體液細(xì)胞塊免疫組化在病理診斷中探討

張敏

南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)宿遷市人民醫(yī)院有限公司病理科，江蘇宿遷 223800

體液細(xì)胞塊免疫組化在病理診斷中探討

張敏

南京鼓樓醫(yī)院集團(tuán)宿遷市人民醫(yī)院有限公司病理科，江蘇宿遷 223800

目的 探討體液細(xì)胞蠟塊免疫組化在臨床病理中診斷中應(yīng)用。 方法 回顧性分析2015年1—12月90例體液細(xì)胞涂片與細(xì)胞塊免疫組化對(duì)照，觀察和分析其細(xì)胞塊免疫組化在病理診斷中可靠性分析。 結(jié)果 細(xì)胞學(xué)病理診斷結(jié)果，90例細(xì)胞體液標(biāo)本中，除4例涂片僅見(jiàn)幾個(gè)腫瘤細(xì)胞，細(xì)胞塊陰性，另86例標(biāo)本涂片與細(xì)胞塊檢查結(jié)果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及細(xì)胞塊結(jié)果為間皮增生或炎性病變，未見(jiàn)腫瘤細(xì)胞。病理細(xì)胞學(xué)涂片診斷為腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性39例，腺癌為11例，鱗癌為9例，小細(xì)胞癌為5例，淋巴瘤7例，難以定性腫瘤為4例，其他腫瘤為3例。用細(xì)胞塊、免疫組化聯(lián)合診斷難以定性腫瘤，2例為腺癌，1例為鱗癌，1例為間皮瘤。另31例腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性細(xì)胞塊免疫組化與細(xì)胞涂片結(jié)果相符合。其他類型腫瘤中，2例為神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，1例為組織細(xì)胞瘤。體液細(xì)胞塊、免疫組化聯(lián)合應(yīng)用診斷率高于單一細(xì)胞學(xué)涂片。 結(jié)論 細(xì)胞涂片、細(xì)胞塊免疫組化聯(lián)合應(yīng)用具有操作方便、診斷率高特點(diǎn)。

體液細(xì)胞塊；免疫組化；病理診斷

體液細(xì)胞學(xué)診斷在胸水、腹水、小便、腫塊穿刺液等標(biāo)本經(jīng)離心直接涂片固定、染色。單靠細(xì)胞學(xué)涂片存在漏診情況，而且鑒別診斷率低[1-2]；在各種體液脫落細(xì)胞送檢標(biāo)本經(jīng)過(guò)處理做成細(xì)胞塊，在細(xì)胞塊的基礎(chǔ)上進(jìn)行免疫組化檢測(cè)，此方法可大大提高體液細(xì)胞病變病理診斷準(zhǔn)確性[3-5]?；仡櫺苑治?015年1—12月90例體液標(biāo)本，細(xì)胞塊及免疫組化對(duì)于腫瘤細(xì)胞的來(lái)源和腫瘤細(xì)胞類型、感染性疾病的診斷，尤其是惡性腫瘤的定性方面起到重大的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該研究選取該院門診與住院患者中各種體液脫落細(xì)胞送檢標(biāo)本90例，年齡18～81歲，平均年齡為50歲，男58例，女32例。胸水60例，腹水18例，小便8例，腫塊穿刺液4例。

1.2 試劑及儀器

10%中性甲醛（pH7.4）、無(wú)水乙醇(H11022051)、伊紅(H31020840)等試劑，離心機(jī)，冷藏冰箱，微波爐等。

1.3 細(xì)胞塊制作方法

將送檢體液放在一次性塑料試管中離心后傾其上清液，再用一次性吸管吸干沉淀物上少許殘留液體，用剪刀剪去一次性試管空管部分，留取一次性塑料管與沉淀物粘連部分一起用胃鏡紙包裹后置于10%中性甲醛中固定30 min，然后放在常規(guī)組織片中進(jìn)行脫水、浸蠟、包埋、制成細(xì)胞塊后，常規(guī)切片、HE染色。

