防止黃體酮陰道栓丟失和引發(fā)感染的技術(shù)改進探索

張鑫 眭丹 劉國鎖 郭啟勇 吳心華*

（1，寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院 750021；2，寧夏中牧億林畜產(chǎn)股份有限公司 750011）

隨著畜牧業(yè)現(xiàn)代化發(fā)展,肉羊大規(guī)模生產(chǎn)中應(yīng)用同期發(fā)情技術(shù)控制繁殖進度已呈常態(tài)化。母羊妊娠期為150d,如果在產(chǎn)后30d 內(nèi)能成功受孕就能實現(xiàn)一年兩產(chǎn),使年繁殖率成倍升高[1]。常年發(fā)情的國寶小尾寒羊,在營養(yǎng)條件滿足和飼養(yǎng)管理得當?shù)那闆r下可自然發(fā)揮出一年兩產(chǎn)的高效生產(chǎn)性能。但對其他季節(jié)性發(fā)情的綿羊則必須采用黃體酮栓介導(dǎo)的同期發(fā)情技術(shù)來縮短胎間隔,實現(xiàn)兩年三產(chǎn)或一年兩產(chǎn)。

鹿科動物與牛羊同屬反芻類草食動物,鹿產(chǎn)業(yè)是經(jīng)濟效益優(yōu)于牛羊產(chǎn)業(yè)的高端草畜產(chǎn)業(yè)。由于國內(nèi)外鹿產(chǎn)品消費市場逐年攀升,國內(nèi)鹿產(chǎn)業(yè)正在迅猛發(fā)展。個體養(yǎng)殖戶投身養(yǎng)鹿業(yè)的越來越多。雜交育種在鹿產(chǎn)業(yè)中的應(yīng)用廣泛,參加鹿王大賽的純血梅花鹿種鹿已極為少見。在國內(nèi)梅花鹿雜交育種和人工授精技術(shù)的推廣實踐中,技術(shù)人員在瀕臨鹿發(fā)情季節(jié)時埋置CIDR 黃體酮栓,使大批母鹿能在發(fā)情季節(jié)初期發(fā)情并受孕,從而控制大批仔鹿出生在涼爽干燥的春末夏初季節(jié)。在提高產(chǎn)羔成活率的同時,還可以保證較長的夏季生長時間,使仔鹿在入冬前獲得更大的體重,發(fā)揮出更好的生產(chǎn)性能。

筆者從2009 年至今一直從事綿羊高效繁殖技術(shù)應(yīng)用推廣和梅花鹿同期發(fā)情人工授精技術(shù)的臨床應(yīng)用和研究工作。在生產(chǎn)實踐中發(fā)現(xiàn),陰道埋置黃體酮栓引發(fā)陰道感染和栓體丟失的現(xiàn)象比較常見,該問題在相關(guān)文獻中[2]也曾被提及,但沒有深入的研究和討論。

1 常用黃體酮陰道栓的結(jié)構(gòu)及其優(yōu)缺點

黃體酮陰道栓是一類利用海綿或硅膠作為孕激素載體,埋置于母畜陰道內(nèi)的人工黃體,常用的有海綿栓和CIDR 栓。在同期發(fā)情處理程序中,用于延長群體中部分個體黃體期,使發(fā)情同期化。黃體酮栓+PMSG 可以在休情期母畜體內(nèi)模擬完整的性周期激素水平變化,從而得到較高的發(fā)情率和排卵率,是綿羊和梅花鹿同期發(fā)情處理的首選程序[3,4],尤其是誘導(dǎo)處于乏情季節(jié)綿羊的成功繁殖得到顯著效果[5]。

1.1 海綿栓

海綿栓的結(jié)構(gòu)如圖1 所示,是由圓柱形海綿和捆綁海綿的棉線組成。海綿栓的棉線較長,放置在陰道后露出外陰較多且材質(zhì)易吸附污物,所以導(dǎo)致感染和脫落問題普遍發(fā)生。在早期的應(yīng)用中因多發(fā)感染和粘連而不被接受,但其價格相對較便宜。

1.2 CIDR 栓

CIDR 栓的結(jié)構(gòu)如圖2 所示,采用塑料骨架和硅膠載體制作而成,塑料骨架延長為栓尾并在尾末端有一球狀結(jié)節(jié),以方便撤栓操作。因多為進口而來所以價格較高,但因使用方便不易污染、且發(fā)生感染時不與陰道壁粘連而被廣泛應(yīng)用。尤其是在胚胎移植供體羊、名貴種母羊和梅花鹿的同期發(fā)情中被大量使用。

