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    蒲公英黃酮的提取工藝優(yōu)化及主要成分淺析

    2020-10-23 11:54:02徐樹來任紅波欒雪艷陳井權(quán)
    食品工業(yè)科技 2020年19期
    關(guān)鍵詞:蘆丁蒲公英黃酮

    徐樹來,王 麗,任紅波,欒雪艷,陳井權(quán)

    (1.哈爾濱商業(yè)大學(xué)食品工程學(xué)院,黑龍江哈爾濱 150076;2.黑龍江省普通高校食品科學(xué)與工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,黑龍江哈爾濱 150076;3.哈爾濱商業(yè)大學(xué)后勤總公司,黑龍江哈爾濱 150076;4.黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所,黑龍江哈爾濱 150086;5.海倫野泰食品加工有限公司,黑龍江綏化 152000)

    蒲公英(TaraxacummongolicumHand Mazz)是一種藥食同源草本植物,富含多種功能性成分,具有較高的食用及藥用價(jià)值[1]。蒲公英對(duì)多種細(xì)菌、真菌、病原體等致病微生物具有抑制作用[2-3]、具有抗螨蟲等有益的生物活性功能[4]。其中黃酮類化合物是其最具代表性的活性物質(zhì),具有抑制多種細(xì)菌、真菌、病原體等致病微生物[5],具有擴(kuò)張血管、降糖降脂等作用[6],還具有抗癌活性等多種生物活性[7],有較高的實(shí)用開發(fā)價(jià)值[8]。資料表明:蒲公英在我國(guó)分布廣,花期長(zhǎng)[9],資源豐富且廉價(jià)易得,是良好的黃酮提取原料。因此,研究蒲公英黃酮的提取具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

    盡管國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)黃酮提取的研究報(bào)道較多,Sed對(duì)紅千層中黃酮的提取進(jìn)行了研究[10],李玲娜研究了超聲波復(fù)合酶法提取蒲公英根總黃酮工藝[4]。但對(duì)蒲公英黃酮提取方面的研究相對(duì)較少,而有限的研究也多為復(fù)合提取方法,具有工藝復(fù)雜、成本高,不適合工業(yè)化生產(chǎn)等不足。故有必要對(duì)其進(jìn)行更加深入的研究及優(yōu)化。

    本文對(duì)超聲波及微波輔助法提取蒲公英黃酮工藝進(jìn)行了研究,利用單因素實(shí)驗(yàn)及正交試驗(yàn)優(yōu)化提取條件,并通過試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比分析及黃酮粗提物主要成分的HPLC初步測(cè)定,確定并驗(yàn)證了蒲公英黃酮的最佳提取工藝,以期為蒲公英的深加工及綜合利用提供有益支撐。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    蒲公英(藥用級(jí)) 寶豐醫(yī)藥通達(dá)店;蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品(純度98%) 合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;無水乙醇(分析純) 天津市富宇精細(xì)化工有限公司;亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉(均為分析純) 天津市天力化學(xué)試劑有限公司;無水甲醇(色譜純) 美國(guó)Fisher公司;磷酸(色譜純) 天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司;乙腈(色譜純) 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑沈陽(yáng)有限公司。

    FW177型中草藥粉碎機(jī) 天津市泰斯特儀器有限公司;電子天平 上海舜宇平衡學(xué)儀器有限公司;FA2004A分析天平 上海精天電子儀器有限公司;SP-722E型可見光分光光度計(jì) 上海光譜儀器有限公司;KQ-500DE型數(shù)控超聲波清洗機(jī) 昆山市超聲儀器有限公司;SHB--Ⅲ循環(huán)式多用真空泵 鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司;布氏漏斗、500 mL抽濾瓶 蜀牛玻璃儀器有限公司;XH-MC-1實(shí)驗(yàn)室微波合成儀 北京祥鵠科技發(fā)展有限公司;DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱 上海一恒科學(xué)儀器有限公司;LC-20A高效液相色譜儀 日本島津公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 黃酮提取工藝及得率測(cè)定 精確稱取過60目篩的蒲公英干粉1.000 g,在一定濃度的乙醇溶液、料液比、提取時(shí)間和提取溫度的條件下進(jìn)行超聲處理或者微波處理,抽濾,得提取液。取5 mL提取液至25 mL比色管中,分別加入5%亞硝酸鈉溶液1.0 mL,搖勻,放置6 min后,再分別加入10%硝酸鋁溶液1.0 mL,搖勻,放置6 min后,再分別加入4%氫氧化鈉溶液10.0 mL,再用濃度為60%的乙醇溶液定容至25 mL刻度線,搖勻,放置20 min后,在510 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,計(jì)算出黃酮得率。

