血清膽紅素、肌酸激酶同工酶MB質(zhì)量與新生兒日齡的相關(guān)性

鄭高明， 蘇曉茹

（杭州師范大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗科，浙江 杭州 310015）

由于膽紅素生成過多，肝臟對膽紅素攝取和結(jié)合能力下降，腸-肝循環(huán)增加，因此新生兒高膽紅素血癥較為常見[1]。國內(nèi)外關(guān)于高膽紅素血癥引起心肌酶升高的報道很多，但新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷及其機制仍存在爭議。目前，對正常新生兒血清膽紅素、肌酸激酶同工酶MB（creatine kinase isoenzyme MB，CK-MB）水平與日齡的關(guān)系研究較少。探討正常狀態(tài)新生兒日齡與血清膽紅素、CK-MB水平的關(guān)系有助于完善新生兒膽紅素血癥及心臟損傷機制，對建立新生兒膽紅素和CK-MB參考區(qū)間也有一定的價值。因此，本研究選取日齡為0～28 d的新生兒，通過檢測血清總膽紅素（total bilirubin，TB）、直接膽紅素（direct bilirubin，DBil）和肌酸激酶同工酶MB質(zhì)量（creatine kinase isoenzyme MB mass，CK-MB mass）水平，探討血清膽紅素和CK-MB mass與日齡的相關(guān)性。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2018年12月—2019年12月杭州師范大學(xué)附屬醫(yī)院新生兒科新生兒106名，其中男嬰53名，日齡（6.98±5.51）d；女嬰53名，日齡（8.21±6.00）d；根據(jù)出生天數(shù)分為3組：≤5 d組[48名，出生體質(zhì)量（3.32±0.60）kg]、＞5～≤10 d組[32例，出生體質(zhì)量（3.29±0.70）kg]、＞10～≤28 d組[26例，出生體質(zhì)量（3.34±0.50）kg]。所有新生兒均符合：（1）胎齡滿37周～＜42周，出生體質(zhì)量≥2 400 g，無宮內(nèi)窘迫及生后窒息史；（2）無先天性心臟病、缺血缺氧性腦病、嚴(yán)重感染等影響心肌酶測定結(jié)果的疾病。3組胎齡和出生體質(zhì)量差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

本研究所用的血清樣本均為完成其他檢測后的剩余血清。采用重氮法檢測TB和DBil，試劑盒均購自美國貝克曼庫爾特公司（批號分別為2588、2587）。采用膠乳免疫比濁法測定CK-MB mass，試劑盒購自北京九強生物技術(shù)股份有限公司（批號為19-0916）。檢測儀器為AU5800全自動生化分析儀（美國貝克曼庫爾特公司）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 25.0軟件進行統(tǒng)計分析。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較采用非參數(shù)Wilcoxon秩和檢驗。相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同出生天數(shù)新生兒血清TB、DBil、CKMB mass水平的比較

＞5～≤10 d組血清TB水平明顯高于≤5 d組和＞10～≤28 d組（P＜0.001），＞10～≤28 d組血清DBil水平明顯高于≤5 d組和＞5～≤10 d組（P＜0.001），≤5 d組、＞5～≤10 d組、＞10～≤28 d組血清CK-MB mass水平依次降低（P＜0.05）。見表1。

表1 不同出生天數(shù)新生兒血清TB、DBil、CK-MB mass水平的比較

2.2 血清TB、DBil、CK-MB mass水平與新生兒日齡的相關(guān)性

TB與日齡無相關(guān)性（r=0.038，P＞0.05），DBil與日齡呈正相關(guān)（r=0.469，P＜0.05），CK-MB mass與日齡呈負(fù)相關(guān)（r=-0.559，P＜0.05）。見圖1。

圖1 血清TB、DBil、CK-MB mass水平與新生兒日齡的相關(guān)性

3 討論

膽紅素在體內(nèi)具有保護和損傷的雙重作用。生理濃度的膽紅素既是強氧化劑又是自由基清除劑，對心、腦、血管等多種組織器官具有保護作用，但濃度過高時又可對機體造成不同程度的損傷[2]。高膽紅素血癥是新生兒的常見疾病之一，早產(chǎn)兒發(fā)病率約為80%，足月兒發(fā)病率約為60%，若不及時進行有效治療，不僅會引起患兒神經(jīng)系統(tǒng)損傷，還可能引發(fā)神經(jīng)外器官或組織損傷，對新生兒的健康造成嚴(yán)重影響[3-4]。