2 黃體酮陰道拴在實踐應(yīng)用中存在的問題

黃體酮陰道栓埋置是借助一個類似于注射器的專用置入器進行。在實際生產(chǎn)中,一把置入器可重復(fù)清洗、安裝、埋置的工作,所以不可避免地對栓體造成污染。有的甚至徒手戴醫(yī)用乳膠手套用中指將海綿栓推入陰道內(nèi)[5],這樣造成的陰道感染率更高,多數(shù)母羊在撤栓時發(fā)生感染,甚至有惡臭的膿性液體從陰道內(nèi)流出,造成母羊不發(fā)情或發(fā)情時陰道內(nèi)污穢通過開放的子宮頸口污染子宮而引發(fā)不孕癥。筆者曾目睹某胚胎移植技術(shù)服務(wù)公司處理的受體羊發(fā)生大面積感染的事件。其徒手直接將栓體塞入陰道的過程極不衛(wèi)生,撤栓時母羊發(fā)生感染的高達90%以上,甚至發(fā)生粘連。這些現(xiàn)象勢必會影響人工授精技術(shù)在羊業(yè)和鹿業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用和推廣。

3 黃體酮陰道栓同期發(fā)情控制技術(shù)的探究與改進

圍繞生產(chǎn)過程中黃體酮栓引發(fā)感染和栓體丟失兩大問題,筆者通過多年的實踐對黃體酮栓在使用過程中的無菌操作流程進行多次改進。（1）埋栓時使用抗生素可以顯著降低感染率；（2）在埋栓過程中重復(fù)使用一把廠家生產(chǎn)的專用置入器（260元）,無論采取何種措施都不能完全杜絕因置入器造成的污染。而大量的自制簡易置入器（0.2 元）可以避免此問題,在埋置時即干凈又快捷；（3）栓體及栓尾必須埋入合適的深度,即能杜絕黃體酮栓丟失和感染現(xiàn)象,又能方便撤栓操作。

3.1 黃體酮陰道栓同期發(fā)情控制技術(shù)應(yīng)用初探

3.1.1 試驗材料

海綿栓、海綿栓專用置入器1 把（廠家配套生產(chǎn)）、CIDR栓、CIDR 栓專用置入器1 把（廠家配套生產(chǎn)）、0.1%高錳酸鉀溶液、消毒噴壺、青霉素+鏈霉素配制雙抗生理鹽水、陰道沖洗器、孕馬血清（寧波三生）。

3.1.2 試驗方法

選擇經(jīng)產(chǎn)空懷健康母羊60 只,平均分為兩組,分別進行海綿栓和CIDR 栓的埋置操作：（1）母羊站立保定,助手用裝有0.1%高錳酸鉀溶液的消毒噴壺清洗母羊外陰；（2）術(shù)者將栓體安裝入專用置入器內(nèi),左手兩指將陰唇撥開,右手將置入器插入陰道深部（注意：先向上傾斜45°插入,稍有阻力時再平行插入避免擦傷尿道口）,置入器官完全沒入陰道后推動頂桿將栓體推出并緩慢拔出置入器,栓尾露出外陰；（3）用噴壺清洗消毒雙手和置入器后繼續(xù)重復(fù)操作；（4）埋置12d 后撤栓,觀察栓體有無白色或黃色膿性液體污染,統(tǒng)計陰道感染情況、栓體丟失情況,并用雙抗生理鹽水沖洗陰道；（5）注射孕馬血清250IU；（6）統(tǒng)計撤栓后72h 發(fā)情率。

3.1.3 試驗結(jié)果

撤栓時統(tǒng)計栓體丟失率CIDR 栓13.3%,海綿栓6.7%；感染率分別為CIDR 栓33.3%,海綿栓60%；72h 內(nèi)發(fā)情率為CIDR 栓80%,海綿栓63.3%,見表1。

表1 初探感染率及丟栓率統(tǒng)計

3.2 黃體酮陰道栓同期發(fā)情控制技術(shù)的初次改進

針對感染和丟栓問題,對試驗一進行改進：埋CIDR 栓時使用抗生素預(yù)防感染、并且剪短栓尾防止丟栓。調(diào)整海綿栓棉線長度,并將棉線尾部系成環(huán)裝。將青霉素鏈霉素粉倒入海綿栓包裝袋中,使栓體吸附藥粉。