    蒲公英黃酮得率計(jì)算方法為[11]:

    式中:X:黃酮得率(%);C:黃酮提取液濃度(μg·mL-1);V:提取液體積(m)L;N:提取液稀釋倍數(shù);M:稱取蒲公英干粉的質(zhì)量(g)。

    1.2.2 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 采用文獻(xiàn)方法[12],通過標(biāo)準(zhǔn)曲線得到方程:A=0.0092C+0.0035,R2=0.9994,據(jù)此計(jì)算蒲公英黃酮的得率。

    1.2.3 超聲波輔助提取法

    1.2.3.1 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 按照1.2.1的試驗(yàn)步驟,根據(jù)預(yù)試驗(yàn),設(shè)定各單因素固定水平分別為:乙醇濃度60%;料液比1∶20 g/mL;超聲時(shí)間30 min;超聲溫度50 ℃;超聲功率300 W。分別考察各單因素不同水平對(duì)蒲公英黃酮得率的影響。各因素水平分別設(shè)置為:乙醇濃度(40%、50%、60%、70%、80%);料液比(1∶20、1∶40、1∶60、1∶80、1∶100 g/mL);超聲時(shí)間(10、20、30、40、50 min);超聲溫度(40、50、60、70、80 ℃)。

    1.2.3.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化超聲輔助提取條件 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)所得最優(yōu)的工藝提取條件范圍,選擇乙醇濃度、料液比、超聲時(shí)間和超聲溫度為因素,進(jìn)行L9(34)正交試驗(yàn),因素與水平編碼如表1所示:

    表1 正交試驗(yàn)因素與水平編碼表

    按照正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)方案做驗(yàn)證性試驗(yàn),平行三次,取平均值,得出最優(yōu)工藝條件下超聲提取的蒲公英黃酮得率。

    1.2.4 微波輔助提取法

    1.2.4.1 單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 按照1.2.1的試驗(yàn)步驟,根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果,設(shè)定各單因素固定水平分別為:乙醇濃度60%;料液比1∶30 g/mL;微波時(shí)間10 min;微波溫度50 ℃;微波功率800 W。分別考察各單因素不同水平對(duì)蒲公英黃酮得率的影響。各因素水平分別設(shè)置為:乙醇濃度(40%、50%、60%、70%、80%);料液比(1∶20、1∶40、1∶60、1∶80、1∶100 g/mL);微波溫度(40、50、60、70、80 ℃);微波時(shí)間(3、5、10、15、20 min);微波功率(500、600、700、800、900 W)。

    1.2.4.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化微波輔助提取條件 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)所得最優(yōu)的工藝提取條件,選擇乙醇濃度、料液比、微波時(shí)間、微波溫度及微波功率為因素,進(jìn)行 L16(45)正交試驗(yàn),因素與水平編碼如表2所示:

    表2 正交試驗(yàn)因素與水平編碼

    按照正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)方案做驗(yàn)證性試驗(yàn),平行三次,取平均值,得出最優(yōu)工藝條件下微波提取的蒲公英黃酮得率。

    1.2.5 蒲公英黃酮的HPLC分析 準(zhǔn)確稱取蘆丁0.01 g,用甲醇分別定容于10 mL容量瓶中,0.45 μm濾膜過濾備用,配制不同濃度梯度甲醇稀釋溶液及混合溶液,放入高效液相色譜儀中,得出圖譜[13]。以物質(zhì)的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到線性回歸方程。用最優(yōu)試驗(yàn)參數(shù)組合制備的蒲公英黃酮提取液,蒸發(fā)后干燥至恒重得到粗提物,精密稱取0.05 g,甲醇溶解后定容10 mL,0.45 μm濾膜過濾備用。

    上述備用液均在以下高效液相色譜條件下測(cè)定:色譜柱:依利特Sinachrom ODS BP(250 mm×4.6 mm,5 μm);流動(dòng)相:乙腈-0.1%磷酸(3∶7);流速:1.0 mL/min;運(yùn)行時(shí)間:25 min;柱溫:30 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng):368 nm;進(jìn)樣量:10 μL。

    測(cè)定3次重復(fù)完成后,分析樣品色譜圖,并結(jié)合線性回歸方程,計(jì)算粗提物中蘆丁質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    每個(gè)試驗(yàn)重復(fù)3次,采用SPSS 17.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 超聲波輔助提取工藝優(yōu)化

    2.1.1 單因素實(shí)驗(yàn)

