• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    養(yǎng)殖密度對(duì)墨吉明對(duì)蝦腸道和生物絮團(tuán)菌群的影響

    2020-11-11 00:01:46王博秦海鵬廖栩崢胡世康趙吉臣何子豪韓學(xué)明陳兆明孫成波
    關(guān)鍵詞:絮團(tuán)對(duì)蝦菌群

    王博,秦海鵬,廖栩崢,胡世康,趙吉臣,何子豪,韓學(xué)明,陳兆明,孫成波

    養(yǎng)殖密度對(duì)墨吉明對(duì)蝦腸道和生物絮團(tuán)菌群的影響

    王博,秦海鵬,廖栩崢,胡世康,趙吉臣,何子豪,韓學(xué)明,陳兆明,孫成波*

    (廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院,廣東 湛江 524088)

    運(yùn)用Miseq高通量測(cè)序技術(shù),分析高、中、低3種養(yǎng)殖密度(700、300、100尾/m3)下墨吉明對(duì)蝦腸道和其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)的菌群結(jié)構(gòu)。結(jié)果顯示:對(duì)蝦腸道菌群中,高密度組的豐富度和多樣性均最高,豐富度隨放養(yǎng)密度的增大而增加,而在生物絮團(tuán)菌群中,高密度組的豐富度最低;在門水平上,腸道和絮團(tuán)樣本菌群均以變形菌門(相對(duì)豐度49.25%~80.33%)、放線菌門、擬桿菌門、綠彎菌門為主,但豐度差異較大;在屬水平上,優(yōu)勢(shì)菌屬的組成和所占比例明顯不同,梭菌屬、、、、僅在腸道樣本中存在,僅在絮團(tuán)樣本中存在;腸道樣本中,中密度組弧菌屬的相對(duì)豐度最小,為5.23%,高密度組弧菌屬的相對(duì)豐度最大,為23.39%,絮團(tuán)樣本中,低密度組弧菌屬的相對(duì)豐度最大,為16.15%,中、高密度弧菌屬的相對(duì)豐度均較小,分別為5.51%和4.20%;隨養(yǎng)殖密度增大,腸道樣本中擬桿菌屬的相對(duì)豐度減小,分別為1.36%、0.41%、0.02%,而不同密度絮團(tuán)樣本擬桿菌屬的相對(duì)豐度差異不明顯??梢姡镄鯃F(tuán)養(yǎng)殖模式下,養(yǎng)殖密度對(duì)墨吉明對(duì)蝦的腸道和絮團(tuán)菌群的影響較大。

    墨吉明對(duì)蝦;密度脅迫;生物絮團(tuán);腸道;菌群結(jié)構(gòu)

    墨吉明對(duì)蝦()俗稱為大明蝦、黃蝦,為廣鹽性、暖水性種類,在南方沿海地區(qū)的捕撈和養(yǎng)殖業(yè)中具有十分重要的經(jīng)濟(jì)地位。

    生物絮團(tuán)包括藻類、真菌、原生動(dòng)物、輪蟲和線蟲的聚集體,在生物絮團(tuán)培養(yǎng)系統(tǒng)中,化學(xué)自養(yǎng)和異養(yǎng)細(xì)菌參與生物絮團(tuán)的形成[1-3]。此外,微生物絮凝物也被用作動(dòng)物的食物,誘導(dǎo)蝦生長(zhǎng)性能的提高[4-5]。除了控制水質(zhì)和作為養(yǎng)殖生物的補(bǔ)充食物來(lái)源外,在生物絮凝系統(tǒng)中建立的細(xì)菌群落可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)食物和空間來(lái)抑制病原體的增殖[6]。然而,微生物群落也可能由致病菌和機(jī)會(huì)性細(xì)菌組成[7],而水生環(huán)境可影響微生物群的組成和豐度[8]。對(duì)于生物絮團(tuán)培養(yǎng)系統(tǒng)來(lái)說(shuō),了解絮凝過(guò)程中涉及的微生物機(jī)制,對(duì)控制病原微生物非常重要。

    由于擁擠引起的應(yīng)激反應(yīng),高放養(yǎng)密度會(huì)影響蝦的生長(zhǎng)和存活[9],導(dǎo)致成活率低、產(chǎn)量低、水質(zhì)差和病原體暴發(fā)等[10-13]。放養(yǎng)密度的增加,意味著飼用的飼料增加[14],隨之而來(lái)的是培養(yǎng)水中顆粒有機(jī)物質(zhì)的增加,這將影響微生物的形成和聚集。對(duì)于采用生物絮團(tuán)培養(yǎng)系統(tǒng)的生產(chǎn)系統(tǒng),更有必要確定合適的養(yǎng)殖密度和系統(tǒng)的負(fù)載能力。

    本研究中,以墨吉明對(duì)蝦為試驗(yàn)對(duì)象,研究不同養(yǎng)殖密度對(duì)生物絮團(tuán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中墨吉明對(duì)蝦的腸道和絮團(tuán)菌群結(jié)構(gòu)的影響,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試對(duì)蝦為廣東海洋大學(xué)東海島海洋生物研究基地自行繁育的墨吉明對(duì)蝦。選取附肢完整、健康無(wú)損傷的活潑個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)。對(duì)蝦平均體長(zhǎng)(5.85±0.35) cm,體質(zhì)量(2.46±0.39) g。

    1.2 養(yǎng)殖試驗(yàn)

    試驗(yàn)前,將選好的墨吉明對(duì)蝦置于預(yù)先充氧的桶內(nèi)暫養(yǎng)7 d。生物絮團(tuán)為筆者自行構(gòu)建的以當(dāng)?shù)厮w中菌群為主的硝化型生物絮團(tuán)。試驗(yàn)前,將絮團(tuán)水體用孔徑48 μm的濾網(wǎng)濾水濃縮,然后按試驗(yàn)要求添加到試驗(yàn)桶中。供試海水從海區(qū)抽取,通過(guò)沉淀、砂濾、消毒處理后使用,保持水溫(29.4±0.71) ℃,溶解氧質(zhì)量濃度大于5 mg/L,鹽度28.5±0.26,水體持續(xù)均勻充氣。試驗(yàn)在容積0.3 m3的養(yǎng)殖桶進(jìn)行,每桶設(shè)置氣石2個(gè)。

    試驗(yàn)設(shè)低(A)、中(B)、高(C)3個(gè)養(yǎng)殖密度梯度,分別為100、300、700尾/m2。每個(gè)密度梯度重復(fù)3次。每個(gè)養(yǎng)殖桶中的實(shí)際水體為270 L,生物絮團(tuán)的添加量為20 mg/L。投喂人工配合飼料,每天定時(shí)投喂4次。試驗(yàn)期間不添加有機(jī)碳源、不換水。試驗(yàn)周期30 d。

