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    薤白化學(xué)成分及其提取分離研究進(jìn)展

    2020-10-21 00:57:00盛艷華李萌萌郭云龍黃鑫越皓陳長寶王中喜劉侗楊德輝
    特產(chǎn)研究 2020年5期
    關(guān)鍵詞:吡喃薤白揮發(fā)油

    盛艷華,李萌萌,郭云龍,黃鑫※,越皓,陳長寶,王中喜,劉侗,楊德輝※

    (1.長春中醫(yī)藥大學(xué)吉林省人參科學(xué)研究院,吉林 長春 130117;2.吉林省東方制藥有限公司,吉林 長春 130013)

    薤白(Allii macrostemonis bulbus)為百合科植物小根蒜或薤的干燥鱗莖[1]。小根蒜首載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,被列為中品[2-3],栽培歷史悠久,主產(chǎn)于東北地區(qū)及河北省、江蘇省和湖北省等地,通常夏、秋季采挖。薤白作為一種藥食同源的中藥材,具有多種藥理作用,具有抑制血小板聚集、降血脂、抗動脈粥樣硬化、抑制腫瘤、消炎、抗氧化和抑菌等作用,臨床上可治療哮喘、心絞痛、冠心病、急慢性支氣管炎、高血脂和心肌缺血等疾病[4-7],此外,薤白毒副作用小,并且易于種植,所以是一種極具開發(fā)價(jià)值的中藥材。因此,對其成分進(jìn)行深入研究具有十分重要的意義。目前,已報(bào)道的薤白中主要化學(xué)成分,包括甾體皂苷類、含硫化合物、含氮化合物、脂肪酸類、多糖類及其他成分。由于其薤白所含化學(xué)成分的物理化學(xué)性質(zhì)差異較大,提取分離方法的選擇也至關(guān)重要。本文對薤白化學(xué)成分組成及其提取分離方法的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述,以期為薤白藥材的深入研究和開發(fā)提供一定的科學(xué)依據(jù)。

    1 薤白化學(xué)成分

    1.1 甾體皂苷類化合物

    甾體皂苷是中藥薤白的主要化學(xué)成分之一,此類皂苷是以環(huán)戊烷駢多氫菲為基本母核和3 個(gè)側(cè)鏈共同組成的基本骨架。其中具有戊烷駢多氫菲甾核的螺甾型皂苷類和呋甾型皂苷類是薤白中兩類主要皂苷類型[8]。在該類化合物中有替告皂苷元(tigogenin)、拉肖皂苷元(laxogenin)和菝葜皂苷元(smilagenin)等皂苷元,主要的糖基包括葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖和葡萄糖醛酸等。從薤白中分離得到甾體皂苷類化合物,見表1。在很長時(shí)間以來,對于薤白皂苷的研究一直是中外學(xué)者深入探討的重點(diǎn)。

