免疫熒光法在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果觀(guān)察

楊夏萍

摘 要：目的 本臨床研究主要是為了探討免疫熒光法在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果觀(guān)察。方法 本試驗(yàn)的研究方法是收集2019年1月01日～2020年3月31日的100例上呼吸道感染患者作為本次試驗(yàn)的觀(guān)察對(duì)象，采用免疫熒光法對(duì)患者的鼻、咽、喉等部位的分泌物樣本進(jìn)行快速檢驗(yàn)，主要觀(guān)察患者的病毒感染種類(lèi)以及感染率等情況。結(jié)果 本次研究結(jié)果顯示，100例上呼吸道感染患者中病毒感染為100%，其中腺病毒感染最多，約占45%，其次是流感病毒感染，約占25%，感染最少的是副流感病毒，僅有9%。結(jié)論 對(duì)上呼吸道感染患者采用免疫熒光法進(jìn)行快速檢驗(yàn)，能對(duì)患者疾病的進(jìn)展和后期的治療及預(yù)后有較好的參考依據(jù)，能有效提高患者治療效果，值得在臨床上廣泛推薦使用。

關(guān)鍵詞：免疫熒光法;微生物;快速檢驗(yàn);上呼吸道感染

免疫熒光法主要結(jié)合免疫學(xué)方法和熒光標(biāo)記技術(shù)組成，其是用來(lái)研究特異性蛋白抗原在細(xì)胞的內(nèi)分布情況。免疫熒光法是由于熒光素所散發(fā)出來(lái)的熒光，其被熒光顯微鏡檢測(cè)出來(lái)，進(jìn)一步能對(duì)抗原進(jìn)行精準(zhǔn)的細(xì)胞定位[1]。免疫熒光法是現(xiàn)階段國(guó)內(nèi)外診斷學(xué)最常用的方法之一，其主要是檢驗(yàn)速度快，同時(shí)還具有較高的敏感度和特異度，在臨床上常用于細(xì)菌、真菌以及病毒等微生物的快速檢驗(yàn)中。大部分的上呼吸道感染均是有病毒感染引起，包括流感病毒、副流感病毒、腺病毒等。免疫熒光法能有效的，準(zhǔn)確的診斷病毒感染的類(lèi)型，臨床醫(yī)生給予此再針對(duì)性給予患者進(jìn)行治療[2]。因此，本研究收集時(shí)間為2019年1月01日～2020年3月31日，共有100例上呼吸道感染患者作為本次試驗(yàn)的觀(guān)察對(duì)象，主要是為了探討免疫熒光法在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果觀(guān)察。具體報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1基本資料

本研究收集時(shí)間為2019年1月01日～2020年3月31日，共有100例上呼吸道感染患者作為本次試驗(yàn)的觀(guān)察對(duì)象。100例患者中56例為男性，44例為女性，年齡為15～70歲，平均年齡為（43.32±5.35）歲;疾病類(lèi)型包括34例咽部感染、36例喉部感染以及30例鼻部感染。本次納入研究的100例患者年齡均在10歲以上，70周歲以下，且符合我國(guó)上呼吸道感染的診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者;排除急性疾病患者以及肝腎功能障礙等;排除依從性較差的患者，不服從本臨床試驗(yàn)安排的患者。納入研究的100例患者簽署了臨床試驗(yàn)知情同意書(shū)，自愿加入本次臨床試驗(yàn);且本次試驗(yàn)中所有患者的臨床資料均通過(guò)本院倫理委員會(huì)審核。

1.2研究方法

1.2.1試劑與儀器

本次試驗(yàn)選用的是美國(guó)DHI公司的熒光檢測(cè)試劑盒，主要包括熒光標(biāo)志單克隆抗體試劑盒、熒光標(biāo)志抗體試劑盒。

1.2.2具體方法

首先使用負(fù)壓吸引器提取患者鼻、咽及喉部分泌物，約2～3mL，然后再將其分別放置無(wú)菌生理鹽水中，接著對(duì)分泌物進(jìn)行吹打，將其放置于離心管中，將分泌物進(jìn)行離心，其離心轉(zhuǎn)速控制為500 r/min，離心時(shí)間控制在8分鐘。再將沉淀物應(yīng)用磷酸鹽緩進(jìn)行沖洗并混合攪勻，再將沉淀物進(jìn)行離心處理，將清液去除，多次進(jìn)行清洗直至清液不再粘稠，最后遺留的沉淀物也在0.5～1.0 mL的磷酸鹽緩沖液，直至成為細(xì)胞懸液。最后將細(xì)胞懸液點(diǎn)于病原體的對(duì)照載玻片中，待風(fēng)干后再用冷丙酮對(duì)其進(jìn)行10分鐘中固定，使用熒光顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察[3]。