    1.3 樣品采集

    第30天喂食后,分別于每個(gè)養(yǎng)殖桶隨機(jī)選擇5只蝦,用無(wú)菌水和75%乙醇洗滌蝦的體表,解剖后將蝦腸分離,置于1.5 mL離心管中,于-80 ℃冰箱保存,備用。用0.45 μm膜濾器收集生物絮團(tuán)樣品,于-80 ℃冰箱保存,備用。低、中、高密度的對(duì)蝦腸道樣本分別編號(hào)為SIA、SIB和SIC,生物絮團(tuán)樣本分別編號(hào)為FA、FB和FC。

    1.4 DNA提取

    采用E.Z.N.A. ?土壤試劑盒(OMEGA,US),按說(shuō)明書提取蝦腸腔內(nèi)容物和絮團(tuán)的總細(xì)菌DNA。用NanoDrop分光光度計(jì)(Thermo Fisher Scientific)測(cè)量DNA產(chǎn)量。通過(guò)擴(kuò)增細(xì)菌16S rDNA基因,評(píng)估DNA質(zhì)量(GeneAmp PCR System 9700)。

    1.5 PCR擴(kuò)增和高通量測(cè)序

    采用引物組341F(CCTAYGGGRBGCASCAG)和806R(GGACTACNNGGGTATCTAAT),PCR擴(kuò)增16S rDNA的V3-V4區(qū)域[15]。反向引物含有每個(gè)樣品獨(dú)有的6 bp錯(cuò)誤校正條形碼。由Novaseq(廣州)在Illumina Miseq平臺(tái)上進(jìn)行高通量測(cè)序。

    1.6 生物信息分析

    對(duì)獲得的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和質(zhì)量過(guò)濾,剩余的高質(zhì)量數(shù)據(jù)用于后續(xù)分析。使用UCLUST (v1.2.22q)將相似性大于97%的序列聚類為同一個(gè)操作分類單位(OTUs)[16]。運(yùn)用Mothur確定每個(gè)文庫(kù)的分類豐富度估計(jì)值和群落多樣性(v.1.37.6,http://www.mothur.org/)[17]?;贠TU豐度矩陣估計(jì)每個(gè)群落的物種豐富度。利用α多樣性指數(shù)(Chao1、ACE、Shannon和Simpson)評(píng)估社區(qū)多樣性?;贠TU標(biāo)準(zhǔn)化數(shù)據(jù),運(yùn)用QIIME(v1.9.1)進(jìn)行α和β細(xì)菌多樣性的后續(xù)分析。運(yùn)用R script (http://www.r- project.org/)和ggplot2(ggplot2.org)進(jìn)行維恩圖和相對(duì)豐度分析。利用線性判別分析(LDA)效應(yīng)大小確定樣本組之間差異相對(duì)較大的微生物類群。

    1.7 數(shù)據(jù)處理

    運(yùn)用Excel 2010整理數(shù)據(jù);運(yùn)用SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 供試樣品的物種分類

    從表1可知,3個(gè)養(yǎng)殖密度的18個(gè)樣品共產(chǎn)生686 521條序列。腸道樣品中,SIC中OTUs最多。絮團(tuán)樣本中,F(xiàn)B中OTUs最多。

    表1 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中的生物絮團(tuán)樣本的可操作分類單元數(shù)

    維恩圖分析結(jié)果表明:3個(gè)密度組對(duì)蝦腸道樣品共有的OTUs有333個(gè)(占1.8%),SIA獨(dú)有的OTUs有4 909個(gè)(占27.0%),SIB獨(dú)有的OTUs有4 605個(gè)(占25.3%),SIC獨(dú)有的OTUs有6 555個(gè)(占36.1%);3個(gè)密度組生物絮團(tuán)樣品共有的OTUs有1 536個(gè)(占11.5%),F(xiàn)A獨(dú)有的OTU有4 841個(gè)(占36.3%),F(xiàn)B獨(dú)有的OTUs有2 553個(gè)(占19.1%),F(xiàn)C獨(dú)有的OTUs有2 496個(gè)(占18.7%)。

    2.2 供試樣品的細(xì)菌豐富度和多樣性指數(shù)

    從表2可知,隨養(yǎng)殖密度的增大,墨吉明對(duì)蝦腸道菌群的豐富度Chao 1和Ace指數(shù)與多樣性Shannon指數(shù)均逐漸增加,而多樣性Simpson指數(shù)呈先減后增的趨勢(shì),SIC的4個(gè)指數(shù)均為最高;生物絮團(tuán)菌群中,F(xiàn)C的豐富度Chao 1和Ace指數(shù)均最小,F(xiàn)B的多樣性Shannon和Simpson指數(shù)最大。

    表2 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)的菌群豐富度和多樣性指數(shù)

    2.3 供試樣品的微生物菌群結(jié)構(gòu)組成

    墨吉明對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)樣品之間的菌群結(jié)構(gòu)相似,組成比例上存在一定的差異,共檢測(cè)出43個(gè)細(xì)菌門。從表3可知,菌群主要由13個(gè)細(xì)菌門組成,其中,變形菌門的相對(duì)豐度最高,為49.25%~80.33%,放線菌門和擬桿菌門的相對(duì)豐度較高;隨養(yǎng)殖密度增大,腸道樣本變形菌門的相對(duì)豐度增加,而絮團(tuán)樣本中變形菌門的相對(duì)豐度減??;隨養(yǎng)殖密度增大,腸道樣本放線菌門的相對(duì)豐度先減后增,絮團(tuán)樣本放線菌門的相對(duì)豐度減小,腸道和絮團(tuán)樣本中均是低密度組的相對(duì)豐度最大;腸道樣本中綠彎菌門、酸桿菌門和擬桿菌門的相對(duì)豐度均是低密度組的最大,而絮團(tuán)樣本中這3個(gè)門的相對(duì)豐度均是高密度組的最大;腸道和絮團(tuán)樣本硝化螺旋菌門的相對(duì)豐度都隨養(yǎng)殖密度增大而增加。

    表3 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門及其相對(duì)豐度

    樣本相對(duì)豐度/% 衣原體芽單胞菌門硝化螺旋菌門泉古菌門螺旋體藍(lán)藻門浮霉菌門 SIA——0.25——0.4— SIB——0.870.01—3.120.16 SIC—0.351.203.020.030.530.05 FA0.010.571.613.080.041.650.24 FB0.051.002.283.890.082.540.47 FC0.011.122.777.230.281.240.44