1.4 免疫組化

在常規(guī)細(xì)胞涂片、細(xì)胞塊切片基礎(chǔ)上難以作出病理診斷情況下，將做成的細(xì)胞塊，并用免疫組化方法對(duì)體液細(xì)胞學(xué)進(jìn)一步病理診斷。疑為鱗癌、腺癌，選用抗體為CKpna、TTF-1、P40、CK7、CK20、CEA、EMA、CR、KI67等抗體，疑為小細(xì)胞癌，選用抗體CGA、SYN等抗體，免疫組化均采用陰陽(yáng)性對(duì)照。

1.5 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 細(xì)胞學(xué)病理診斷結(jié)果

90例細(xì)胞體液標(biāo)本中，除4例涂片僅見(jiàn)幾個(gè)腫瘤細(xì)胞，細(xì)胞塊性，另86例標(biāo)本與細(xì)胞塊檢查結(jié)果完全符合（95.6%），其中51例良性，涂片及細(xì)胞塊結(jié)果為間皮增生或炎性病變，未見(jiàn)腫瘤細(xì)胞。病理細(xì)胞學(xué)涂片診斷為腫瘤細(xì)胞陽(yáng)性39例（見(jiàn)表1、圖1）。用細(xì)胞涂片、細(xì)胞塊免疫組化聯(lián)合診斷腫瘤39例，其中4例腫瘤細(xì)胞少，細(xì)胞塊陰性。腺癌免疫組化抗體選用 CKpan、TTF1、CEA、EMA、CK7、LCK、KI67等。難以定性腫瘤其中2例TTF1+、LCK+、EMA+、CK7+診斷為腺癌；鱗癌免疫組化選用抗體CKpan、TTF1、ESA、P40、HCK、KI67等，難以定性腫瘤其中 1例CKpan+、P40+、K167+診斷為鱗癌；小細(xì)胞癌選用抗體CgA、Syn、TTF1、SCLC、Leu7等，難以定性腫瘤1例CR+、CK5/6+,CK+,診斷為間皮細(xì)胞瘤；免疫組化LCA+、CD20+、 CD30+等診斷為淋巴瘤；其他腫瘤中另2例Syn+、CK+為神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤，另1例AAT+、vim+為組織細(xì)胞瘤。腫瘤細(xì)胞涂片陽(yáng)性中細(xì)胞塊免疫組化與細(xì)胞涂片結(jié)果完全符合31例（見(jiàn)圖2、表2），細(xì)胞塊性的4例中，2例為腺癌，2例為鱗癌。

表1 39例細(xì)胞學(xué)涂片陽(yáng)性結(jié)果情況（n）

圖1 左圖為細(xì)胞塊HE染色×100倍；右圖為細(xì)胞涂片HE染色×100倍

圖2 左圖為細(xì)胞塊免疫組化染色×100倍；右圖為細(xì)胞塊免疫組化染色×100倍

3 討論

根據(jù)體液細(xì)胞學(xué)病理檢測(cè)資料統(tǒng)計(jì)，在90例體液細(xì)胞病理診斷中，細(xì)胞塊及免疫組化檢出率約95.6%（86/ 90），與魏謹(jǐn)?shù)萚6]報(bào)道胸腔積液細(xì)胞塊組檢出率83.3%（25/ 30）大致相符。