    2.1.1.1 乙醇濃度對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖1a可知,乙醇濃度由40%增加至60%時(shí),黃酮得率不斷增加,當(dāng)乙醇濃度達(dá)到60%左右時(shí),黃酮類化合物的得率基本達(dá)到最高;之后隨著乙醇濃度的增加,其得率緩慢下降。不同乙醇濃度下,蒲公英提取液中黃酮類化合物的得率有明顯差異,乙醇濃度超過70%后,提取液的顏色呈現(xiàn)綠色。原因可能是乙醇濃度小時(shí),蒲公英黃酮不能完全溶解到溶液中,所以黃酮得率較低;而乙醇濃度增高,使一些醇溶性雜質(zhì)、色素等其他成分溶出量增加,這些成分與黃酮類化合物競(jìng)爭(zhēng)與乙醇分子結(jié)合,從而導(dǎo)致黃酮類化合物的得率下降[14]。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響顯著(P<0.05),綜合分析,適宜的乙醇濃度范圍為55%~65%。

    2.1.1.2 料液比對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖1b 可知,隨料液比的增加,黃酮得率增加,但溶劑用量達(dá)到一定程度時(shí),黃酮接近全部溶出,再增加溶劑用量,黃酮的得率下降。當(dāng)料液比為1∶80 g/mL左右時(shí),黃酮得率基本達(dá)到最大值。原因可能是當(dāng)料液比太小時(shí),蒲公英黃酮與乙醇的接觸面小,蒲公英黃酮不能完全溶解到溶液中,所以得率較低;隨著料液比增大,黃酮與溶劑的接觸面積增大,溶解度增加,得率增加[15]。但當(dāng)料液比過高時(shí),基本達(dá)到飽和狀態(tài),不利于得率提高,而且,料液比過高,增加了分離純化時(shí)間及成本。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01)。綜合分析,選取適宜的料液比范圍為1∶75~1∶85 g/mL。

    2.1.1.3 超聲時(shí)間對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖1c可知,隨著超聲時(shí)間的延長(zhǎng),黃酮得率逐漸增加,30 min左右達(dá)到最高;30 min后,黃酮得率逐漸減少。其原因可能是,超聲時(shí)間短,黃酮不能完全溶解出來,所以得率較低,隨著超聲時(shí)間的增加,超聲波作用增強(qiáng),促進(jìn)了對(duì)細(xì)胞的破壞作用,黃酮全部溶解出來,得率增加。而超聲時(shí)間過長(zhǎng),可能破壞了蒲公英黃酮的結(jié)構(gòu)而使其分解,最后得率降低[16]。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01)。綜合分析,適宜的提取時(shí)間范圍為25~35 min。

    2.1.1.4 超聲溫度對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖1d可知,隨著超聲溫度的升高,黃酮得率先增后減,60 ℃達(dá)最大值;此后,黃酮的得率下降,特別是溫度達(dá)到80 ℃時(shí),下降幅度較大。原因可能是,溫度過高時(shí),造成部分黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)被破壞,所以黃酮得率降低[17-18]。而且乙醇的沸點(diǎn)約為78.3 ℃,當(dāng)超聲溫度達(dá)到80 ℃時(shí),高于乙醇的沸點(diǎn),乙醇會(huì)大量揮發(fā),提高了回流收集成本。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響顯著(P<0.05)。綜合考慮成本及能耗,選取適宜的提取溫度范圍為55~65 ℃。

    圖1 各因素對(duì)蒲公英黃酮得率的影響

    2.1.2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析 由表3可知,超聲波輔助提取法中,對(duì)黃酮得率的影響因素的主次順序是A>B>D>C,即乙醇濃度>料液比>超聲溫度>超聲時(shí)間,最優(yōu)方案是A2B2C3D2,即乙醇濃度60%、料液比1∶80 g/mL、超聲時(shí)間35 min、超聲溫度60 ℃。

    表3 正交試驗(yàn)結(jié)果及分析

    按照正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)方案A2B2C3D2,即乙醇濃度60%、料液比1∶80 g/mL、超聲時(shí)間35 min、超聲溫度60 ℃的提取條件下,做驗(yàn)證性試驗(yàn),平行三次,取平均值。獲得最優(yōu)工藝條件下提取的蒲公英黃酮得率為3.97%。

    2.2 微波輔助提取工藝優(yōu)化

    2.2.1 單因素實(shí)驗(yàn)