    屬水平上,墨吉明對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)樣本中共檢測(cè)出193個(gè)細(xì)菌屬。從表4可知,菌群主要由CandidatusAquiluna、擬桿菌屬()、大腸埃希菌屬()、梭菌屬()、鏈球菌屬()、、弧菌屬()、、發(fā)光菌屬()、、、、等細(xì)菌屬組成,除SIB外,其他樣本中均是弧菌屬的相對(duì)豐度最高;腸道和絮團(tuán)樣本中,優(yōu)勢(shì)菌屬的組成和所占比例明顯不同,梭菌屬、、、、只在腸道樣本中存在,只在絮團(tuán)樣本中存在;隨養(yǎng)殖密度增大,腸道樣本擬桿菌屬的相對(duì)豐度減小,絮團(tuán)樣本擬桿菌屬的相對(duì)豐度差異不明顯;腸道樣本中,中密度組的弧菌屬的相對(duì)豐度最小,高密度組的最大,而絮團(tuán)樣本弧菌屬的相對(duì)豐度以低密度組的較大,中、高密度組的較小,且兩者差異不明顯;腸道和絮團(tuán)樣本發(fā)光桿菌屬的相對(duì)豐度的變化趨勢(shì)相反,腸道樣本中、高密度組的發(fā)光桿菌屬的相對(duì)豐度較高,而絮團(tuán)樣本中、高密度組的較低。

    表4 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌屬及其相對(duì)豐度

    樣本相對(duì)豐度/% Faecalibacterium發(fā)光菌屬CoccinimonasRhodovulumBlautiaRuegeria SIA0.01 1.34—2.87—0.27 SIB3.7235.95——0.014.85 SIC0.0210.65——0.981.60 FA— 2.170.02——3.23 FB— 0.690.02——3.56 FC— 0.440.49——2.26

    如表5所示,腸道樣本中,SIA、SIB、SIC的Lefse的LDA評(píng)分顯示均為1,與SIA相比,SIB、SIC中各有1個(gè)分類群顯著增加和1個(gè)分類群顯著減少(<0.05);絮團(tuán)樣本中,F(xiàn)A、FB、FC的Lefse的LDA評(píng)分顯示分別為1、5、5,與FA相比,F(xiàn)B、FC中各有5個(gè)分類群顯著增加和1個(gè)分類群顯著減少(<0.05)。如圖1所示,Lefse的分支圖分別聚集在SIA、SIB、SIC、FA、FB、FC組中的分類群為2、2、4、7、13、17個(gè)。

    表5 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)樣本的微生物群落相對(duì)豐度的群間變異(LDA值)

    表中僅展示了LDA值大于4的物種。

    圖1 墨吉明對(duì)蝦的腸道及其養(yǎng)殖系統(tǒng)中生物絮團(tuán)樣本微生物群落相對(duì)豐度的群間變異(Cladogram)

    3 結(jié)論與討論

    在生物絮團(tuán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中,以細(xì)菌為主的微生物群落具有特殊作用。本研究中,通過(guò)高通量測(cè)序,從不同養(yǎng)殖密度組的對(duì)蝦腸道和其養(yǎng)殖系統(tǒng)中的生物絮團(tuán)樣本中共檢測(cè)出43個(gè)細(xì)菌門193個(gè)細(xì)菌屬。對(duì)蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)與養(yǎng)殖環(huán)境微生物菌群結(jié)構(gòu)密切相關(guān),環(huán)境因素決定了微生物群落的結(jié)構(gòu)和功能[18]。研究表明,微生物群落的演替受碳氮比[19]、化學(xué)需氧量[20]、鹽度脅迫[21-22]的影響。本研究中,墨吉明對(duì)蝦腸道菌群中,高密度組的豐富度和多樣性均最高,且豐富度隨放養(yǎng)密度的增大而增加;生物絮團(tuán)菌群中,以高密度組的豐富度最低。這可能是由于放養(yǎng)密度的增加,飼喂量隨之增加,水體中的代謝產(chǎn)物增多,從而導(dǎo)致了生物絮團(tuán)培養(yǎng)系統(tǒng)的水體中與微生物形成和聚集有關(guān)的顆粒狀有機(jī)物的增加。此外,生物絮團(tuán)可作為對(duì)蝦額外的食物來(lái)源[4-5],是一種益生菌,對(duì)水質(zhì)和水生動(dòng)物的健康有益[23-24],進(jìn)而影響到對(duì)蝦腸道菌群的豐度。

    腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)和功能對(duì)蝦宿主的生理、免疫、代謝和健康起重要作用[25-28],腸道細(xì)菌群落的細(xì)微變化還會(huì)對(duì)宿主表型產(chǎn)生影響[29-30]。不同的環(huán)境因素,如養(yǎng)殖種類、水質(zhì)、飲食和種群密度的差異都會(huì)影響腸道菌群的多樣性[31-34]。裴鵬兵等[35]研究發(fā)現(xiàn),凡納濱對(duì)蝦腸道菌群結(jié)構(gòu)及多樣性與添加和不添加生物進(jìn)水柵有著密切關(guān)系。本研究中,對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)樣本的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)在不同處理之間存在差異,但變形菌門的相對(duì)豐度均為最高。從南美白對(duì)蝦和其他水生動(dòng)物中也發(fā)現(xiàn)了變形菌[36-38]。變形菌和擬桿菌對(duì)有機(jī)物降解至關(guān)重要,它們通常是活性污泥系統(tǒng)和生物絮團(tuán)養(yǎng)殖系統(tǒng)中的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌門[39-40]。本研究中,絮團(tuán)樣本變形菌門和擬桿菌門的占比也較高。硝化螺旋菌[41]和泉古菌[42]對(duì)水體中氨氮的轉(zhuǎn)化起到非常重要的作用。本研究中,對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)樣本中的硝化螺旋菌門和泉古菌門在不同密度組呈現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì),可能是絮團(tuán)菌群間接影響對(duì)蝦腸道菌群所致;對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)樣本中變形菌門、酸桿菌門和擬桿菌門在不同密度組呈現(xiàn)出相反的變化趨勢(shì)??梢?,不能單純的以環(huán)境中菌群相對(duì)豐度的高低去判定對(duì)蝦腸道菌群的相對(duì)豐度,對(duì)于這種變化還需要進(jìn)一步深入研究。有研究[43-44]表明,弧菌屬是對(duì)蝦腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌屬,不同的養(yǎng)殖模式、對(duì)蝦品種和養(yǎng)殖環(huán)境下均有弧菌屬存在。本研究中,弧菌屬為對(duì)蝦腸道和絮團(tuán)內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌屬,中密度組樣本中弧菌屬的相對(duì)豐度較小,表明適當(dāng)增加養(yǎng)殖密度可以減小對(duì)蝦腸道中弧菌的相對(duì)豐度。發(fā)光桿菌屬在海水養(yǎng)殖中廣泛存在,參與有機(jī)物的降解[45-46],且其代謝產(chǎn)物有一定的抗菌活性[47],可能參與養(yǎng)殖生物的有機(jī)物消化和病原防御過(guò)程。本研究中,腸道樣本與絮團(tuán)樣本的發(fā)光桿菌屬相對(duì)豐度的變化趨勢(shì)相反。低密度組腸道發(fā)光桿菌屬的相對(duì)豐度可能與絮團(tuán)樣本中發(fā)光桿菌屬的廣泛存在有關(guān),而中、高密度組對(duì)蝦腸道高豐度的發(fā)光桿菌可能是機(jī)體適應(yīng)性抵抗環(huán)境壓力的表現(xiàn)。

