孜然種子提取物枯茗酸對(duì)2種病害藥效的初步研究

張 潔

(咸陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西 咸陽(yáng) 712000)

我國(guó)幅員遼闊，孕育了多種植物資源，據(jù)統(tǒng)計(jì)在我國(guó)現(xiàn)有植物資源中 ，高等植物約占35 112種[1]，大部分具有藥用價(jià)值，其中較多的植物具有生物活性，并被作為植物源農(nóng)藥利用或研究。

孜然(CuminumcyminumL.)又名枯茗、孜然芹、為傘形科孜然芹屬一年生或兩年生草本植物，原產(chǎn)于埃塞俄比亞、埃及地區(qū)，自唐代以后傳入中國(guó)后，深受我國(guó)人民喜愛，現(xiàn)主要栽培于我國(guó)新疆地區(qū)，多作調(diào)味料使用。

孜然的提取物具有多種生物活性，在醫(yī)學(xué)方面，研究表明其種子提取的精油具有治療消化道系統(tǒng)疾病、驅(qū)逐人體腸道寄生蟲、驅(qū)寒除濕等功效[2]，此外，孜然種子內(nèi)含有的類貼、香豆素等多種成分具有降脂、抗癌、提高人體免疫力等多種功效[3]。在農(nóng)用方面，目前國(guó)內(nèi)外對(duì)其的生物活性研究多在殺蟲及抑菌方面，國(guó)外研究表明，孜然種子提取的精油對(duì)地中海粉斑螟(EphestiaKuehniella)及雜擬谷盜(TriboliumConfusum)、棉蚜蟲(phisgossypii)朱砂葉螨(Tetranychuscinnabarinus)、具有熏蒸活性[4-5]，對(duì)埃及伊蚊(Aedesaegypti)具有毒殺活性[6]。

孜然在抑菌方面的活性研究最為廣泛，研究表明其多種提取對(duì)多種病害都具有抑制及治療作用，韓建華等研究發(fā)現(xiàn)孜然種子丙酮提取物對(duì)辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici)等多種病原真菌有較強(qiáng)的的抑制活性[7]，胡林峰等從孜然種子乙醇總浸膏中分離得到兩種化合物質(zhì)枯茗酸及枯茗醛，并發(fā)現(xiàn)枯茗酸對(duì)辣椒疫霉病菌等多種病原菌均有抑制活性及防治效果[8]。因此，本試驗(yàn)基于前期研究的基礎(chǔ)上，為了進(jìn)一步明確枯茗酸的抑菌活性，本實(shí)驗(yàn)選取番茄灰霉病菌(Botrytiscinerea)及小麥白粉病菌(Blumeriagraminis)為試驗(yàn)菌，測(cè)定枯茗酸對(duì)兩種病菌的生物活性，以期為孜然農(nóng)用生物活性的研發(fā)提供一些參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 試驗(yàn)植物材料 番茄(Lycopersiconesculentum)(金鵬十號(hào))，小麥(Triticumaestivum)(輝縣紅)，咸陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院試驗(yàn)基地種植。

1.1.2 試驗(yàn)病菌 番茄灰霉病菌、小麥白粉病菌均由咸陽(yáng)職業(yè)技術(shù)學(xué)院儀祉農(nóng)林學(xué)院提供。

1.1.3 試驗(yàn)試劑 枯茗酸(濃度為98%)(上海晶純有限公司)，50%速克靈可濕性粉劑(日本住友化學(xué)工業(yè)株式會(huì)社)，15%三唑酮可濕性粉劑(四川國(guó)光農(nóng)化有限公司)，均為市購(gòu)。

1.2 試驗(yàn)方法

測(cè)定枯茗酸對(duì)番茄灰霉病均的藥效采用組織法[9]。選取成熟、新鮮、大小形狀一致且未接觸過(guò)殺菌劑的帶蒂番茄，用水清洗干凈后晾干至無(wú)任何水漬后用濃度為75%的酒精擦拭表面自然晾干，用接種針在番茄果實(shí)表面刺出直徑為4～5 mm的感染區(qū)域后，將番茄灰霉病菌打成R=4 mm的菌餅扣在番茄表面。

保護(hù)作用處理時(shí)先用噴霧法將藥劑均勻的噴灑在番茄表面，自然晾干藥液后開始接菌種。 治療作用處理時(shí)將處理好的菌餅直接扣在番茄表面。

待番茄發(fā)病后按照公式1-1和公式1-2計(jì)算病斑直徑及藥效。

果實(shí)病斑直徑(mm)=兩次直徑平均值-4(菌餅直徑)

