高值時(shí)有所升高，但變化幅度很小.

3.2 車前草對(duì)Cu2+和Ni2+處理的生理響應(yīng)

重金屬處理后，車前草的株高降低，生物量減少，當(dāng)重金屬濃度達(dá)到其閾值后生物量顯著降低，說(shuō)明此時(shí)重金屬濃度已經(jīng)影響到車前草的正常生長(zhǎng)，已達(dá)到車前草吸附重金屬的極限.植物在正常情況下，其體內(nèi)的各項(xiàng)生理代謝過(guò)程都是協(xié)調(diào)且穩(wěn)定的，一旦植物遇到逆境脅迫時(shí)，其體內(nèi)的各種代謝活動(dòng)會(huì)受到影響而失去平衡，這時(shí)植物會(huì)對(duì)逆境作出反應(yīng)，細(xì)胞膜系統(tǒng)會(huì)受到一定的損傷，膜脂會(huì)發(fā)生過(guò)氧化，而產(chǎn)生MDA，MDA含量的多少可以反應(yīng)逆境下植物受傷害的程度，MDA的含量越高，植物細(xì)胞膜受到的傷害就越嚴(yán)重[22].當(dāng)車前草受到重金屬Cu2+和Ni2+毒害后，細(xì)胞膜的透性增加，膜系統(tǒng)受到損害，MDA的含量增加，這與胡雪華等[23]在鋁脅迫對(duì)車前草影響的研究結(jié)果基本一致.尤其是當(dāng)兩種重金屬同時(shí)處理時(shí)，MDA含量增加的幅度更大，當(dāng)兩種重金屬都達(dá)到最高濃度時(shí)，MDA含量達(dá)到峰值，是對(duì)照的4倍.但在低濃度重金屬Cu2+和Ni2+處理時(shí)，MDA含量增加的幅度較小，這可能是車前草對(duì)重金屬 Cu2+和Ni2+具有一定抗性的重要原因之一.

當(dāng)植物遭受逆境脅迫時(shí)，細(xì)胞內(nèi)會(huì)積累大量的活性氧，使其代謝失去平衡，最終造成細(xì)胞膜系統(tǒng)發(fā)生嚴(yán)重的氧化損傷[24-25].逆境脅迫會(huì)使植物體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)活性增強(qiáng)，從而防止細(xì)胞內(nèi)過(guò)量積累的活性氧對(duì)植物造成的氧化傷害.保護(hù)酶體系 SOD、POD和CAT能夠?qū)^(guò)氧化物起到一定的清除作用，從而防止自由基對(duì)植物的毒害.在本試驗(yàn)中，在一定的范圍內(nèi)SOD、POD和CAT 3種酶的活性都隨著 Cu2+和Ni2+濃度的增加而呈現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，這個(gè)趨勢(shì)與焦軼男等[26]的研究結(jié)果并不完全一致，他們的結(jié)果是先上升后下降.Cu-Ni復(fù)合處理使兩種保護(hù)酶活性上升的幅度增大，說(shuō)明Cu2+和Ni2+可能導(dǎo)致了細(xì)胞內(nèi)外過(guò)氧化物的累積，此時(shí)，車前草體內(nèi)的保護(hù)酶體系便會(huì)啟動(dòng)，對(duì)脅迫作出相應(yīng)的反應(yīng)，從而對(duì)車前草有機(jī)體進(jìn)行保護(hù).兩種重金屬?gòu)?fù)合處理時(shí)，保護(hù)酶的反應(yīng)更加迅速而有效，在保護(hù)酶活性的變化中都表現(xiàn)出上升的趨勢(shì)，這種上升趨勢(shì)一直在增加，說(shuō)明沒(méi)有超過(guò) SOD、POD和CAT的忍受范圍，它們的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)還沒(méi)有受到較大的破壞.

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，車前草可以在一定濃度的重金屬Cu2+和Ni2+處理下積累銅和鎳(單獨(dú)Cu2+700 mg/kg以內(nèi)、Ni2+200 mg/kg以內(nèi)，以及Cu2+200 mg/kg、Ni2+100 mg/kg；Cu2+200 mg/kg、Ni2+150 mg/kg范圍內(nèi)的Cu-Ni復(fù)合處理)，存在明顯的生理適應(yīng)，具有一定的修復(fù)潛能.但本試驗(yàn)僅從車前草對(duì)重金屬銅和鎳的積累量、富集特征、生理響應(yīng)幾方面分析了車前草對(duì)銅和鎳單獨(dú)及復(fù)合污染修復(fù)的機(jī)理，更加深入的毒害機(jī)理，如車前草的根系微生物是否和植物共同作用等，還有待于從分子及細(xì)胞水平進(jìn)一步研究.