    [1] DE SCHRYVER P,CRAB R,DEFOIRDT T,et al.The basics of bio-flocs technology:the added value for aquaculture[J].Aquaculture,2008,277(3/4):125-137.

    [2] AVNIMELECH Y.Carbon/nitrogen ratio as a control element in aquaculture systems[J].Aquaculture,1999,176(3/4):227-235.

    [3] EMERENCIANO M G C,MARTíNEZ-CóRDOVA L R, MARTíNEZ-PORCHAS M,et al.Biofloc technology (BFT):a tool for water quality management in aquaculture [M]//HLANGANANI T.Water Quality.London:InTech,2017:91-109.

    [4] BURFORD M A,THOMPSON P J,MCINTOSH R P,et al.The contribution of flocculated material to shrimp () nutrition in a high-intensity,zero- exchange system[J].Aquaculture,2004,232 (1/2/3/4):525-537.

    [5] KIM M S,MIN E,KIM J H,et al.Growth performance and immunological and antioxidant status of Chinese shrimp,reared in bio-floc culture system using probiotics[J].Fish & Shellfish Immunology,2015,47(1):141-146.

    [6] CRAB R,LAMBERT A,DEFOIRDT T,et al.The application of bioflocs technology to protect brine shrimp() from pathogenic[J].Journal of Applied Microbiology,2010,109(5):1643-1649.

    [7] SCHULZE A D,ALABI A O,TATTERSALL SHELDRAKE A R,et al.Bacterial diversity in a marine hatchery:balance between pathogenic and potentially probiotic bacterial strains[J].Aquaculture,2006,256(1/2/3/4):50-73.

    [8] WONG S,RAWLS J F.Intestinal microbiota compositionin fishes is influenced by host ecology and environment[J]. Molecular Ecology,2012,21(13):3100-3102.

    [9] MENA-HERRERA A,GUTIERREZ-CORONA C,LINAN-CABELLO M,et al.Effects of stocking densities on growth of the Pacific white shrimp() in earthen ponds[J].Israeli Journal of Aquaculture-Bamidgeh,2006,58(3):205-213.

    [10] LIN Y C,CHEN J C,CHEN Y Y,et al.Crowding of white shrimpdepresses their immunity to and resistance againstand white spot syndrome virus[J].Fish & Shellfish Immunology,2015,45(1):104-111.

    [11] 李玉全,王仁杰,姜令緒.密度脅迫對(duì)日本囊對(duì)蝦生長(zhǎng)和水環(huán)境的影響[J].海洋科學(xué),2013,37(10):53-57. LI Y Q,WANG R J,JIANG L X.Effects of density-stress on water quality and growth of[J]. Marine Sciences,2013,37(10):53-57.

    [12] SHAKIR C,LIPTON A P,MANILAL A,et al. Effect of stocking density on the survival rate and growth performance in[J].Journal of Basic & Applied Sciences,2014,10:231-238.

    [13] LI Y Q,LI J,WANG Q Y.The effects of dissolved oxygen concentration and stocking density on growth and non-specific immunity factors in Chinese shrimp,[J].Aquaculture,2006,256(12/3/4):608-616.

    [14] KRUMMENAUER D,PEIXOTO S,CAVALLI R O,et al.Superintensive culture of white shrimp,,in a biofloc technology system in southern Brazil at different stocking densities[J].Journal of the World Aquaculture Society,2011,42(5):726-733.

    [15] QIN J J,LI R Q,RAES J,et al.A human gut microbial gene catalogue established by metagenomic sequencing[J]. Nature,2010,464:59-65.

    [16] EDGAR R C,HAAS B J,CLEMENTE J C,et al. UCHIME improves sensitivity and speed of chimera detection[J].Bioinformatics,2011,27(16):2194-2200.

    [17] SCHLOSS P D,WESTCOTT S L,RYABIN T,et al. Introducing mothur:open-source,platform-independent,community-supported software for describing and comparing microbial communities[J].Applied and Environmental Microbiology,2009,75(23):7537-7541.

    [18] ALLISON S D,MARTINY J B H.Resistance,resilience,and redundancy in microbial communities[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences (PNAS),2008,105(Supplement 1):11512-11519.

    [19] PANIGRAHI A,SARANYA C,SUNDARAM M,et al.Carbon:Nitrogen(C:N) ratio level variation influences microbial community of the system and growth as well as immunity of shrimp() in biofloc based culture system[J].Fish & Shellfish Immunology,2018,81:329-337.

    [20] ZHANG D M,WANG X,XIONG J B,et al. Bacterioplankton assemblages as biological indicators of shrimp health status[J].Ecological Indicators,2014,38:218-224.

    [21] YANG J,MA L A,JIANG H C,et al.Salinity shapes microbial diversity and community structure in surface sediments of the Qinghai-Tibetan Lakes[J].Scientific Reports,2016,6:25078.

    [22] KIRCHMAN D L,COTTREL M T,DITULLIO G R. Shaping of bacterial community composition and diversity by phytoplankton and salinity in the Delaware Estuary,USA[J].Aquatic Microbial Ecology,2017,78(2):93-106.

    [23] MORIARTY D J W.The role of microorganisms in aquaculture ponds[J].Aquaculture,1997,151(1/2/3/4):333-349.

    [24] MCINTOSH R P.Changing paradigms in shrimp farming:III.pond design and operation considerations[J]. Global Aquaculture Alliance,2000(2):42-45.