1.3觀(guān)察指標(biāo) 主要觀(guān)察患者的病毒感染種類(lèi)以及感染率等情況。1）陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：當(dāng)熒光顯微鏡顯示為綠色則代表陽(yáng)性，當(dāng)無(wú)熒光則表示為陰性;另一方面，當(dāng)熒光顯微鏡放大200倍，發(fā)現(xiàn)≥2個(gè)熒光細(xì)胞則表示為陽(yáng)性。

1.4醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

兩組研究結(jié)果采用SPSS23.0醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行試驗(yàn)結(jié)果的研究分析;本次試驗(yàn)包括了計(jì)數(shù)資料和計(jì)量資料兩種，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行分析，計(jì)量資料應(yīng)用T檢驗(yàn)進(jìn)行分析，P≤0.05作為有明顯差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05作為無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

100例上呼吸道感染患者中病毒感染為100%，其中腺病毒感染最多，約占45%，其次是流感病毒感染，約占25%，感染最少的是副流感病毒，僅有9%。（見(jiàn)表1）

3討論

臨床上所稱(chēng)的上呼吸道感染主要是指鼻腔、咽部、喉部等均出現(xiàn)的急性炎癥總稱(chēng)，其包括了普通感冒、咽結(jié)膜熱、病毒性咽炎、喉炎、皰疹性咽峽炎等;具有較高的發(fā)病率和自限性等特點(diǎn)[4]。其免疫熒光法主要是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)原理，將已知抗原/抗體標(biāo)記上熒光素，再次基礎(chǔ)上制備成一種熒光標(biāo)記物，再使用此類(lèi)熒光抗體/抗體作為分子探針對(duì)細(xì)胞或/組織中相應(yīng)抗體進(jìn)行檢驗(yàn)。其能有效的觀(guān)察到熒光所在細(xì)胞/組織的具體位置，從而準(zhǔn)確地判斷出抗原/抗體的性質(zhì)[5]。目前臨床上將免疫熒光技術(shù)劃分為熒光抗體法、熒光抗原法等兩類(lèi)，將熒光抗體檢驗(yàn)相應(yīng)抗原法簡(jiǎn)稱(chēng)為熒光抗體法，而另一種將已知熒光抗原標(biāo)記物檢驗(yàn)相應(yīng)抗體法，趁之為熒光抗原法[6]。與熒光抗原法相比熒光抗體法更為常用。本次研究結(jié)果顯示，100例上呼吸道感染患者中病毒感染為100%，其中腺病毒感染最多，約占45%，其次是流感病毒感染，約占25%，感染最少的是副流感病毒，僅有9%。

綜上所述，對(duì)上呼吸道感染患者采用免疫熒光法進(jìn)行快速檢驗(yàn)，能對(duì)患者疾病的進(jìn)展和后期的治療及預(yù)后有較好的參考依據(jù)，能有效提高患者治療效果，值得在臨床上廣泛推薦使用。

[參考文獻(xiàn)]

[1]孫續(xù)祿.免疫熒光法在小兒上呼吸道感染微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果[J].國(guó)際感染病學(xué)（電子版），2020，9（02）：105.

[2]郭麗.免疫熒光法在呼吸道病毒快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].山東醫(yī)學(xué)高等專(zhuān)科學(xué)校學(xué)報(bào)，2019，41（03）：193-194.

[3]李觀(guān)穎.免疫熒光法在小兒上呼吸道感染微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用[J].臨床研究，2019，27（01）：144-145.

[4]翟晶晶.免疫熒光法在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J].首都食品與醫(yī)藥，2018，25（06）：36.

[5]劉典浪.免疫熒光法運(yùn)用在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代診斷與治療，2016，27（14）：2666-2667.

[6]艾春英.免疫熒光法在微生物快速檢驗(yàn)中的應(yīng)用研究[J].中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014，8（08）：114-115.

（作者單位：無(wú)錫衛(wèi)生高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校，江蘇 無(wú)錫?214028）