STC2蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達及其與預后的關(guān)系

周 蔚，戴曉云，王中海

子宮內(nèi)膜癌是一種發(fā)病率較高的女性婦科惡性腫瘤，近年來該病的發(fā)病率和死亡率在不斷上升[1]。子宮內(nèi)膜癌病人術(shù)后復發(fā)的風險較高，尋找合適的預測指標識別高復發(fā)風險的病人是目前子宮內(nèi)膜癌臨床診治過程中的難點[2]。斯鈣素2(stanniocalcin-2，STC2)是一種調(diào)控鈣磷代謝的蛋白。近年來的研究[3-4]發(fā)現(xiàn)，STC2的表達與很多惡性腫瘤的疾病發(fā)展、預后都有很大的關(guān)系。但目前為止，國內(nèi)外的報道對STC2在子宮內(nèi)膜癌中的研究極少。因此，本次研究旨在探討STC2在子宮內(nèi)膜癌中的表達以及其與病人預后的關(guān)系?，F(xiàn)作報道。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年1月至2017年10月在我院接受治療的子宮內(nèi)膜癌病人的手術(shù)標本78例納入本次研究，病人年齡34～65歲。納入標準：(1)病人首次診斷為子宮內(nèi)膜癌，并接受手術(shù)治療；(2)病人術(shù)前臨床資料及術(shù)后隨訪資料完整。排除標準：(1)病人術(shù)前接受過放療、化療等新輔助治療；(2)合并有其他器官、系統(tǒng)嚴重疾病者；(3)既往有惡性腫瘤疾病史。78例病人中行廣泛子宮切除+雙側(cè)附件切除術(shù)18例，廣泛子宮切除+雙側(cè)附件切除+盆腔和腹主動脈旁淋巴結(jié)清掃術(shù)60例；[4]子宮頸累及9例；國際婦產(chǎn)科聯(lián)合會(International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO)分級1級41例，2級16例，3級21級；病理分期Ⅰ期47例，Ⅱ期22例，Ⅲ期9例；術(shù)后輔助治療：放療17例，盆腔外束放射治療+近距離放療19例，序貫放化療9例。

1.2 方法 將標本置于4%福爾馬林中固定，石蠟包埋后進行連續(xù)切片，組織切片厚度為5 μm。將石蠟切片浸入二甲苯中脫蠟，乙醇復水。采用鏈霉親合素-生物素酶復合物(Streptavidin-Peroxidase，SP)法進行免疫組織化學染色，試劑盒采用由上海鈺博生物科技有限公司提供的即用型SP免疫組織化學試劑盒以及DAB顯色試劑盒；一抗采用兔抗人STC2抗體(1∶50，上?？泼羯锟萍加邢薰?，實驗中以PBS液作為一抗的空白對照。所有操作均遵循試劑盒內(nèi)的操作手冊。

1.3 STC2染色結(jié)果評分[5]所有染色組織切片由2位擅長婦科診斷的病理學主治醫(yī)生進行評估和打分，醫(yī)生在診斷前對病人的臨床資料一無所知。強陽性定義為細胞膜或細胞質(zhì)內(nèi)有棕色染色信號；中度陽性為顏色呈黃褐色；弱陽性的定位為染色信號呈淡黃色。染色強度分級評分如下：0分為無染色；1分為弱陽性；2分為中度陽性；3分為強陽性。根據(jù)以下標準對腫瘤細胞染色百分率進行分級：0分為沒有染色；1分為陽性腫瘤細胞≤10%；2分陽性腫瘤細胞11%～50%；3分為陽性腫瘤細胞51%～80%；4分為陽性腫瘤細胞≥81%。STC2染色結(jié)果根據(jù)染色強度和染色細胞百分率計算所得，分數(shù)范圍為0～7分。0分為無染色，或陽性腫瘤細胞<10%；計算所得分數(shù)0分即為0，1～3分為1+,4～5分為2+,6～7分為3+。根據(jù)所有樣本的STC2染色得分進行樣品STC2表達分級，將0和1+的樣品納入無表達+低表達組；2+和3+的樣品納入高表達組。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用t檢驗、χ2檢驗、Kaplan-Meier生存曲線法和Cox比例風險回歸模型。