    [25] MARTIN F P J,WANG Y L,SPRENGER N,et al. Top-down systems biology integration of conditional prebiotic modulated transgenomic interactions in a humanized microbiome mouse model[J].Molecular Systems Biology,2008,4:205.

    [26] YAP I K S,LI J V,SARIC J,et al.Metabonomic and microbiological analysis of the dynamic effect of vancomycin-induced gut microbiota modification in the mouse[J].Journal of Proteome Research,2008,7(9):3718-3728.

    [27] RAMAKRISHNA B S.Role of the gut microbiota in human nutrition and metabolism[J].Journal of Gastro- enterology and Hepatology,2013,28:9-17.

    [28] XIONG J B,DAI W F,ZHU J Y,et al.The underlying ecological processes of gut microbiota among cohabitating retarded,overgrown and normal shrimp[J]. Microbial Ecology,2017,73(4):988-999.

    [29] HOLMES E,NICHOLSON J.Variation in gut microbiota strongly influences individual rodent phenotypes[J]. Toxicological Sciences,2005,87(1):1-2.

    [30] ROHDE C M,WELLS D F,ROBOSKY L C,et al. Metabonomic evaluation of Schaedler altered microflora rats[J].Chemical Research in Toxicology,2007,20(10):1388-1392.

    [31] WU S G,WANG G T,ANGERT E R,et al. Composition,diversity,and origin of the bacterial community in grass carp intestine[J].PLoS One,2012,7(2):e30440.

    [32] KIM D H,KIM D Y.Microbial diversity in the intestine of olive flounder()[J]. Aquaculture,2013,414/415:103-108.

    [33] RAMíREZ C,ROMERO J.Fine flounder() microbiome showed important differences between wild and reared specimens[J].Frontiers in Microbiology,2017,8:271.

    [34] 王元,周俊芳,韋信賢,等.海水和淡水養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦腸道和鰓的菌群結(jié)構(gòu)分析[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2018,44(2):198-203. WANG Y,ZHOU J F,WEI X X,et al.Microbial community structure analysis of intestine and gill ofin seawater and freshwater[J]. Journal of Hunan Agricultural University(Natural Sciences),2018,44(2):198-203.

    [35] 裴鵬兵,吳潔瓊,梁宏豪,等.生物凈水柵對(duì)凡納濱對(duì)蝦腸道菌群組成的影響[J].水產(chǎn)科學(xué),2018,37(3):301-308. PEI P B,WU J Q,LIANG H H,et al.Effects of biological water purification grid on intestinal flora composition of Pacific white leg shrimp[J].Fisheries Science,2018,37(3):301-308.

    [36] RUNGRASSAMEE W,KLANCHUI A,MAIBUN- KAEW S,et al.Characterization of intestinal bacteria in wild and domesticated adult black tiger shrimp()[J].PLoS One,2014,9(3):e91853.

    [37] SUO Y T,LI E C,LI T Y,et al.Response of gut health and microbiota to sulfide exposure in pacific white shrimp[J].Fish & Shellfish Immunology,2017,63:87-96.

    [38] ZENG S Z,HUANG Z J,HOU D W,et al.Composition,diversity and function of intestinal microbiota in Pacific white shrimp() at different culture stages[J].PeerJ,2017,5:e3986.

    [39] HU M,WANG X H,WEN X H,et al.Microbial community structures in different wastewater treatment plants as revealed by 454-pyrosequencing analysis[J]. Bioresource Technology,2012,117:72-79.

    [40] ZHAO P,HUANG J,WANG X H,et al.The application of bioflocs technology in high-intensive,zero exchange farming systems of[J]. Aqua- culture,2012,354/355:97-106.

    [41] SLIEKERS A O,DERWORT N,GOMEZ J L C,et al. Completely autotrophic nitrogen removal over nitrite in one single reactor[J].Water Research,2002,36(10):2475-2482.

    [42] CHOUARI R,GUERMAZI S,SGHIR A.Co-occurence of Crenarchaeota,Thermoplasmata and methanogens in anaerobic sludge digesters[J].World Journal of Microbiology & Biotechnology,2015,31(5):805-812.

    [43] 李玉宏,柴鵬程,胡修貴,等.應(yīng)用RFLP和DGGE技術(shù)分析工廠化養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦腸道微生物群落特征[J].漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展,2014,35(2):83-89. LI Y H,CHAI P C,HU X G,et al.Analysis of intestinal microecology ofin industrial aquaculture by RFLP and DGGE techniques[J].Progress in Fishery Sciences,2014,35(2):83-89.

    [44] WANG X H,LI H R,ZHANG X H,et al.Microbial flora in the digestive tract of adult penaeid shrimp()[J].Journal of Ocean University of Qingdao,2000,30(3):493-498.

    [45] 薛超波,王國(guó)良,金珊.灘涂貝類養(yǎng)殖環(huán)境中細(xì)菌生態(tài)分布的初步研究[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2005,15(10):1191-1193. XUE C B,WANG G L,JIN S.The preliminary study on the bacteria ecological distribution in the culture environment of marine interdial shellfish[J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology,2005,15(10):1191-1193.

    [46] 莫照蘭,王祥紅,于勇,等.蝦池有機(jī)污染物降解細(xì)菌的篩選[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào),2000,24(4):334-338. MO Z L,WANG X H,YU Y,et al.Selection of organic-pollutants-degrading bacteria in shrimp ponds[J]. Journal of Fisheries of China,2000,24(4):334-338.

    [47] 鄭立,林偉,嚴(yán)小軍,等.海洋細(xì)菌抗菌和細(xì)胞毒活性的初步研究[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2004,15(9):1633-1636. ZHENG L,LIN W,YAN X J,et al.A primary study on antimicrobial and cytotoxic activity of marine bacteria[J]. Chinese Journal of Applied Ecology,2004,15(9):1633-1636.