    表1 薤白中甾體皂苷類化合物Table 1 The steroidal saponins from Allii macrostemonis bulbus

    續(xù)表1

    續(xù)表1

    續(xù)表1

    經(jīng)一些學(xué)者潛心研究后,將從薤白中提取分離鑒定的化合物命名為薤白苷 A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L。其中,具有抑制血小板聚集作用的是薤白苷A、E、F、G[9-10]。唐麗等[11]用90%乙醇溶液提取薤白鱗莖中的活性物質(zhì),用水飽和正丁醇萃取后經(jīng)分離純化得到了5 種化合物,其中含有提果皂苷元羥基-異螺甾醇]和吉托皂苷元二羥基-異螺甾醇]。陳海峰等[12]利用60% 乙醇提取小根蒜中的有效成分,減壓濃縮純提取液,洗脫,再用多種色譜法進(jìn)行分離鑒定,研究發(fā)現(xiàn),共鑒定出了8 個(gè)化合物,它們分別是薤白皂苷B、薤白皂苷C、薤白皂苷E、薤白皂苷F、薤白皂苷G、22(S)-膽甾-5-烯羥基吡喃鼠李糖基吡喃葡萄糖苷吡喃葡萄糖基-22-羥基-呋甾-5(6)-烯二醇吡喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃半乳糖苷吡喃葡萄糖基-22-羥基-呋甾26-二醇吡喃葡萄糖吡喃半乳糖苷,其中,22(S)-膽甾-5-烯羥基吡喃鼠李糖基吡喃葡萄糖苷和吡喃葡萄糖基-22-羥基-呋甾-5 (6)-烯二醇-3-氧吡喃葡萄糖基喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃半乳糖苷是第1 次從該植物中得到,D-吡喃葡萄糖基-22-羥基D-吡喃葡萄糖吡喃半乳糖苷是第一次從該屬植物中得到的??敌|等[13]用70%乙醇提取物經(jīng)過多次色譜分離和純化,共得到6 種化合物,其中胡蘿卜苷十一烷酸酯為第1 次從百合科植物中分離得到的。程書彪等[14]用70%乙醇溶液提取薤白中的有效成分,共分離得到了3 個(gè)皂苷類化合物,其中薤白皂苷S 是新的化合物。王宜海等[15]利用60%甲醇溶液提取薤白中的化學(xué)成分,從中分離并鑒定出了7 個(gè)化合物,其中無梗五加苷吡喃果糖、-D-呋喃果糖甲苷為第一次從薤白中分離得到。YAO等[16]通過各種光譜方法從75% 乙醇提取物分離得到2 種新的甾體皂苷和2種已知成分,并進(jìn)一步研究了這些成分的抗腫瘤活性;2 種新的甾體皂苷分別被命名為吡喃葡萄糖基-5 -呋甾吡喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃半乳糖苷和吡喃葡萄糖基喃葡萄糖基喃葡萄糖基吡喃半乳糖苷;2 種已知的成分是化合物吡喃葡萄糖基呋甾D(zhuǎn)-吡喃葡萄糖基D-吡喃半乳糖苷和吡喃葡萄糖基呋甾-25(27)-烯四醇吡喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基喃葡萄糖基吡喃葡萄糖基吡喃半乳糖苷為首次從該藥用植物中提取得到。

    1.2 含硫化合物

    含硫化合物是薤白中揮發(fā)油的主要成分之一,約占揮發(fā)油總含量的50%以上,薤白因此具有特別的氣味。該類化合物如表2 所示,主要有二甲基二硫、3-[(1-甲基乙基)硫]-1-丙烯、2,4-二甲基噻酚、甲基烯丙基二硫、甲基丙基二硫、1,3-二唑烷、二甲基三硫、2,2-雙甲硫基丙烷、異丙基丙基二硫、異丙基烯丙基二硫、甲基烯丙基三硫、甲基丙基三硫、二甲基四硫、丙基烯丙基三硫、二丙基三硫、丙基烯丙基三硫、5-甲基-1,2,3,4-四硫環(huán)已烷。

    表2 薤白中含硫化合物Table 2 The sulfur compounds from Allii macrostemonis bulbus

    彭軍鵬等[17-18]對藠頭和小根蒜中的揮發(fā)油進(jìn)行了深入的研究,結(jié)果證實(shí)二甲基三硫和甲基烯丙基三硫是藠頭的主要組成,分別占揮發(fā)油總量的19.82%和23.06%。郭海忱等[19]利用水蒸氣蒸餾等方法處理得到淺黃色油狀物,經(jīng)研究表明薤白揮發(fā)油中含量較高的是二甲基三硫醚和甲基丙烯基三硫醚。Emiko 等[20]研究了藠頭的揮發(fā)性物質(zhì),其中二甲基三硫含量為34.06%,二甲基二硫含量為19.32%,甲基丙烯基二硫含量為12.26%。黃芳等[21]運(yùn)用了色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對薤白揮發(fā)油進(jìn)行了研究,結(jié)果表明17 個(gè)組分中14種為含硫化合物,占揮發(fā)油總量的94.36%。