3.2.1 試驗材料

海綿栓、海綿栓專用置入器1 把（廠家配套生產(chǎn)）、CIDR栓、CIDR 栓專用置入器1 把（廠家配套生產(chǎn)）、0.1%高錳酸鉀溶液、消毒噴壺、剪刀、青霉素+鏈霉素配制雙抗液體石蠟、青霉素+鏈霉素配制雙抗生理鹽水、陰道沖洗器、孕馬血清（寧波三生）。

3.2.2 試驗方法

選擇經(jīng)產(chǎn)空懷健康母羊300 只,平均分為兩組,分別分5批進行海綿栓和CIDR 栓的埋置操作：（1）母羊站立保定,助手用裝有0.1%高錳酸鉀溶液的消毒噴壺清洗母羊外陰；（2）術(shù)者將栓體尾線剪短后安裝入專用置入器內(nèi),蘸取適量青霉素+鏈霉素配制雙抗液體石蠟。左手兩指將陰唇撥開,右手將置入器插入陰道深部,推動頂桿將栓體推出置入器后緩慢拔出置入器官；（3）用噴壺清洗消毒雙手和置入器官繼續(xù)重復(fù)操作；（4）埋置12d 后撤栓,統(tǒng)計陰道感染情況（栓體有白色或黃色膿腫包裹）、栓體丟失情況并用雙抗生理鹽水沖洗陰道；（5）注射孕馬血清250IU；（6）統(tǒng)計撤栓后72h 發(fā)情率。

3.2.3 試驗結(jié)果

在撤栓時統(tǒng)計CIDR 栓感染率和栓體丟失率分別降至6%和2.7%；海綿栓感染率和栓體丟失率分別降至8.7%和0.67%；72h 內(nèi)發(fā)情率為CIDR 栓99.3%,海綿栓96.7%。試驗數(shù)據(jù)達到理想效果,見表2。

表2 初次改進感染率及丟栓率統(tǒng)計

3.3 黃體酮陰道栓同期發(fā)情控制技術(shù)的再次改進

在梅花鹿人工輸精推廣試驗中,由于適宜的配種季節(jié)短暫,冷凍精液昂貴,同時防止某些傳染性疾病的傳播,同時減少抗生素在生產(chǎn)中的使用,要求同期發(fā)情及人工輸精操作時使用的器具必須為一次性使用消毒用具,從而杜絕產(chǎn)道感染和栓體丟失,以實現(xiàn)更高的情期受胎率。如此嚴苛的要求下不得不放棄可以重復(fù)使用的CIDR 專用置入器[6]。通過多次選擇和比對,筆者鎖定了一種耐110℃高溫蒸煮消毒,內(nèi)徑為12mm 的PEX 太陽能熱水管。將水管截為15～18cm 的小段,一端削為馬蹄形,且將邊緣鈍化制成簡易陰道栓置入器（如圖3 所示）。使用前進行清洗消毒備用。

3.3.1 試驗材料

海綿栓、CIDR 栓、自制簡易置入器60 支、一次性筷子60支、0.1%高錳酸鉀溶液、消毒噴壺、無菌袋（可用長臂手套代替）、孕馬血清（寧波三生）。

3.3.2 試驗方法

在埋栓前做好準備工作,將雙手洗凈消毒后把CIDR 栓逐個安裝入簡易CIDR 置入器內(nèi),安裝時注意將CIDR 栓尾與栓體對折并行,這樣安裝埋置后栓尾就不會露出外陰,從而避免經(jīng)栓尾造成陰道感染和因啃咬丟栓的現(xiàn)象。將安裝好栓體的置入器裝入無菌袋內(nèi)備用。

選擇經(jīng)產(chǎn)空懷健康母羊300 只,平均分為兩組,分別分5批進行海綿栓和CIDR 栓的埋置操作：埋栓時術(shù)者待助手用消毒液將母羊外陰清洗干凈后,左手兩指將陰唇撥開,右手將CIDR 置入器插入陰道深部,然后左手捏住置入器尾,右手持一次性筷子將栓體推出置入器,同時緩慢拔出置入器。用完的置入器清洗消毒保存以備下次使用。埋置12d 后撤栓,統(tǒng)計陰道感染情況（栓體有白色或黃色膿腫包裹）、栓體丟失情況,用雙抗生理鹽水沖洗感染羊只陰道；注射孕馬血清250IU；觀察統(tǒng)計撤栓后72h 發(fā)情率。

3.3.3 試驗結(jié)果

在撤栓時未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的感染和丟栓情況,試驗數(shù)據(jù)達到理想效果,見表3。