    Effects of stocking density on bacterial community characterization of biofloc and intestine of

    WANG Bo, QIN Haipeng, LIAO Xuzheng, HU Shikang, ZHAO Jichen, HE Zihao, HAN Xueming, CHEN Zhaoming, SUN Chengbo*

    (Department of Fisheries, Guangdong Ocean University, Zhanjiang, Guangdong 524088, China)

    Using the high-throughput sequencing technology of Miseq, the microbial structure of the intestine and water biofloc ofat high, medium and low aquaculture densities(700/m3, 300/m3, 100/m3) were analyzed. The results showed that among the shrimp intestinal flora, the high-density group had the highest abundance and diversity, and the abundance increased over the increase of stocking density, while among the biofloc flora, the high-density group had the lowest abundance. The intestinal and biofloc flora samples were mainly composed of Proteobacteria(relative abundant 49.25%~80.33%), Actinobacteria, Bacteroides and Chloroflexi at phylum level, but the abundance was different. At genus level, the composition and proportion of dominant bacteria were significantly different.,,,, andonly exist in intestinal samples, andonly exist in biofloc samples. The relative abundance ofwas relatively large,abundance of intestinal sample was the smallest(5.23%) in medium density group and the largest(23.39%) in high density group; the low-density group of biofloc samples was the largest(16.15%), and the medium and high-density samples were both smaller, the abundance was 5.51% and 4.20%, respectively. The abundance ofin the intestinal samples decreased with the increase of stocking density, and the abundance was 1.36%, 0.41%, 0.02%, respectively. The abundance difference ofin different culture density biofloc samples was not significant. It can be seen that under the bioflocculation mode, the density of culture had a greater influence on bacterial community characterization of biofloc and intestine of.

    ; stocking density; biofloc; intestine; bacterial community

    S968.22;S917.1

    A

    1007-1032(2020)05-0608-08

    王博,秦海鵬,廖栩崢,胡世康,趙吉臣,何子豪,韓學(xué)明,陳兆明,孫成波.養(yǎng)殖密度對(duì)墨吉明對(duì)蝦腸道和生物絮團(tuán)菌群的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2020,46(5):608-615.

    WANG B, QIN H P, LIAO X Z, HU S K, ZHAO J C, HE Z H, HAN X M, CHEN Z M, SUN C B. Effects of stocking density on bacterial community characterization of biofloc and intestine of[J]. Journal of Hunan Agricultural University(Natural Sciences), 2020, 46(5): 608-615.

    http://xb.hunau.edu.cn

    2019-10-17

    2019-12-18

    2019年度“沖一流”廣東省財(cái)政專項(xiàng)資金項(xiàng)目(231419025);防城港市科技計(jì)劃項(xiàng)目(防科AD19008017)

    王博(1993—),男,甘肅渭源人,碩士研究生,主要從事甲殼類動(dòng)物遺傳育種與增養(yǎng)殖研究,845358136@qq.com;*通信作者,孫成波,教授,主要從事甲殼類動(dòng)物遺傳育種與增養(yǎng)殖研究,scb248@126.com

