龍眼核油脂成分及其抗氧化活性分析

葛宇飛 朱冰瑤 方晶晶 徐麗珊,2

(浙江師范大學(xué)化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院1，金華 321000)(浙江省特色經(jīng)濟(jì)植物生物技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室2，金華 321000)

龍眼(DimocarpuslonganLour.)，無患子科龍眼屬植物，主要分布于東南亞和我國的南方省區(qū)，是深受歡迎的亞熱帶水果之一[1]。中國是龍眼的主產(chǎn)區(qū)之一，產(chǎn)量和種植面積均居世界第一，擁有豐富的種質(zhì)資源和栽培品種。龍眼含有豐富的多糖、多酚等天然活性物質(zhì)，具有降脂、抗氧化、抗衰老、預(yù)防癌癥等諸多功能[2]。龍眼核占龍眼鮮重的17%，因缺乏有效利用而造成龍眼資源的有效利用率下降[3]，龍眼核富含油脂，具有巨大的開發(fā)潛力。

目前，龍眼核的研究主要集中于多酚的分離鑒定及其抗氧化活性[4，5]，而對龍眼核油脂的相關(guān)研究鮮有報(bào)道。因此，本研究以龍眼核原料，提取龍眼核油脂，分析其油脂成分、理化性質(zhì)和抗氧化活性，為龍眼核油脂的開發(fā)利用以及進(jìn)一步提高龍眼資源的利用率提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料和試劑

龍眼采自福建龍?zhí)镦?zhèn)，經(jīng)去除果皮、果肉后，洗凈，烘干，粉碎過篩備用。1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)、Folin酚；無水乙醇、石油醚、甲醇、醋酸等：均為分析純；去離子水：實(shí)驗(yàn)室自制。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent G5975氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，島津UV-2550紫外分光光度計(jì)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

1.3 方法

1.3.1 油脂的提取

稱取1 000 g龍眼核粉末，以石油醚為提取溶劑，在料液比1∶20、超聲輔助提取30 min，室溫靜置提取12 h，重復(fù)3次，合并石油醚，蒸發(fā)濃縮至恒重得龍眼核油脂。

含油率=(龍眼核質(zhì)量-萃取后殘?jiān)|(zhì)量)/龍眼核質(zhì)量×100%

1.3.2 理化指標(biāo)測定

碘值測定參照 GB/T 5532—2008[6]；酸值測定參照 GB/T 5530—2005[7]；過氧化值測定參照 GB/T 5538—2005[8]；皂化值測定參照 GB/T 5534—2008[9]；色澤、透明度測定參照 GB/T 5525—2008[10]。

1.3.3 脂肪酸組成分析

取龍眼核油脂50 mg溶解于適量的石油醚中，使其分散均勻，再轉(zhuǎn)置于具塞試管中，水浴80 ℃蒸干，加入5%硫酸-甲醇溶液10 mL，振蕩混勻，于80 ℃水浴甲酯化120 min，冷卻至室溫，加入10 mL正己烷，振蕩混勻，靜置，收集正己烷層，加入少量無水硫酸鈉，所得清液即可用于氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析[11]。

氣相色譜條件：HP-5MS 毛細(xì)管柱(30 mm×250 m×0.25 mm)。升溫程序：由40 ℃升至120 ℃保持3 min，然后以5 ℃/min升至 260 ℃，不分流進(jìn)樣。進(jìn)樣量0.2 μL，進(jìn)樣口溫度 250 ℃，載氣He，流速 1 mL/min。

質(zhì)譜條件：EI離子源，電離電壓70 eV，檢測器FID 檢測器，溫度220 ℃，掃描范圍m/z：40～600。

1.3.4 抗氧化活性測定

1.3.4.1 龍眼核油脂中多酚類物質(zhì)的提取

取50 mL龍眼核油脂，按1∶2加入80%乙醇，混勻，50 ℃水浴30 min后，離心、收集上清液，沉淀重復(fù)提取3次，合并上清液，得到龍眼核油脂多酚溶液作為樣品液[12]。

1.3.4.2 多酚含量測定

參照文獻(xiàn)[13]采用Folin酚法測定。

參考Islam F等[14]方法，樣品組：2 mL樣品液與2 mL 0.15 mmoL/L的DPPH溶液；對照組：2 mL樣品與2 mL乙醇；空白組：2 mL樣品溶劑與2 mL 0.15 mmoL/L的DPPH溶液，均混勻反應(yīng)30 min，于517 nm處分別測得吸光度值A(chǔ)i、Ab、Ac，以VC作為陽性對照。根據(jù)公式計(jì)算清除率。

清除率= [1-(Ai-Ab)/Ac]×100%

1.3.4.4 ABTS+清除能力的測定

參考Ozgen M等[15]方法，樣品組：100 μL樣品液與4 mL ABTS+溶液；空白組：100 μL乙醇與4 mL ABTS+溶液，均混勻反應(yīng)10 min，于734 nm處分別測得吸光度值A(chǔ)i、Ac。以VC作為陽性對照。根據(jù)公式計(jì)算清除率。