    1.3 含氮化合物

    含氮化合物是薤白中主要化學(xué)組成之一。該類化合物主要有N-反阿魏酰酪胺、N-對-香豆酰酪胺、色氨酸、鳥氨酸、腺苷、丁香苷、胸苷、2,3,4,9-四氫-1-甲基-1H-吡啶駢[3,4-b]吲哚-3-羧酸和 2,3,4,9-四氫-1H-吡啶駢[3,4-b]吲哚-3-羧酸等。其中因腺苷具有擴(kuò)張冠狀血管等藥理作用已被廣泛應(yīng)用于臨床,例如其可作為一種抗心律失常的藥物。

    彭軍鵬等[22]從中藥薤白中共分離得到6 種成分,分別為腺苷、丁香苷、色氨酸、胸苷、2,3,4,9-四氫-1-甲基-1H-吡啶駢[3,4-b]吲哚-3-羧酸和 2,3,4,9-四氫-1H-吡啶駢[3,4-b]吲哚-3-羧酸,其中也有含氮化合物。何祥久等[23]用60%乙醇溶液提取薤白,并用不同極性的萃取劑進(jìn)行萃取,然后用硅膠柱層析等方法進(jìn)行分離,共得到了10 個(gè)化合物,其中5 種為含氮化合物。

    1.4 脂肪酸類化合物

    薤白中具有多種脂肪酸類化合物,主要包含油酸、亞麻酸、木脂酸、花生酸、丁二酸、對羥基肉桂酸、棕櫚酸、對羥基苯甲酸、21-甲基二十三烷酸和谷甾醇等。

    夏新奎等[24]將薤白粉碎樣品置于索氏提取器中,用石油醚進(jìn)行回流提取,經(jīng)研究后共得到16 個(gè)化合物,其中脂肪酸的主要成分亞油酸占31.146%、棕櫚酸占17.898%、油酸占17.471%、谷甾醇占14.527%。

    1.5 多糖類化合物

    蔗糖、葡萄糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、-D-吡喃果糖等是該類化合物的主要組成。其中PAMIb、PAM-Ⅱa 和 PAM-Ⅲ'主要級分為均一多糖,PAMIb 中的關(guān)鍵成分是葡萄糖和半乳糖;PAM-Ⅱa 的關(guān)鍵成分是木糖、鼠李糖、葡萄糖;PAM-Ⅲ'的關(guān)鍵成分是葡萄糖、木糖、半乳糖。多糖類化合物在臨床應(yīng)用中也發(fā)揮著越來越重要的作用。

    杜敏華等[25]將小根蒜切碎后用果膠酶進(jìn)行水解后進(jìn)行脫脂、去蛋白、果膠用乙醇進(jìn)行分級醇析,并進(jìn)行純化鑒定,結(jié)果表明,小根蒜中的單糖組分主要是葡萄糖和果糖。韓秋菊等[26]對于薤白中的多糖化合物進(jìn)行了研究,經(jīng)分析后得知其除具有抗氧化作用外,還擁有清除羥基自由基的能力,同時(shí)還發(fā)現(xiàn)其還原Fe3+的作用比較弱。甘楊子等[27]對薤白多糖的提取及分離鑒定進(jìn)行了探索,并以小鼠股骨BMSCs 為模型,研究其對細(xì)胞DNA 的作用。

    1.6 其他

    在薤白中還發(fā)現(xiàn)含有蘇氨酸、色氨酸、絲氨酸和丙氨酸等17 種氨基酸,此外還含有瓜氨酸、N-甲基脯氨酸、前列腺素A1 和B1、-谷甾醇、胡蘿卜苷、胡蘿卜苷十一烷酸酯、琥珀酸、紫丁香苷、己六醇、P-谷留醇和無機(jī)微量元素等。

    斯琴[28]通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)小根蒜中包含天冬氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、精氨酸和脯氨酸等氨基酸,約占其總含量的83.52%。吳素珍等[29]通過火焰原子吸收光譜法分析發(fā)現(xiàn)薤白中含有 Fe、Cu、Zn、Mn、Ca、Mg 元素。

