非酒精性脂肪肝患者肝功能、氧化應(yīng)激水平變化及臨床意義

王永斌，陸奎英，蘇 勇，張 俊，劉付弟

（揚(yáng)州大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，江蘇 揚(yáng)州 225001）

非酒精性脂肪肝是臨床常見(jiàn)疾病，臨床病例特征主要包括肝脂肪變性以及脂肪異常積蓄，是無(wú)明顯飲酒史及既往肝病史的臨床代謝綜合征。近年來(lái)，其發(fā)病率逐年上升，且患病人群逐漸年輕化[1-2]?；颊甙l(fā)生非酒精性脂肪肝后肝臟呈現(xiàn)逐步硬化狀態(tài)，致使患者進(jìn)一步發(fā)生肝硬化、肝癌等疾病，嚴(yán)重威脅到患者生命安全，在臨床中應(yīng)當(dāng)采取積極措施及時(shí)干預(yù)治療[3]。肝臟組織活檢是常用的檢查脂肪肝的方式，但該項(xiàng)檢查具有一定侵入性，大部分患者不愿接受該治療方式，然而非酒精性脂肪肝在疾病前期缺乏典型臨床癥狀，如何對(duì)其進(jìn)行及時(shí)、有效的診斷是避免患者發(fā)展為肝硬化、肝癌等的關(guān)鍵所在[4]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)非酒精性脂肪肝患者肝功能會(huì)出現(xiàn)不同程度異常改變，氧化應(yīng)激變化在非酒精性脂肪肝的病程發(fā)展中起極為重要的作用。本研究旨在探討非酒精性脂肪肝患者肝功能、氧化應(yīng)激水平變化及臨床意義。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2018年1月—2019年6月?lián)P州大學(xué)附屬醫(yī)院接收診治的120例非酒精性脂肪肝患者作為研究組，其中女54例、男66例，年齡（52.89±7.32）歲；體質(zhì)量指數(shù)（body mass index，BMI）為（26.80±3.36）kg/m2；病程為（4.04±1.05）年。2個(gè)組受試者基本資料相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者均符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南2010年修訂版》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；患者及健康者均知曉此研究，且自愿簽署同意書(shū)；患者及健康者資料完整且依從性好。排除標(biāo)準(zhǔn)：心腦血管疾病患者；嚴(yán)重精神障礙患者；嚴(yán)重心臟、肝腎功能異常患者；有長(zhǎng)期飲酒史患者。選取同期100名體驗(yàn)健康者作為對(duì)照組，其中女47名、男53名，年齡（52.32±7.28）歲；BMI為（25.93±3.32）kg/m2。

1.2 方法

2個(gè)組受試者均于住院當(dāng)天晚飯后禁飲食，次日清晨分別抽取其空腹外周靜脈血6 mL，999×g離心3 min分離血清，-80 ℃保存待檢。采用AU5800全自動(dòng)生化分析儀[貝克曼庫(kù)爾特商貿(mào)（中國(guó)）有限公司]對(duì)2個(gè)組受試者丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（aspartate aminotransferase，AST）及γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶（gamma-glutamyltransferase，GGT）水平進(jìn)行檢測(cè)；采用從南京建成生物工程研究所購(gòu)得的還原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）及總超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）試劑盒對(duì)2個(gè)組受試者的GSH、MDA、CAT、SOD水平進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比2個(gè)組受試者肝功能[ALT、AST及GGT]及氧化應(yīng)激水平[GSH、MDA、CAT、SOD]，采用Pearson相關(guān)性分析檢測(cè)肝功能及氧化應(yīng)激指標(biāo)與非酒精性脂肪肝的相關(guān)性，并采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析肝功能、氧化應(yīng)激水平及二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非酒精性脂肪肝患者的診斷價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，所有數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，計(jì)量資料以x±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)，指標(biāo)與疾病之間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)性分析，采用ROC曲線分析指標(biāo)檢測(cè)對(duì)疾病的診斷價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2個(gè)組受試者肝功能指標(biāo)水平比較

研究組ALT、AST、GGT水平均明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 2個(gè)組受試者氧化應(yīng)激水平比較

研究組GSH、MDA水平均明顯較對(duì)照組高，CAT、SOD水平均明顯較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表1 2個(gè)組受試者肝功能指標(biāo)水平比較 U/L， ±s