表2 35例腫瘤患者細(xì)胞塊及細(xì)胞免疫組化結(jié)果

常規(guī)的細(xì)胞學(xué)涂片檢查檢測(cè)體液是診斷的可靠方法，具有重要的臨床價(jià)值，其操作簡(jiǎn)便，損傷小，但是由于涂片的細(xì)胞量過(guò)少、變形、或混有其他的紅細(xì)胞、炎性物質(zhì)、多種粘液，或細(xì)胞涂片不均勻，則會(huì)出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性的結(jié)果，并且炎性增生、間皮細(xì)胞增生及腺癌細(xì)胞難以鑒別。單一的細(xì)胞學(xué)涂片免疫組化準(zhǔn)確性低，可重復(fù)性差[7]。體液細(xì)胞學(xué)采用細(xì)胞塊、免疫組化聯(lián)合應(yīng)用，具有以下應(yīng)用的優(yōu)點(diǎn)：①避免常規(guī)涂片厚薄不均致細(xì)胞定位不清，而出現(xiàn)假陰性或假陽(yáng)性，給臨床診治帶來(lái)困難。②細(xì)胞塊能根據(jù)病理診斷需要連續(xù)切片，還能永久保留標(biāo)本，基于細(xì)胞病理診斷特殊性，可用免疫組化對(duì)各種病變進(jìn)行進(jìn)一步診斷、分型，還可以判斷轉(zhuǎn)移腫瘤組織來(lái)源。③細(xì)胞塊最大優(yōu)點(diǎn)可以連續(xù)切片，在此基礎(chǔ)上可以做多種抗體染色，以滿足臨床病理診斷需要，還可以用于分子技術(shù)研究及治療，從而彌補(bǔ)細(xì)胞涂片不足[8]。④細(xì)胞塊經(jīng)過(guò)特殊處理后，能夠提供更多的細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞完整的結(jié)構(gòu)及形態(tài)學(xué)特征，可以多次切片的同時(shí)可以進(jìn)行免疫組化多種抗體染色的檢查[9-10]。⑤體液細(xì)胞塊、免疫組化聯(lián)合應(yīng)用能夠保證病理診斷的準(zhǔn)確性，同時(shí)也能減輕病理醫(yī)生診斷風(fēng)險(xiǎn)，在細(xì)胞學(xué)診斷中具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

總之，將各種體液標(biāo)本制作細(xì)胞塊并聯(lián)合免疫組化進(jìn)行病理診斷陽(yáng)性率高、對(duì)于鑒別組織來(lái)源及細(xì)胞的良惡性具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值，對(duì)于提高細(xì)胞學(xué)的診斷水平具有重大的作用。

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Study on the Pathological Diagnosis of Humoral Cell Block by Immunohistochemistry

ZHANG Min
Department of Pathology,Gulou Hospital Group Suqian People's Hospital,of Nanjing,Suqian,Jiangsu Province,223800 China

Objective To explore the humoral and cellular immunohistochemistry in paraffin blocks in clinical pathological diagnosis. Methods Retrospective analysis of 90 cases of humoral cell smear and cell block from December to January 2015 were compared,and the analysis of the reliability of cell block immunohistochemistry in pathological diagnosis was observed and analyzed.Results Diagnostic results of cytological disease,90 cases of cells specimens,except 4 cases of smear was observed in several tumor cells,cell block negative,the other 86 cases were smear and cell block examination results accord with the (95.6%),including 51 cases of benign,smear and cell block results for mesothelial hyperplasia or inflammatory lesions,no tumor cells.The pathological diagnosis of tumor cells smear，the cell was positive in 39 cases,adenocarcinoma in 11 cases,9 cases of squamous cell carcinoma,small cell carcinoma in 5 cases,7 cases of lymphoma,difficult to characterize tumors of 4 cases,3 cases of other tumors.Using cell block,immunohistochemistry diagnosis difficult to characterize tumors,2 cases of adenocarcinoma,1 cases of squamous cell carcinoma.1 cases of mesothelioma.Another 31 cases of positive cells in tumor cell block by immunohistochemistry and cell smear results.Other types of tumors,2 cases of neuroendocrine tumors,1 cases of humoral and cellular histiocytoma.Block,immunohistochemistry combined diagnosis rate is higher than the single smear.Conclusion Smear,cell block immunohistochemistry combined with convenient operation, The diagnosis rate is high.

Body fluid cell block；Immuno histochemistry；Pathologic diagnosis

R36

A doi 10.11966/j.issn.2095-994X.2016.02.04.11

2016-10-17；

2016-11-25

張敏（1964.5-），女，江蘇沭陽(yáng)人，本科，主治醫(yī)師，研究方向：細(xì)胞學(xué)診斷。