    2 薤白中有效成分的提取分離方法

    薤白中有效成分的提取分離過程大致為:首先將薤白進(jìn)行適當(dāng)粉碎,要保證藥材粉碎的粒度適中,然后根據(jù)試驗(yàn)的需求選擇適當(dāng)?shù)囊掖紳舛葋硖崛∞字械挠行С煞?,根?jù)需要可以利用超聲波進(jìn)行輔助提取,提取的時(shí)間則應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)條件決定;隨后對提取液進(jìn)行減壓濃縮,至無醇味即可;然后根據(jù)試驗(yàn)選擇不同種類的萃取劑進(jìn)行萃取,回收萃取劑,或者是利用吸附樹脂、硅膠柱色譜和ODS 柱色譜等進(jìn)行分離洗脫,再結(jié)合制備色譜等方法進(jìn)行分離純化,最后得到目標(biāo)化合物。

    2.1 甾體皂苷類的提取分離

    陳海峰等[12]將薤白60% 的乙醇提取液先進(jìn)行減壓濃縮后,通過HP-20 大孔吸附樹脂,然后用不同的溶劑進(jìn)行洗脫處理,減壓濃縮至膏狀,用甲醇進(jìn)行回流提取,之后用硅膠柱色譜分離后,用氯仿、甲醇等再次進(jìn)行洗脫,將洗脫部分進(jìn)ODS 柱色譜后再進(jìn)行洗脫,合并洗脫部分并用Rp-18 高效液相色譜進(jìn)行純化,最終得到皂苷類化合物。陳海峰等[30-31]對薤白中的呋甾皂苷I 進(jìn)行了深入的研究,將薤白的甲醇提取液過濾后,經(jīng)過硅膠柱色譜并收集其洗脫的部分,然后用常壓ODS柱分離后可以得到對照品;薤白提取物的制備則利用60%乙醇浸泡藥材過夜,經(jīng)回流過濾后再用60%乙醇提取,回流濾過,合并濾液,將乙醇回收后通過D101大孔樹脂,洗柱,將洗脫液減壓回收,進(jìn)行干燥即得。

    顧維等[32]通過正交試驗(yàn)確定了薤白的提取工藝是藥材用量一定時(shí),利用水提法進(jìn)行提取,共提取3次,每次需要2 h,將濾過后的溶液經(jīng)大孔吸附樹脂進(jìn)一步純化,具體操作步驟如下將提取液流經(jīng)D101 大孔樹脂柱,吸附3 h 后用不同溶劑進(jìn)行清洗至無色,再用60% 乙醇進(jìn)行洗脫,將收集得到的溶液部分進(jìn)行濃縮,然后再通過真空干燥,即得皂苷類化合物。劉劍青[33]將藠頭干粉加入一定量乙醇溶液,在一定溫度下進(jìn)行回流,然后過濾,將濾液蒸發(fā)濃縮,濃縮液加入少量蒸餾水溶解,用正丁醇萃取,再回收正丁醇,蒸干即得皂苷化合物。關(guān)峰等[34]運(yùn)用超聲波輔助提取法,用70%的乙醇溶液提取鱗莖粉末,過濾離心,清除殘?jiān)?,合并濾液,濃縮后用極性不同的萃取劑進(jìn)行萃取3 次,然后進(jìn)行減壓濃縮,所得物質(zhì)呈灰白色膏狀;經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)超聲功率500 W 的條件下,固液比1∶50、提取溫度64 ℃時(shí),得到薤白總皂苷的量最大。曹紅等[35]通過瓜蔞薤白水提物和醇提物進(jìn)行對比,以小鼠常壓耐心肌缺氧作為模型,比較了這2 種提取物的藥效學(xué)。

    2.2 揮發(fā)油成分的提取分離

    薤白中揮發(fā)油的提取分離過程大致為:運(yùn)用水蒸氣蒸餾法或醇提法進(jìn)行提取,需要時(shí)可用超聲法進(jìn)行輔助提取,采用石油醚進(jìn)行收集,之后除去萃取劑,即得所需成分。