表1 2個(gè)組受試者肝功能指標(biāo)水平比較 U/L， ±s

組別 例數(shù) ALT AST GGT對(duì)照組 100 23.36±3.37 21.64±3.15 20.85±3.08研究組 120 43.69±6.12 36.37±5.04 48.07±6.41 t值 12.349 10.873 15.256 P值 0.001 0.001 0.000

表2 2個(gè)組受試者氧化應(yīng)激水平比較 ±s

表2 2個(gè)組受試者氧化應(yīng)激水平比較 ±s

組別 例數(shù) GSH/（μmol/L） MDA/（U/mL） CAT/（U/mL） SOD/（U/mL）對(duì)照組 100 270.61±30.37 2.25±1.40 53.42±6.91 92.82±12.27研究組 120 321.84±42.75 6.30±2.02 40.72±6.20 80.27±11.78 t值 18.736 7.947 10.561 10.033 P值 0.000 0.006 0.002 0.002

2.3 肝功能及氧化應(yīng)激指標(biāo)與非酒精性脂肪肝的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，肝功能指標(biāo)及GSH、MDA水平與非酒精性脂肪肝呈正相關(guān)（r=0.835、0.722、0.741，P＜0.05），CAT、SOD水平與非酒精性脂肪肝呈負(fù)相關(guān)（r=-0.685、-0.712，P＜0.05）。

2.4 肝功能、氧化應(yīng)激水平及二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非酒精性脂肪肝的診斷價(jià)值

ROC曲線分析結(jié)果顯示，二者聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積（area uder curve，AUC）、敏感性及特異性均明顯高于肝功能、氧化應(yīng)激水平單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 肝功能、氧化應(yīng)激水平及二者聯(lián)合檢測(cè)對(duì)非酒精性脂肪肝的診斷價(jià)值

3 討論

非酒精性脂肪肝是較為常見(jiàn)的消化內(nèi)科疾病，其發(fā)病原因?yàn)楦螌?shí)質(zhì)細(xì)胞脂肪變性以及脂肪異常囤積無(wú)法排除體外[6]。近年來(lái)，隨著生活水平的逐步提高，非酒精性脂肪肝發(fā)病例數(shù)也呈上升趨勢(shì)，對(duì)患者的生命健康及生活質(zhì)量均產(chǎn)生嚴(yán)重影響。有研究結(jié)果顯示，非酒精性脂肪肝臨床發(fā)病率較高，且部分患者因治療不及時(shí)，由單純脂肪肝轉(zhuǎn)變?yōu)楦窝?、肝硬化等疾病，甚至有部分患者進(jìn)展為肝衰竭、肝癌等[7]。因此，如何在早期診斷患者非酒精性脂肪肝病程，一直是臨床研究的熱點(diǎn)。

肝臟在人體代謝過(guò)程中起著極為重要的樞紐作用，當(dāng)人體肝臟出現(xiàn)細(xì)微變化時(shí)，會(huì)引起人體代謝及消化系統(tǒng)諸多不適，腸道細(xì)菌過(guò)度生長(zhǎng)引起炎性因子改變，致使肝臟受損[8]。當(dāng)人體肝臟受到損傷時(shí)，ALT、AST會(huì)進(jìn)入血液循環(huán)，血液中ALT、AST明顯上升，通過(guò)檢測(cè)人體血液中ALT、AST水平即能夠判斷肝臟受損程度；GGT分布以腎臟為主，也分布于肝臟細(xì)胞質(zhì)與肝內(nèi)膽管，肝臟疾病會(huì)導(dǎo)致GGT活性上升，體內(nèi)含量明顯升高，通過(guò)GGT水平檢測(cè)對(duì)肝臟疾病的診斷具有重要意義[9-10]。非酒精性脂肪肝患者脂肪大量沉積致使正常組織結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，導(dǎo)致肝細(xì)胞脂肪變性，造成肝臟功能異常。ALT、AST、GGT作為診斷肝臟疾病的重要指標(biāo)，能夠有效反映肝臟疾病嚴(yán)重程度[11]。本研究結(jié)果顯示，相比健康者，非酒精性脂肪肝患者體內(nèi)ALT、AST、GGT水平明顯升高，通過(guò)分析患者體內(nèi)ALT、AST、GGT等肝功能指標(biāo)水平，能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)患者肝臟病變程度，以對(duì)患者進(jìn)行及時(shí)的干預(yù)治療。