2 結(jié)果

2.1 STC2在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達特征 對所有手術(shù)標本進行STC2免疫組織化學染色，發(fā)現(xiàn)有STC2陽性的腫瘤細胞的樣本共61件，占所有樣本的65.38%。根據(jù)STC2染色結(jié)果評分標準，STC2無表達+低表達組樣本35件(44.87%)，STC2高表達組樣本43件(55.13%)(見表1)。

表1 STC2在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達特征(n=78)

2.2 STC2表達與子宮內(nèi)膜癌病人臨床病理特征的關(guān)系 將無表達+低表達組與高表達組病人的臨床特征進行比較，結(jié)果顯示，2組病人年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但高表達組的FIGO分期、侵犯淋巴血管、侵犯子宮肌層以及累及子宮頸情況較無表達+低表達組明顯加重，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05～P<0.01)(見表2)。

2.3 STC2表達水平與病人預后的關(guān)系 對所有病人進行術(shù)后隨訪，術(shù)后隨訪時間為1～24個月，中位數(shù)為15個月。隨訪期間共有14例(17.95%)病人出現(xiàn)腫瘤復發(fā)，其中無表達+低表達組2例(5.71%)，高表達組12例(27.91%)。2組病人隨訪期間的無復發(fā)生存率STC2高表達組低于無表達+低表達組，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.45，P<0.05)(見圖1)。

表2 STC2表達與子宮內(nèi)膜癌病人臨床病理特征的關(guān)系[ n；百分率(%)]

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是一種發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，多發(fā)于圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后的婦女，是僅次于卵巢癌和宮頸癌的第三大婦科惡性腫瘤[6]。腫瘤的組織類型、分期、分級、大小、淋巴血管累及情況、年齡等都是目前公認的影響腫瘤復發(fā)的常規(guī)危險因素[7-8]。但臨床實踐發(fā)現(xiàn)，即使是臨床特征相似的病人，其預后亦存在很大區(qū)別；研究[8]認為，造成這一預后差異的原因是因為腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的分子表型。近年來，分子標志物的研究已經(jīng)成為腫瘤研究領域的熱點之一。STC2是一種通過調(diào)控鈣、磷代謝的蛋白，其可以促進無機磷酸鹽誘導的鈣化并抵制異位鈣化。近期的研究[9]報道指出STC2基因是低氧誘導因子HIF-1的靶基因，能夠在低氧狀態(tài)下促進腫瘤細胞的增殖、侵襲、遷移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化。STC2在胃癌、肝癌等研究中都被發(fā)現(xiàn)其表達與疾病的預后有一定的關(guān)系[10-11]。本次研究我們探討了STC2表達在子宮內(nèi)膜癌中的表達以及與疾病預后的關(guān)系。

本次研究結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜癌病人中STC2陽性的比例較高，為65.38%，但在STC2染色中，大部分樣品的染色強度為弱-中度(66.66%)；該結(jié)果與既往的研究[5]結(jié)果基本相似。進一步比較不同STC2表達程度的樣品的臨床特征，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，STC2高表達的樣品其FIGO分期也較晚，提示STC2高表達可能是子宮內(nèi)膜癌預后不佳的潛在標志物。由于本次研究的隨訪時間較短，因此我們比較了STC2無表達+低表達組和STC2高表達組的無復發(fā)生存率，結(jié)果顯示，STC2高表達病人的無復發(fā)生存率顯著低于STC低表達的病人。這一結(jié)果，進一步證實了STC2是可以用于預測子宮內(nèi)膜癌預后的分子標志物。

在其他類型癌癥中，STC2高表達也已經(jīng)被證實與預后不良有極為密切的聯(lián)系[12-13]。其他研究者顯示宮頸癌組織中的STC2表達較正常組織顯著增高，且STC2表達與病人的總生存率及無復發(fā)生存率呈負相關(guān)[14]。而本次研究中我們并未發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌組織中的STC2表達與年齡有關(guān)。因此，將外周血中STC2水平應用對子宮內(nèi)膜癌預后的預測，還需更多的研究進一步確認。此外，STC2作用于子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展的分子機制還需要進一步研究，有學者認為其可能與PI3K/AKT信號通路有關(guān)[15]，但具體機制有待進一步挖掘。

綜上所述，大部分子宮內(nèi)膜癌均表達有輕-中度的STC2蛋白，而STC2高表達與疾病的預后不良有很大的關(guān)系，其可能可以作為子宮內(nèi)膜癌預后的預測指標。