    2.2.1.1 乙醇濃度對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖2a可知,黃酮得率隨著乙醇濃度的提高先增加后減小,當(dāng)乙醇濃度為60%時(shí),黃酮得率最大,之后隨著乙醇濃度的增加,黃酮得率緩慢下降。不同乙醇濃度下,蒲公英提取液中黃酮類化合物的得率有明顯差異,乙醇濃度超過70%后,提取液的顏色呈現(xiàn)綠色。原因可能是乙醇濃度增高后,使一些醇溶性雜質(zhì)和色素親脂性等成分溶出量增加[19],這些成分與黃酮類化合物競(jìng)爭(zhēng)同乙醇水分子結(jié)合,從而導(dǎo)致黃酮類化合物的得率下降。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響顯著(P<0.05)。綜合分析,選取較優(yōu)的乙醇濃度范圍為50%~70%。

    2.2.1.2 料液比對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖2b可知,隨溶劑用量的增加,黃酮得率增加,當(dāng)料液比達(dá)到1∶80 g/mL時(shí),黃酮得率最高,黃酮接近全部溶出,再增加溶劑用量,黃酮的得率下降。原因可能是當(dāng)料液比太小時(shí),蒲公英黃酮與乙醇的接觸面小,蒲公英黃酮不能完全溶解到溶液中,所以得率較低,隨著料液比增大,黃酮與溶劑的接觸面積增大,溶解度增加,得率增加;但是料液比過大時(shí),溶解到溶液中的黃酮濃度被稀釋,得率反而降低[20],而且,料液比過高,增加了分離純化成本。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01)。綜合成本及提取效果,選取較優(yōu)的提取料液比范圍為1∶70~1∶90 g/mL。

    2.2.1.3 微波溫度對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖2c可知,蒲公英黃酮得率隨著微波溫度的升高先增加后降低,當(dāng)微波提取溫度為60 ℃時(shí),黃酮得率達(dá)到最大值,溫度繼續(xù)上升時(shí),黃酮得率反而下降。原因可能是,微波溫度升高,造成部分黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)被破壞,所以黃酮得率降低[21]。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01)。綜合分析,選取較優(yōu)的微波提取溫度范圍為50~70 ℃。

    圖2 各因素對(duì)蒲公英黃酮得率的影響

    2.2.1.4 微波時(shí)間對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖2d可知,黃酮得率隨微波時(shí)間的增加而逐漸增加,當(dāng)微波時(shí)間為10 min 時(shí),黃酮得率達(dá)到最大值,此后隨著微波時(shí)間的增加而降低。微波時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使溫度過高,反而會(huì)破壞蒲公英中黃酮組分導(dǎo)致得率降低,且影響提取效率;而微波時(shí)間過短則無法使蒲公英中的黃酮充分溶出,造成提取不完全[22]。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01),綜合提取效果及效率,選取較優(yōu)的黃酮微波時(shí)間范圍為5~15 min。

    2.2.1.5 微波功率對(duì)蒲公英黃酮得率的影響 由圖2e可知,隨著微波功率的增加,黃酮的得率也逐漸增加,當(dāng)微波功率增加到800 W時(shí),黃酮的得率達(dá)到最大值,此后隨著微波功率的增加,黃酮的得率逐漸降低。在一定的微波作用時(shí)間內(nèi),微波功率越大,物質(zhì)吸收的能量越多,溫度升高加快,分子運(yùn)動(dòng)速度加快,物質(zhì)的滲透、擴(kuò)散和溶解速度加快,促進(jìn)黃酮類物質(zhì)向溶劑遷移,黃酮得率明顯提高。但是,當(dāng)微波功率過高時(shí),黃酮得率反而隨著微波功率的增大而逐漸降低。原因可能是,功率過大,溶劑升溫太快,溫度過高,溶劑的揮發(fā)性加快,從而造成溶劑損失,而且黃酮類活性成分也易被破壞[23],而得率降低。由單因素方差分析可知,該因素對(duì)黃酮提取得率影響極顯著(P<0.01),綜合考慮能耗及提取效果,選取較優(yōu)的微波功率范圍為700~900 W。

    2.2.2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析 按照正交試驗(yàn)所得的最優(yōu)方案A3B3C3D2E3,即乙醇濃度60%、料液比1∶80 g/mL、微波時(shí)間10 min、微波溫度55 ℃、微波功率800 W。在最優(yōu)提取條件下,做驗(yàn)證性試驗(yàn),平行三次,取平均值,得到最優(yōu)提取工藝條件下的蒲公英黃酮得率為4.57%。