MDA是評(píng)估患者氧化應(yīng)激反應(yīng)的指標(biāo)之一，當(dāng)患者機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激時(shí)，氧化后的脂肪酸會(huì)逐漸分解為MDA等多種復(fù)雜化合物，導(dǎo)致患者機(jī)體MDA水平升高；GSH屬于氧自由基的一種，氧化能力強(qiáng)且性質(zhì)活潑，對(duì)有機(jī)物、無(wú)機(jī)物反應(yīng)速率極快，是造成組織脂質(zhì)過(guò)氧化的主要因素；SOD是重要的氧自由基代謝劑；CAT能夠有效清除機(jī)體過(guò)氧化產(chǎn)物，保護(hù)細(xì)胞組織免受自由基損傷[11-14]。正常人體氧化與抗氧化處于一個(gè)相對(duì)平衡的狀態(tài)，但由于患者機(jī)體內(nèi)存在胰島素抵抗以及外周脂肪動(dòng)員過(guò)多，會(huì)導(dǎo)致游離脂肪酸的大量產(chǎn)生，進(jìn)而引起β氧化超載[15]。肝細(xì)胞因氧化物過(guò)量而導(dǎo)致抗氧化能力下降，從而消耗更多抗氧化因子以抵抗氧化物，隨著這一進(jìn)程的緩慢發(fā)展，氧化物與抗氧化物之間動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，最終導(dǎo)致脂質(zhì)過(guò)氧化。脂質(zhì)過(guò)氧化可產(chǎn)生大量活潑且高毒素的中間產(chǎn)物，影響肝臟細(xì)胞的正常功能，炎癥反應(yīng)的出現(xiàn)使得炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)肝實(shí)質(zhì)。本研究結(jié)果顯示，相比健康者，非酒精性脂肪肝患者體內(nèi)GSH、MDA水平明顯更高，CAT、SOD水平明顯更低，說(shuō)明非酒精性脂肪肝患者存在氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過(guò)氧化狀態(tài)，GSH、MDA水平異常升高到超出CAT、SOD清除能力，致使患者肝臟細(xì)胞質(zhì)過(guò)度氧化，細(xì)胞受到創(chuàng)傷后進(jìn)一步損傷線粒體、溶酶體，最終導(dǎo)致炎癥反應(yīng)加重，加速患者肝硬化進(jìn)程。

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，肝功能指標(biāo)及GSH、MDA水平與非酒精性脂肪肝呈正相關(guān)，CAT、SOD水平與非酒精性脂肪肝呈負(fù)相關(guān)，說(shuō)明肝功能及GSH、MDA水平越高，CAT、SOD水平越低，患非酒精性脂肪肝的風(fēng)險(xiǎn)越大，檢測(cè)肝功能及氧化應(yīng)激水平對(duì)臨床診斷非酒精性脂肪肝意義重大。ROC曲線分析結(jié)果顯示，二者聯(lián)合檢測(cè)的AUC、敏感性及特異性均明顯高于肝功能、氧化應(yīng)激水平單獨(dú)檢測(cè)，說(shuō)明將肝功能、氧化應(yīng)激水平二者聯(lián)合檢測(cè)有利于診斷、評(píng)估患者病情，對(duì)臨床及時(shí)采取有效措施預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝有重要意義。

綜上所述，相比健康者，非酒精性脂肪肝患者肝功能及氧化應(yīng)激損傷更為嚴(yán)重，檢測(cè)患者肝功能、氧化應(yīng)激狀況對(duì)診斷、評(píng)估其病情有一定價(jià)值；肝功能及GSH、MDA水平越高，CAT、SOD水平越低，發(fā)生非酒精性脂肪肝的風(fēng)險(xiǎn)越大；肝功能及氧化應(yīng)激水平聯(lián)合檢測(cè)可以有效提高臨床診斷非酒精性脂肪肝的敏感性和特異性，對(duì)及時(shí)采取措施預(yù)防和治療非酒精性脂肪肝意義重大，值得被臨床廣泛應(yīng)用。