    彭軍鵬等[18]將搗碎的鱗莖放入合適的容器內(nèi)中,先用水蒸氣進(jìn)行蒸餾,然后繼續(xù)用石油醚進(jìn)行收集,下一步是將收集所得產(chǎn)物進(jìn)行除去石油醚的操作,最終得到淺黃色油狀液體,并且可以聞到揮發(fā)油具有有蔥的味道。張卿等[36]利用水蒸氣蒸餾法提取,石油醚進(jìn)行萃取,蒸除石油醚,用所得的薤白揮發(fā)油進(jìn)一步研究了其對S180 荷瘤小鼠免疫功能的影響以及抗腫瘤作用。吳志民等[37]用水蒸氣蒸餾法提取,石油醚萃取,并用所得揮發(fā)油誘導(dǎo)人胃癌細(xì)胞的凋亡。林琳等[38]對該類化合物同樣進(jìn)行了深入的研究,分別采用了超臨界CO2 萃取法和水蒸氣蒸餾法。其中超臨界CO2 萃取方法運(yùn)用到了萃取釜等裝置,因?yàn)檫@種裝置具有較高的萃取效率,有利于對化合物的提取。萃取釜中裝入藥物,根據(jù)試驗(yàn)所需進(jìn)行條件的設(shè)置,如萃取壓力設(shè)為25 MPa、萃取溫度設(shè)為40 ℃在25 L/h CO2 流量條件下進(jìn)行萃取,最后采用色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)將所得化合物進(jìn)行分析鑒定。

    蔣合眾等[39]取薤白樣品粉末投入萃取釜中,利用了正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),選擇了溫度、萃取壓力和萃取時(shí)間3個(gè)因素作為其考察的部分;此試驗(yàn)用到了萃取釜,在一定的萃取壓力和 CO2 流量的條件下,先進(jìn)行靜態(tài)萃取,然后則進(jìn)行動態(tài)萃取。黃芳等[21]將藥材粉末按照一定的固液比,利用水提法進(jìn)行提取,并利用超聲輔助提??;此方法運(yùn)用到了揮發(fā)油測定器和回流冷凝裝置,將裝有提取液的燒瓶通過加熱的方法對揮發(fā)油進(jìn)行提取,然后利用充滿水和正己烷的揮發(fā)油測定器對揮發(fā)油進(jìn)行收集,主要是收集環(huán)己烷層,再利用水浴法將正己烷除去,將所得部分進(jìn)行干燥,最后所得的物質(zhì)即為薤白揮發(fā)油,并用響應(yīng)面法對該類化合物的提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。孫穎等[40]將蒜泥置于圓底燒瓶中,料液比1∶5(g∶mL),加入有機(jī)溶劑,充分混合后濾出溶劑,分離后收集有機(jī)溶劑,重復(fù)以上操作3 次,最后將提取液合并,重蒸,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀富集濃縮,后氮吹,得到深黃色透明液體。韓成花等[41]取鮮薤白鱗莖和葉進(jìn)行干燥,置于圓底燒瓶加蒸餾水浸泡,并用超聲波清洗器超聲30 min,再加入2 mL 的環(huán)己烷,用水蒸氣蒸餾法提取5 h,用無水硫酸鈉干燥脫水,最后得到淡黃色薤白揮發(fā)油。