清除率=(1-Ai/Ac)×100%

1.4 數(shù)據(jù)分析

各指標(biāo)均平行測定3次，并采用SPSS進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，結(jié)果以(平均值±標(biāo)準(zhǔn)差)表示，IC50表示當(dāng)清除率達(dá)到50%時(shí)對應(yīng)的被測樣品濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 龍眼核油脂的理化性質(zhì)

龍眼核含油率為7.33%，龍眼核油脂的理化性質(zhì)測定結(jié)果見表1。

表1 龍眼核油脂的理化指標(biāo)

從表1可見，油脂常溫下液態(tài)，顏色呈黃色，色澤透明澄清，與大豆油相似，符合大眾對食用油的認(rèn)知。參考 NY/T 751—2017《綠色食品食用植物油》中植物油脂[16]，對比分析龍眼核油脂的理化性質(zhì)。龍眼核過氧化值較低，說明油脂中過氧化物含量少，尚無氧化酸敗，符合國家食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；碘價(jià)大于130 g/100 g，高于多數(shù)常見食用油，表明龍眼核油脂為干性油，不飽和度較高，具有良好食用油開發(fā)潛力；酸值高于多數(shù)食用油脂，表明游離脂肪酸含量較高，但低于雪松、黑松、海州常山油脂；皂化值反映游離脂肪酸、甘油酯的和脂肪酸的分子質(zhì)量大小，高于常見的植物油脂，低于冬青衛(wèi)矛、山桃、金銀木、芥菜等[17，18]，因龍眼核油脂為毛油未精煉，故酸價(jià)和皂化值高于食用油標(biāo)準(zhǔn)，后續(xù)開發(fā)需要進(jìn)一步的脫酸處理[19]。

2.2 龍眼核油脂的脂肪酸組成

龍眼核油脂的脂肪酸組成通過與數(shù)據(jù)庫檢索進(jìn)行定性分析，并按峰面積歸一法進(jìn)行定量，其分析鑒定結(jié)果見表2。

表2 龍眼核油脂脂肪酸組成及含量

從龍眼核油脂中共鑒定出12種脂肪酸，由月桂酸、肉豆蔻酸、十五酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸、十五酸、棕櫚酸的飽和脂肪酸，和亞油酸、亞麻酸、油酸、β-谷甾醇油酸酯的不飽和脂肪酸組成，不飽和脂肪酸的總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為42.77%，其中以亞油酸為主，亞麻酸次之。亞油酸和亞麻酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到36%，它們是人體必需脂肪酸，具有多種生理功能，如：降低心血管疾病發(fā)病率和死亡率、有利于嬰兒發(fā)育、降血壓等[20,22]，對身體健康十分重要。龍眼核油脂的亞油酸含量高于低芥酸-油菜籽油(22.2%)、杏仁油(18.2%)，但低于向日葵油(66.4%)、核桃油(61.0%)等高品質(zhì)食用油，亞麻酸含量高于核桃油(6.7%)、高芥酸-油菜籽油(8.6%)，略低于低芥酸-油菜籽油(11.0%)。因此，龍眼核油脂營養(yǎng)價(jià)值豐富[23]。

2.3 抗氧化活性

油脂中多酚含量為(127.0±6.3) mg GAE/kg，低于芝麻油(153～387 mg GAE/kg)，接近橄欖油(111～198 mg GAE/kg)，而高于大豆油、玉米油、菜籽油、花生油等常見食用油(多酚含量均低于85 mg GAE/kg)[24]。龍眼核油脂對ABTS+清除率和DPPH清除率見圖1、圖2。

圖1 龍眼核油脂清除ABTS+·的能力

圖2 龍眼核油脂清除DPPH·的能力

龍眼核油脂的多酚含量豐富，多酚除了具有顯著的抗氧化功效，而且具有很好的藥用價(jià)值，如：降血糖[26]、抗真菌[27]、抗炎[28]等，是食品添加劑的良好來源。富含多酚的龍眼核油脂，具有良好的抗氧化活性，開發(fā)潛力巨大。

3 結(jié)論

我國龍眼核產(chǎn)量高，利用率低，具有巨大開發(fā)空間。龍眼核含油率為7.33%，油脂不飽和度高，過氧化物含量低，而酸值較高，在后續(xù)開發(fā)需進(jìn)一步脫酸處理。龍眼核油脂脂肪酸組成顯示，其不飽和脂肪酸的含量豐富，亞油酸、亞麻酸等人體必需脂肪酸，質(zhì)量分?jǐn)?shù)達(dá)到36%，營養(yǎng)價(jià)值高。龍眼核油脂中多酚含量高，DPPH·和ABTS+·清除效果高于常見食用油脂，抗氧化活性強(qiáng)，具有良好開發(fā)潛力。