    表4 正交試驗(yàn)結(jié)果及分析

    2.3 兩種提取方法的對(duì)比分析

    由上述2.2和2.3的試驗(yàn)結(jié)果的對(duì)比分析可以看出,微波輔助法提取蒲公英黃酮優(yōu)于超聲波輔助提取方法。原因是兩種提取方法的原理不同:超聲波輔助提取法是運(yùn)用超聲波產(chǎn)生高速、強(qiáng)烈的空化效應(yīng)和攪拌作用,振動(dòng)產(chǎn)生強(qiáng)大的能量,導(dǎo)致植物細(xì)胞壁被破壞,加速有效成分的迅速釋放、溶解,從而達(dá)到高效提取的效果[24-25]。而微波輔助提取法是利用不同結(jié)構(gòu)物質(zhì)對(duì)波長(zhǎng)吸收的差異,使得不同物質(zhì)被選擇性加熱,而達(dá)到從系統(tǒng)中分離出來的效果。微波提取主要是利用其熱效應(yīng)[26]。上述原理分析表明:超聲波輔助提取是外部振動(dòng)產(chǎn)生能量,利用的是機(jī)械能破壞植物細(xì)胞壁,是由內(nèi)及外的機(jī)械作用過程;而微波輔助提取是內(nèi)部不同物質(zhì)對(duì)波長(zhǎng)的吸收,被選擇性加熱,利用的是熱效應(yīng),從而達(dá)到破壞植物細(xì)胞壁,是內(nèi)部及外部同時(shí)進(jìn)行的偶極子熱運(yùn)動(dòng)過程[27]。鑒于上述兩種方法作用原理的不同,微波輔助提取的效果比超聲波輔助提取的效果更好,得率更高。

    此外,與超聲波輔助提取法相比,微波輔助提取法具有操作時(shí)間短、效率高、溶劑消耗量少、不產(chǎn)生噪音、適于熱不穩(wěn)定物質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)[27],且通過本試驗(yàn)驗(yàn)證具有較高的蒲公英黃酮得率。表明微波輔助提取蒲公英黃酮是一種快速、有效、得率較高的方法,且便于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn),對(duì)實(shí)際生產(chǎn)具有一定的指導(dǎo)意義。

    2.4 蒲公英黃酮的HPLC結(jié)果分析

    根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液HPLC圖譜(如圖3所示)可知,蘆丁出峰時(shí)間約為1.9 min。根據(jù)不同質(zhì)量濃度的HPLC圖譜及定量結(jié)果,以樣品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),以對(duì)應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo),繪制出蘆丁的質(zhì)量濃度與峰面積的標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖4所示。

    圖3 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液HPLC圖譜

    由圖4蘆丁HPLC標(biāo)準(zhǔn)曲線,經(jīng)過回歸處理,得回歸方程為:Y=10709X+3.2397,R2=0.9988。

    圖4 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液HPLC圖譜分析標(biāo)準(zhǔn)曲線

    由圖5黃酮粗提物樣品的HPLC圖譜及定量結(jié)果可知:樣品中含有蘆丁,峰面積為:683271,濃度為:63.803 μg/mL,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為:12.76%。

    圖5 黃酮粗提物樣品HPLC圖譜及定量結(jié)果

    由圖5黃酮樣品的HPLC圖譜觀察可知,蒲公英黃酮粗提物中,含有較多的蘆丁。而在蘆丁的色譜峰出現(xiàn)之前,在時(shí)間約為1.2~1.9 min處,出現(xiàn)了一個(gè)僅次于蘆丁的色譜峰,這有可能是一種含量?jī)H次于蘆丁的黃酮單體,需進(jìn)一步研究確定。

    3 結(jié)論

    本試驗(yàn)對(duì)超聲波輔助提取和微波輔助提取的工藝進(jìn)行了優(yōu)化試驗(yàn)研究,通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn),確定了蒲公英黃酮的最優(yōu)提取工藝條件為:超聲波輔助提取:乙醇濃度60%,料液比1∶80 g/mL,提取時(shí)間35 min,提取溫度60 ℃,在此條件下,蒲公英黃酮的得率為3.97%;微波輔助提取:乙醇濃度60%,料液比1∶80 g/mL,提取時(shí)間10 min,提取溫度55 ℃,微波功率800 W,在此條件下,蒲公英黃酮得率為4.57%。通過試驗(yàn)結(jié)果對(duì)比分析,并結(jié)合兩種方法提取機(jī)理分析,最終確定微波輔助法提取蒲公英黃酮為較優(yōu)的提取方法。高效液相色譜(HPLC)法測(cè)定結(jié)果表明,蒲公英黃酮粗提物中含有蘆丁,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為:12.76%。而蒲公英黃酮中還有一種未知的黃酮類化合物,含量?jī)H次于蘆丁,此種黃酮單體有待進(jìn)一步研究確定。本研究為蒲公英的深加工及綜合利用提供了有益的探究及參考。

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