    責(zé)任編輯:鄒慧玲

    英文編輯:柳正

    猜你喜歡
    絮團(tuán)對(duì)蝦菌群
    對(duì)蝦養(yǎng)殖弱勢(shì)群體的管理
    “云雀”還是“貓頭鷹”可能取決于腸道菌群
    中老年保健(2022年2期)2022-08-24 03:20:50
    對(duì)蝦吃料慢的原因分析和處理
    基于FBRM和PVM技術(shù)的尾礦濃密過(guò)程絮團(tuán)演化規(guī)律
    對(duì)蝦免疫增強(qiáng)劑研究進(jìn)展
    對(duì)蝦常見環(huán)境性疾病的防治
    “水土不服”和腸道菌群
    科學(xué)(2020年4期)2020-11-26 08:27:06
    絮團(tuán)稠化對(duì)全尾砂濃密性能的影響
    一種改進(jìn)的聚合模型在污泥絮凝-沉降模擬中的應(yīng)用
    肉牛剩余采食量與瘤胃微生物菌群關(guān)系
    自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产精品免费视频内射| 国产精品一二三区在线看| 久久狼人影院| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产成人91sexporn| 久久青草综合色| 韩国高清视频一区二区三区| 深夜精品福利| 成人黄色视频免费在线看| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 少妇被粗大的猛进出69影院| 在线看a的网站| 又大又黄又爽视频免费| 久久精品久久精品一区二区三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产亚洲欧美在线一区二区| 一区在线观看完整版| 亚洲国产精品一区三区| 久久人人爽人人片av| 午夜福利乱码中文字幕| 男女免费视频国产| 黑人猛操日本美女一级片| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产真人三级小视频在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 操出白浆在线播放| 久久青草综合色| 婷婷色av中文字幕| 五月开心婷婷网| 成年人黄色毛片网站| 欧美精品av麻豆av| 亚洲精品国产区一区二| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 亚洲,一卡二卡三卡| 婷婷成人精品国产| 性高湖久久久久久久久免费观看| e午夜精品久久久久久久| 97在线人人人人妻| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 一区二区三区精品91| 国产精品 欧美亚洲| 在线 av 中文字幕| 国产成人欧美在线观看 | 美女大奶头黄色视频| 一级片'在线观看视频| 热99国产精品久久久久久7| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产免费福利视频在线观看| 日韩av免费高清视频| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 亚洲成人国产一区在线观看 | 日韩制服丝袜自拍偷拍| 久久中文字幕一级| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 在现免费观看毛片| 美女午夜性视频免费| 在线看a的网站| 在线av久久热| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 日本黄色日本黄色录像| 亚洲国产av新网站| 欧美国产精品va在线观看不卡| av在线老鸭窝| 男女边摸边吃奶| 成年女人毛片免费观看观看9 | 成人亚洲欧美一区二区av| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 99久久综合免费| 中文字幕高清在线视频| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲欧美激情在线| 91字幕亚洲| 波多野结衣av一区二区av| 免费看不卡的av| 黑丝袜美女国产一区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 亚洲熟女精品中文字幕| 狂野欧美激情性xxxx| 久久久久久久久免费视频了| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 久久久久久免费高清国产稀缺| 丝袜喷水一区| 精品福利永久在线观看| 人人澡人人妻人| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产又色又爽无遮挡免| 国产精品国产av在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区| 日韩电影二区| 亚洲第一青青草原| 黑丝袜美女国产一区| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲av成人精品一二三区| 国产一区亚洲一区在线观看| 青青草视频在线视频观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 在线观看免费视频网站a站| 90打野战视频偷拍视频| 麻豆av在线久日| 欧美日韩福利视频一区二区| 日本一区二区免费在线视频| 国产成人91sexporn| 一本色道久久久久久精品综合| 国产精品欧美亚洲77777| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 1024视频免费在线观看| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 亚洲综合色网址| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 在现免费观看毛片| 欧美日韩亚洲高清精品| 少妇被粗大的猛进出69影院| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 满18在线观看网站| 在线观看免费日韩欧美大片| 婷婷色综合大香蕉| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 黄片播放在线免费| 一本久久精品| 婷婷成人精品国产| 一区二区日韩欧美中文字幕| 午夜福利在线免费观看网站| 麻豆av在线久日| 各种免费的搞黄视频| 高清不卡的av网站| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 高清视频免费观看一区二区| videosex国产| 永久免费av网站大全| 又大又爽又粗| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲国产欧美在线一区| 青青草视频在线视频观看| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 丝袜脚勾引网站| 91字幕亚洲| 男女床上黄色一级片免费看| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产成人av教育| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 久久久久网色| 亚洲图色成人| 国产在线视频一区二区| 18在线观看网站| 精品久久蜜臀av无| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久精品人人爽人人爽视色| 青草久久国产| 亚洲欧美清纯卡通| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 欧美黄色淫秽网站| 久久久久久免费高清国产稀缺| 午夜福利免费观看在线| 久久久精品94久久精品| 午夜视频精品福利| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲情色 制服丝袜| av线在线观看网站| 久久免费观看电影| 伦理电影免费视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美激情高清一区二区三区| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99久久人妻综合| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产av国产精品国产| 久久久国产欧美日韩av| 成年人黄色毛片网站| 一级毛片我不卡| 国产午夜精品一二区理论片| 精品熟女少妇八av免费久了| 久久久久国产精品人妻一区二区| 色网站视频免费| 欧美另类一区| 97在线人人人人妻| 亚洲熟女精品中文字幕| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲情色 制服丝袜| 精品人妻一区二区三区麻豆| 老鸭窝网址在线观看| 高潮久久久久久久久久久不卡| 日本91视频免费播放| 国产成人精品无人区| 91老司机精品| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区国产| 精品国产乱码久久久久久男人| 搡老乐熟女国产| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 中文欧美无线码| 欧美人与性动交α欧美软件| 大香蕉久久网| 啦啦啦在线观看免费高清www| 性色av一级| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| av在线播放精品| 亚洲国产看品久久| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 国产精品免费视频内射| 夫妻性生交免费视频一级片| 日本av手机在线免费观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 只有这里有精品99| 老司机在亚洲福利影院| 国产一区二区激情短视频 | 国产黄色视频一区二区在线观看| 色94色欧美一区二区| 免费av中文字幕在线| 老熟女久久久| 亚洲天堂av无毛| 成年人午夜在线观看视频| 日本黄色日本黄色录像| 中国国产av一级| 午夜福利视频在线观看免费| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲国产精品成人久久小说| 老司机影院毛片| 久久午夜综合久久蜜桃| 嫩草影视91久久| 婷婷色麻豆天堂久久| 咕卡用的链子| 欧美激情 高清一区二区三区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 丰满饥渴人妻一区二区三| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 男男h啪啪无遮挡| 午夜免费男女啪啪视频观看| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 成人国产一区最新在线观看 | 在线亚洲精品国产二区图片欧美| 亚洲人成电影观看| 国产精品99久久99久久久不卡| 国产精品一区二区在线观看99| www.