    2.3 含氮化合物的提取分離

    劉岱琳等[42]對薤白中的腺苷進(jìn)行了進(jìn)一步的研究,將60% 乙醇提取溶液進(jìn)行回流提取,提取分為2次,第1 次時(shí)間為3 h,第2 次時(shí)間為1 h,將合并后的濾液進(jìn)行定容操作,將蒸干后的提取液進(jìn)行溶解,然后離心除去沉淀,最后將所得溶液經(jīng)過微孔濾膜進(jìn)一步過濾,即得到樣品溶液。何祥久等[23]將薤白60% 的乙醇提取液進(jìn)行回流提取3 次,合并3 次所得的提取液,將溶劑進(jìn)行減壓回收,此時(shí)物質(zhì)呈浸膏狀,用水將浸膏分散開,依次用等體積的、不同極性的萃取劑進(jìn)行萃取,包括乙酸乙酯和水飽和正丁醇,萃取3 次,再經(jīng)大孔吸附樹脂分離,用水、乙醇等梯度洗脫,再利用硅膠柱層析、Diaion HP-20、Rp18 HPLC 等方法進(jìn)行下一步的純化。蘇彥斌等[43]利用超聲波輔助提取法進(jìn)行藥材活性成分的提取,取出后放冷,以5 000 r/min 離心后取上清液,并將其放入量瓶中,殘?jiān)?0% 乙醇繼續(xù)進(jìn)行超聲后取出放冷,以相同的條件進(jìn)行離心,合并2次所得的上清液,用60%乙醇稀釋至50 mL,搖勻,用作供試品溶液。

    2.4 脂肪酸類化合物的提取分離

    夏新奎等[24]將藥材粉末放入索氏提取器中,用石油醚進(jìn)行回流提取,將提取液濃縮蒸干,即得脂肪酸類化合物??敌|等[13]用70%乙醇提取薤白中的有效成分,將提取液合并后回收溶劑,所得物質(zhì)用適量的水溶解,再用不同極性的萃取劑進(jìn)行萃取。將不同的萃取層用不同的色譜方法進(jìn)行洗脫分離,經(jīng)分析檢測到琥珀酸、胡蘿卜苷十一烷酸酯等化合物。

    2.5 薤白多糖的提取分離

    夏新奎等[44]利用甲醇回流的方法將藥材粉末中脂肪除去,抽濾后將藥渣進(jìn)行風(fēng)干;后用80% 乙醇將其中所含有的小分子糖、生物堿和苷類等物質(zhì)除去,再次風(fēng)干藥渣;采用正交試驗(yàn)的方法,對提取的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化,將溫度、時(shí)間和液料比作為3 種因素,進(jìn)行多糖的提??;利用離心法將水提液中的雜質(zhì)去除,經(jīng)過醇沉后過濾,用丙酮、無水乙醇等溶劑洗滌幾次,真空干燥后即得產(chǎn)物。張鳳等[45]利用水提法進(jìn)行超聲提取藥材中的有效成分,離心過濾后減壓濃縮,然后用80%乙醇提取,真空干燥得薤白多糖,用胰蛋白酶可除去薤白多糖中的蛋白質(zhì)。韓秋菊等[26]將薤白的水提物通過加熱來提取多糖成分;將殘?jiān)鋈ズ笥么汲练ㄟM(jìn)行沉淀,并收集離心后的沉淀;用無水乙醚和無水乙醇洗滌得到的沉淀物,洗完后進(jìn)行晾干,即得目標(biāo)化合物。鄭如剛[46]先將藥品于乙醇中進(jìn)行回流,減壓過濾后將且其中的藥渣在進(jìn)行水提取,濃縮濾液后用木瓜蛋白酶等除去蛋白,H2O2 脫色后加無水乙醇,使醇度達(dá)到80%以上,靜置過濾后用無水乙醇、乙醚、丙酮等溶劑進(jìn)行洗滌,所得的多糖經(jīng)透析48 h 后醇沉,干燥沉淀后得半純薤白多糖。張占軍[47]取薤白粉末用石油醚回流脫脂,于55 ℃烘干,再用80%乙醇回流,于65 ℃烘干,粉碎,加水磁力攪拌浸提,離心將上清液濃縮后進(jìn)行醇沉,所得沉淀物用無水乙醇、丙酮和乙醚等溶劑洗滌干燥后即得。