公式1-1

藥效(%)=

公式1-2

采用盆栽法[10]測(cè)定枯茗酸對(duì)小麥白粉病的藥效。將供試小麥種子播種于盆中，每盆播種10～15粒，無(wú)菌土常規(guī)培養(yǎng)，待小麥長(zhǎng)至一心一葉時(shí)開始試驗(yàn)。保護(hù)作用處理時(shí)將藥劑稀釋至供試濃度后均勻地噴灑在小麥表面，24 h后采用孢子抖落法接菌種，然后將接菌種后的小麥放置于人工培養(yǎng)箱(溫度：18℃，光暗周期：14 h ∶10 h，相對(duì)濕度68±2℃),待小麥完全發(fā)病時(shí)開始記錄病情指數(shù)。治療作用處理時(shí)先在小麥表面噴灑少量清水，然后采用孢子抖落法接菌種，接菌種后放入人工培養(yǎng)箱(溫度：18℃，光暗周期：14 h ∶10 h，相對(duì)濕度68±2℃)內(nèi)24 h后噴灑藥劑，待小麥完全發(fā)病時(shí)開始記錄病情指數(shù)。注意藥劑噴灑要均勻。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯茗酸對(duì)番茄灰霉病藥效的試驗(yàn)結(jié)果

在表1中，分別測(cè)試枯茗酸在濃度為0.5 g·L-1、1 g·L-1情況下對(duì)番茄灰霉病菌的藥效反應(yīng)，同時(shí)設(shè)置清水、溶劑、藥劑(50%速克靈可濕性粉劑)進(jìn)行對(duì)照，每次處理5個(gè)番茄果實(shí)。

由表1可見，枯茗酸對(duì)番茄灰霉病菌的保護(hù)和治療均有一定效果，在枯茗酸的供試濃度為1 g·L-1時(shí)，對(duì)番茄灰霉病的保護(hù)效果和治療效果分別為59.31%、46.11%，保護(hù)效果較為明顯。

2.2 枯茗酸對(duì)小麥白粉病藥效的試驗(yàn)結(jié)果

以噴霧法測(cè)定了枯茗酸在濃度為0.5 g·L-1、1 g·L-1情況下對(duì)小麥白粉病菌的藥效反應(yīng)，同時(shí)設(shè)置清水、溶劑、藥劑(15%三銼酮可濕性粉劑)進(jìn)行對(duì)照，結(jié)果見表2。

表1 枯茗酸對(duì)番茄灰霉病菌的藥效測(cè)定結(jié)果

表2 枯茗酸對(duì)小麥白粉病的藥效測(cè)定結(jié)果

由表2可見，當(dāng)在枯茗酸的供試濃度為0.5 g·L-1時(shí)，枯茗酸對(duì)小麥白粉病的保護(hù)及治療藥效分別為66.20%、50.89%；在枯茗酸的供試濃度為1 g?L-1時(shí)，對(duì)小麥白粉病的保護(hù)及治療藥效達(dá)到了70.91%、61.03%。證明枯茗酸對(duì)小麥白粉病的保護(hù)作用較好。

3 結(jié)論與討論

近年來(lái)，由于人們過(guò)度且不理性的使用化學(xué)類農(nóng)藥，使得我們的生存環(huán)境受到了較大的影響，正因如此，植物源農(nóng)藥成為了國(guó)內(nèi)外研究發(fā)展的趨勢(shì)?？蒈崾菑淖稳环N子中分離得到的活性物，屬于天然化合物，具有抑菌普廣、低毒、不易殘留等優(yōu)點(diǎn)，符合國(guó)內(nèi)外農(nóng)藥研究發(fā)展的趨勢(shì)。

通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，枯茗酸對(duì)番茄灰霉病均有一定的保護(hù)和治療作用，其中保護(hù)作用達(dá)到了59.31%，效果較好；采用噴霧法使用枯茗酸對(duì)小麥白粉病也有治療和作用，保護(hù)效果較好，達(dá)到了70.91%，同時(shí)本實(shí)驗(yàn)還采用了灌根法對(duì)小麥白粉病進(jìn)行施藥，但治療和保護(hù)作用藥效均不明顯，說(shuō)明枯茗酸內(nèi)吸性效果不強(qiáng)。

綜上所述，枯茗酸具有較好的生物活性，且抑菌普廣，需進(jìn)一步研究開發(fā)，提高其抑菌活性。