熟女人妻精品国产| 新久久久久国产一级毛片| 在线观看免费日韩欧美大片| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产成人精品无人区| 精品高清国产在线一区| 99国产精品免费福利视频| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 色播在线永久视频| 国产又爽黄色视频| 9热在线视频观看99| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产精品久久久久久精品古装| 免费观看人在逋| 看免费av毛片| 国产精品二区激情视频| 久久久精品94久久精品| avwww免费| 视频区图区小说| 亚洲三区欧美一区| 久久精品成人免费网站| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 另类亚洲欧美激情| 一本色道久久久久久精品综合| 国产高清视频在线播放一区 | 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 永久免费av网站大全| netflix在线观看网站| 久久av网站| 一边亲一边摸免费视频| 男女床上黄色一级片免费看| 伦理电影免费视频| 在线观看人妻少妇| 亚洲伊人久久精品综合| 在线观看www视频免费| 国产成人精品无人区| netflix在线观看网站| 国产精品二区激情视频| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲精品一二三| 高清av免费在线| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 成年人黄色毛片网站| 黄色视频在线播放观看不卡| 99国产精品一区二区蜜桃av | 欧美精品人与动牲交sv欧美| 在线 av 中文字幕| 久久精品国产亚洲av高清一级| 色播在线永久视频| 90打野战视频偷拍视频| 精品少妇内射三级| 国产一区二区激情短视频 | 蜜桃国产av成人99| 国产精品成人在线| 一边摸一边做爽爽视频免费| 日韩av不卡免费在线播放| 国产精品久久久久成人av| 女人久久www免费人成看片| 欧美久久黑人一区二区| 国产一卡二卡三卡精品| 久久久精品94久久精品| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲精品乱久久久久久| 无遮挡黄片免费观看| 国产成人av教育| 飞空精品影院首页| 99精品久久久久人妻精品| 亚洲熟女毛片儿| av网站免费在线观看视频| 日韩免费高清中文字幕av| 久久鲁丝午夜福利片| 久久久久国产一级毛片高清牌| 午夜福利影视在线免费观看| 欧美久久黑人一区二区| 欧美 日韩 精品 国产| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 视频区图区小说| 欧美日韩精品网址| 少妇被粗大的猛进出69影院| 后天国语完整版免费观看| 精品卡一卡二卡四卡免费| 免费黄频网站在线观看国产| 高清黄色对白视频在线免费看| www.精华液| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲综合色网址| 国产精品国产三级国产专区5o| 亚洲久久久国产精品| 色婷婷av一区二区三区视频| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 亚洲视频免费观看视频| 人人妻人人澡人人看| 女性被躁到高潮视频| 亚洲男人天堂网一区| 亚洲免费av在线视频| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 欧美日韩综合久久久久久| 欧美另类一区| www.自偷自拍.com| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 成年动漫av网址| 婷婷色综合大香蕉| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 爱豆传媒免费全集在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 大片电影免费在线观看免费| 欧美黑人精品巨大| 久久久精品94久久精品| a级片在线免费高清观看视频| e午夜精品久久久久久久| 精品人妻1区二区| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 嫩草影视91久久| 黄色片一级片一级黄色片| 悠悠久久av| 成人黄色视频免费在线看| 999精品在线视频| 亚洲天堂av无毛| 国产一级毛片在线| 视频区图区小说| 久久人人97超碰香蕉20202| 操出白浆在线播放| 日本五十路高清| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 丝瓜视频免费看黄片| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 乱人伦中国视频| 性少妇av在线| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 啦啦啦在线观看免费高清www| 国产免费又黄又爽又色| 国产精品 欧美亚洲| 成人午夜精彩视频在线观看| 丰满迷人的少妇在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲色图综合在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 香蕉丝袜av| 我要看黄色一级片免费的| 久久人妻熟女aⅴ| 老司机影院成人| 亚洲av欧美aⅴ国产| 九色亚洲精品在线播放| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 在线观看免费日韩欧美大片| 久久久久久人人人人人| 午夜老司机福利片| 午夜福利视频在线观看免费| 美女扒开内裤让男人捅视频| kizo精华| 免费在线观看日本一区| 国产精品一区二区在线观看99| 久久精品国产综合久久久| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲精品国产av成人精品| 国产成人精品久久久久久| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 久久久亚洲精品成人影院| 国产视频一区二区在线看| 91国产中文字幕| 国产精品久久久久久精品古装| 精品熟女少妇八av免费久了| videos熟女内射| 日韩中文字幕视频在线看片| 在线观看免费视频网站a站| 国产视频首页在线观看| 91精品三级在线观看| 国产免费视频播放在线视频| 国产亚洲精品久久久久5区| 女性被躁到高潮视频| 久久免费观看电影| 亚洲精品国产区一区二| 极品人妻少妇av视频| 国产在线观看jvid| 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲,欧美,日韩| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 亚洲中文av在线| 亚洲av片天天在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 亚洲美女黄色视频免费看| 悠悠久久av| 老司机午夜十八禁免费视频| 日本欧美视频一区| 中文字幕最新亚洲高清| 女人久久www免费人成看片| 人妻人人澡人人爽人人| 久久女婷五月综合色啪小说| 久久99热这里只频精品6学生| 男女高潮啪啪啪动态图| 黄色视频在线播放观看不卡| 亚洲人成77777在线视频| 色播在线永久视频| 在线观看一区二区三区激情| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 天堂俺去俺来也www色官网| 人成视频在线观看免费观看| 亚洲av片天天在线观看| 亚洲精品美女久久av网站| 搡老乐熟女国产| 男女无遮挡免费网站观看| 在线av久久热| 亚洲少妇的诱惑av| 精品国产乱码久久久久久小说| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 手机成人av网站| 大香蕉久久网| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 美女午夜性视频免费| 七月丁香在线播放| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 青草久久国产| 亚洲精品成人av观看孕妇| 永久免费av网站大全| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 久久精品人人爽人人爽视色| 久久影院123| 亚洲人成网站在线观看播放| av网站在线播放免费| 国产一区有黄有色的免费视频| 免费不卡黄色视频| 欧美+亚洲+日韩+国产| 观看av在线不卡| 亚洲av综合色区一区| 在线观看免费日韩欧美大片| 亚洲专区国产一区二区| 精品福利永久在线观看| 老司机影院成人| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产在视频线精品| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 涩涩av久久男人的天堂| 国产视频首页在线观看| 国产免费现黄频在线看| 下体分泌物呈黄色| 观看av在线不卡| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产视频首页在线观看| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 人妻人人澡人人爽人人| 国产黄色免费在线视频| 老熟女久久久| 激情五月婷婷亚洲| 午夜福利免费观看在线| 国产精品一区二区精品视频观看| 99热国产这里只有精品6| 丁香六月天网| 制服人妻中文乱码| 大陆偷拍与自拍| 老司机在亚洲福利影院| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产又爽黄色视频| 一级毛片女人18水好多 | 一区二区三区激情视频| 日本vs欧美在线观看视频| av欧美777| 啦啦啦在线免费观看视频4| 亚洲七黄色美女视频| 久久久久久免费高清国产稀缺| 女人精品久久久久毛片| 尾随美女入室| 中文字幕精品免费在线观看视频| 国产色视频综合| 午夜福利视频在线观看免费| 国产一区二区 视频在线| 最近中文字幕2019免费版| 亚洲五月色婷婷综合| 女警被强在线播放| 日韩欧美一区视频在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲一码二码三码区别大吗| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 高清av免费在线| 欧美激情极品国产一区二区三区| 曰老女人黄片| av福利片在线| 日韩欧美一区视频在线观看| 中文字幕高清在线视频| 亚洲一区二区三区欧美精品| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| av一本久久久久| 亚洲成色77777| 亚洲专区国产一区二区| 极品人妻少妇av视频| 国产又色又爽无遮挡免| 一级毛片我不卡| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 极品少妇高潮喷水抽搐| 黑人欧美特级aaaaaa片| 精品国产乱码久久久久久男人| 韩国高清视频一区二区三区| 狂野欧美激情性xxxx| 十八禁网站网址无遮挡| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 在线观看免费午夜福利视频| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 91精品国产国语对白视频| 交换朋友夫妻互换小说| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 多毛熟女@视频| 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲成人免费电影在线观看 | 18禁国产床啪视频网站| 亚洲欧美清纯卡通| 一区在线观看完整版| 精品视频人人做人人爽| 热re99久久国产66热| 又大又爽又粗| 丝袜喷水一区| av国产精品久久久久影院| 伊人亚洲综合成人网| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产精品一区二区在线不卡| 久久人妻福利社区极品人妻图片 | 一本色道久久久久久精品综合| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 欧美精品啪啪一区二区三区 | 国产亚洲欧美精品永久| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久久久国产精品人妻一区二区| e午夜精品久久久久久久| 亚洲,欧美,日韩| 美女国产高潮福利片在线看| 一区二区av电影网| 国产不卡av网站在线观看| 无限看片的www在线观看| 欧美成狂野欧美在线观看| 美女中出高潮动态图| 热re99久久国产66热| 嫁个100分男人电影在线观看 | 国产日韩一区二区三区精品不卡| 天堂中文最新版在线下载| 中文字幕亚洲精品专区| 久久久精品94久久精品| 国产有黄有色有爽视频| 悠悠久久av| 久久久精品94久久精品| 免费观看人在逋| 中文字幕制服av| 国产人伦9x9x在线观看| 男女之事视频高清在线观看 | 欧美精品一区二区免费开放| 精品视频人人做人人爽| av国产久精品久网站免费入址| 成年人黄色毛片网站| 午夜福利乱码中文字幕| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 欧美日韩视频精品一区| 成年动漫av网址| 一区二区三区乱码不卡18| 男人操女人黄网站| 国产主播在线观看一区二区 | 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产成人免费无遮挡视频| 免费看十八禁软件| 搡老岳熟女国产| 亚洲成人手机| 91国产中文字幕| 精品一品国产午夜福利视频| 精品卡一卡二卡四卡免费| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 男女无遮挡免费网站观看| 丰满少妇做爰视频|