    2.6 其他成分的提取分離

    吳素珍等[29]用濃硝酸將藥材粉末進(jìn)行溶解,后利用微波消解儀進(jìn)行微波消解,然后通過水浴加熱將酸除去,最后用稀硝酸進(jìn)行稀釋至相應(yīng)刻度以備測量時(shí)使用。黃少輝[48]分別利用回流法和超聲法提取藠頭和小根蒜中的氨基酸及其衍生物。其中回流法是用甲醇浸泡干凈的鱗莖,4 ℃過夜,用榨汁機(jī)勻漿后進(jìn)行攪拌回流,將其冷卻后進(jìn)行抽濾,并收集濾液;所得到的濾渣再次通過甲醇處理,將2 次的濾液合并在一起。在恒壓滴液漏斗儀器內(nèi),將濾液倒入鹽酸中,并且要不斷地進(jìn)行攪拌,將其中的沉淀去除后用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)的方法進(jìn)行濃縮,最后將所得到的物質(zhì)保存在4 ℃的環(huán)境下。而超聲法與回流法唯一的不同是其運(yùn)用冰水浴的方法進(jìn)行超聲提取,接下來的步驟則與回流法相同。

    3 小結(jié)

    通過對薤白化學(xué)成分分類總結(jié)發(fā)現(xiàn),薤白中所含有的部分化學(xué)物質(zhì)在臨床應(yīng)用中具有極其重要的作用,所以對其進(jìn)行深入的研究是至關(guān)重要的。如甾體皂苷類、多糖類和薤白揮發(fā)油成分體現(xiàn)出了抗腫瘤作用;甾體皂苷類、含硫化合物和含氮化合物具有抑制血小板聚集的作用。結(jié)合每種化學(xué)成分的特點(diǎn),通過不同的提取條件,如乙醇濃度、蒸發(fā)溫度或萃取試劑及超聲條件來提取出不同的化合物,發(fā)現(xiàn)新的成分,為后續(xù)的研究奠定基礎(chǔ)。

    在薤白化學(xué)成分提取部分,大多數(shù)學(xué)者選用了醇提法、水提法或者水蒸氣蒸餾法,不同的是選擇提取的次數(shù)和時(shí)間有所差異,有的學(xué)者還用超聲波進(jìn)行了輔助提取。在醇提法中,常用60%、70%、75% 和 90% 濃度乙醇作為溶劑。在水提法中需要注意的是除了可提取出有效成分外,同時(shí)還可以提取出一些水溶性雜質(zhì),如淀粉、蛋白質(zhì)、黏液質(zhì)等,為了提高有效成分的質(zhì)量,可用相應(yīng)方法除去雜質(zhì),如張鳳等[45]則用胰蛋白酶除去了薤白多糖中的蛋白質(zhì);而在醇提法中則可避免淀粉、蛋白質(zhì)等成分的浸出。在提取揮發(fā)油成分時(shí)則用的是水蒸氣蒸餾法,該法也僅適合于能隨水蒸氣蒸餾不被破壞,具有揮發(fā)性的物質(zhì)。除此之外還有超臨界CO2萃取法,該方法中用到了萃取斧,此裝置具有較高的萃取效率,有利于有效成分的提取。在溶劑萃取法中,常用的萃取劑有石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水飽和正丁醇等,該法提取分離效率高,且消耗的試劑量少。在分離純化部分,學(xué)者們則用到了吸附樹脂、硅膠柱色譜、ODS柱色譜和高效液相色譜等方法,因其具有選擇性好、吸附速度快、柱效高、分離速度快等優(yōu)點(diǎn)。

    該研究首先對薤白的化學(xué)成分進(jìn)行了分類和總結(jié),包括甾體皂苷類化合物、含硫化合物、含氮化合物、脂肪酸類化合物、多糖類化合物及其他,然后對薤白的提取分離方法進(jìn)行了歸納,包括水蒸氣蒸餾法、超聲提取法和溶劑萃取法等在薤白中不同類型化學(xué)成分提取分離中的應(yīng)用,并對不同方法提取出成分的藥理作用進(jìn)行了進(jìn)一步的綜述,以期將其更好地應(yīng)用于臨床,可有效地發(fā)揮中藥薤白更大的藥用保健價(jià)值。

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