目前，臨床主要通過檢測新生兒血清膽紅素水平來指導(dǎo)新生兒高膽紅素血癥的治療。當(dāng)血清TB＞221.0 μmol/L 或每日升高≥85.0 μmol/L，且血清結(jié)合膽紅素＜34.0 μmol/L，便可確診為高膽紅素血癥。然而，對高膽紅素血癥是否伴隨器官損傷及其診斷方案并未統(tǒng)一，且臟器損傷常與膽紅素升高不完全一致，這給臨床的診斷和治療帶來一定的困難。由于多數(shù)高膽紅素血癥新生兒心肌損傷的臨床表現(xiàn)不明顯或因其他系統(tǒng)受累導(dǎo)致心肌損傷癥狀被忽視，因此臨床希望能有一種可靈敏地反映心肌損傷的標(biāo)志物。

目前常用的心肌損傷標(biāo)志物有心肌肌鈣蛋白T、心肌肌鈣蛋白I、CK-MB等。CK-MB絕大部分存在于心肌細(xì)胞的外漿層，心肌以外的細(xì)胞中含量甚微，因此血清 CK-MB水平的高低可較特異性地反映心肌損傷的程度[5]。由于肌鈣蛋白在心肌損傷發(fā)生6 h以內(nèi)時敏感性較低[6]，因此肌鈣蛋白與CK-MB聯(lián)合檢測可以提高心肌損傷診斷的準(zhǔn)確性。傳統(tǒng)的CK-MB活性檢測建立在忽略肌酸激酶同工酶BB干擾的基礎(chǔ)上，具有一定的局限性。本研究采用質(zhì)量法檢測CK-MB mass，用單克隆抗體直接識別CK-MB，排除了肌酸激酶同工酶BB、巨肌酸激酶及腺苷酸激酶的干擾，特異性和敏感性均高于傳統(tǒng)的CK-MB活性檢測[7-8]。

目前，新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷及其機制仍存在爭議。有研究結(jié)果顯示，新生兒病理性黃疸可出現(xiàn)心肌損傷，患兒心肌酶升高與黃疸的嚴(yán)重程度和持續(xù)時間呈正相關(guān)（r=0.902）[9]，原因可能是未結(jié)合膽紅素為脂溶性的，可以透過細(xì)胞膜進入細(xì)胞內(nèi)，干擾細(xì)胞的代謝，導(dǎo)致心肌細(xì)胞損傷，與文獻(xiàn)報道[10-11]一致。然而，也有研究結(jié)果顯示，高膽紅素血癥患兒的CK-MB水平與血清TB水平并無明顯關(guān)聯(lián)[1]，新生兒高膽紅素血癥不會對CK-MB產(chǎn)生明顯影響，CK-MB 與日齡呈負(fù)相關(guān)（r=-0.375，P＜0.001）[12]，與本研究結(jié)果一致。

本研究結(jié)果顯示，＞5～≤10 d組血清TB水平明顯高于≤5 d組和＞10～≤28 d組（P＜0.001），DBil與日齡呈正相關(guān)（r=0.469，P＜0.05）。原因可能是隨著新生兒成長，肝臟快速發(fā)育成熟，對膽紅素攝取和結(jié)合能力逐步提高，導(dǎo)致DBil逐漸升高，而由于各種生理或病理原因?qū)е路墙Y(jié)合膽紅素存在及升高，使得＞5～≤10 d組TB水平顯著高于其他2個組，因此要格外關(guān)注日齡為＞5～≤10 d的新生兒非結(jié)合膽紅素升高導(dǎo)致的高膽紅素血癥。此外，本研究結(jié)果還顯示，CKMB mass與日齡呈負(fù)相關(guān)（r=-0.559，P＜0.05）。隨著日齡的增長，新生兒CK-MB mass逐漸降低。這表明新生兒CK-MB mass升高不一定是由心肌損傷導(dǎo)致的，可能是由新生兒早期特殊的生理特點導(dǎo)致的暫時性增高，需關(guān)注新生兒的CK-MB參考區(qū)間，并結(jié)合其他檢查或肌鈣蛋白等指標(biāo)綜合評判高膽紅素血癥新生兒是否存在心肌損傷。關(guān)于新生兒高膽紅素血癥是否伴隨心肌損傷目前存在2種不同的研究結(jié)論，這可能是由于新生兒有其特殊的生理、病理特點，不同的研究結(jié)論基于不同的病例數(shù)、病例選取的局限性等原因?qū)е碌摹?/p>

總之，新生兒血清DBil、CK-MB mass水平與日齡有一定的關(guān)系。由于本研究的樣本量較小，所用樣本為其他檢測后的剩余血清，量極少，且由于方法學(xué)問題和樣本種類的要求，未能檢測心肌肌鈣蛋白等心肌損傷標(biāo)志物。后續(xù)將擴大樣本量，進一步研究新生兒高膽紅素血癥與心肌損傷的關(guān)系，同時建立新生兒相關(guān)標(biāo)志物的參考區(qū)間。