表3 再次改進感染率及丟栓率統(tǒng)計

3.4 改進后黃體酮陰道栓同期發(fā)情控制技術(shù)在梅花鹿的生產(chǎn)實踐

2019 年秋,在銀川、中衛(wèi)、固原的5 家梅花鹿養(yǎng)殖場,同期發(fā)情處理梅花鹿共98 只。

3.4.1 試驗材料

CIDR 栓、自制簡易置入器60 支、一次性筷子60 支、0.1%高錳酸鉀溶液、消毒噴壺、無菌袋（用長臂手套代替）、孕馬血清（寧波三生）。

3.4.2 試驗方法

（1）無菌操作將CIDR 栓尾與栓體對折并行安裝進置入器,安裝好栓體的置入器裝入無菌袋內(nèi)備用；（2）埋栓時,術(shù)者待助手用消毒液將母鹿的外陰清洗干凈后,左手兩指將陰唇撥開,右手將置入器插入陰道深部,然后左手捏住置入器尾,右手持一次性筷子將栓體推出置入器,同時緩慢拔出置入器。用完的置入器清洗消毒保存以備下次使用；（3）埋置12d 后撤栓,統(tǒng)計陰道感染情況（栓體有白色或黃色膿汁包裹）、栓體丟失情況并用雙抗生理鹽水沖洗感染母鹿陰道；（4）注射孕馬血清250IU；（5）統(tǒng)計撤栓后72h 發(fā)情率。

3.4.3 試驗結(jié)果

在撤栓時未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的感染和丟栓情況,發(fā)情率99%,試驗數(shù)據(jù)達到理想效果,見表4。

表4 改進后的技術(shù)在梅花鹿上的實踐效果統(tǒng)計

4 結(jié)論

傳統(tǒng)的埋栓方式栓體丟失和栓體造成的陰道感染多發(fā),造成同期發(fā)情率低。分析其主要原因為：（1）栓尾露出外陰容易被啃咬造成丟栓；同時露出的栓尾形成病原微生物由外入侵的通道；（2）重復(fù)使用的置入器在操作過程中難免會造成栓體污染,引起感染發(fā)生；（3）初次改進是在埋栓時使用抗生素和合適的栓尾埋置深度可以有效降低感染率和栓體丟失率,但由于剪短栓尾后撤栓操作比較費勁；（4）自制陰道栓置入器可以將栓體埋入陰道深部防止丟栓,同時CIDR 栓尾結(jié)構(gòu)完整,撤栓操作省時省力,有效控制了感染,工作效率也得到顯著提高,值得在梅花鹿和羊的同期發(fā)情技術(shù)應(yīng)用實踐中進行推廣。

5 討論

科學(xué)技術(shù)實踐推廣的關(guān)鍵在于各生產(chǎn)環(huán)節(jié)的細節(jié)把控。但埋栓作為同期發(fā)情工作中最為關(guān)鍵的一步,正確的栓處理、正確的裝栓位置和無菌操作是發(fā)情率和受胎率的基本保證。

筆者通過多年的實踐總結(jié),跳出了原有的思維定式,摒棄傳統(tǒng)的操作模式,嚴把無菌操作,創(chuàng)新出一套批量埋置黃體酮陰道栓的操作規(guī)范。

（1）自制大量的陰道栓置入器并清洗消毒。無菌操作將CIDR 栓尾與栓體對折并行安裝進置入器,海綿栓則需將尾線對折系為環(huán)狀并調(diào)整為適宜長度,然后將栓尾和栓體先后塞入置入器內(nèi)。安裝好栓體的置入器裝入無菌袋內(nèi)備用。

（2）埋栓時術(shù)者待助手用消毒液將母畜的外陰清洗干凈后,左手兩指將陰唇撥開,右手將置入器插入陰道深部,注意先向上傾斜45°插入,稍有阻力時再平行插入避免擦傷尿道口。然后左手捏住置入器尾,右手持一次性筷子將栓體推出置入器,同時緩慢拔出置入器。用完的置入器清洗消毒保存以備下次使用。

（3）埋置12d 后撤栓,用雙抗生理鹽水沖洗陰道,注射孕馬血清。

無菌操作是獸醫(yī)工作者的基本操作規(guī)范,在實踐生產(chǎn)中往往因環(huán)境和條件的限制或主觀態(tài)度輕視而荒廢。成敗往往取決于各環(huán)節(jié)的細節(jié)把控,在生產(chǎn)實踐的每個環(huán)節(jié),都應(yīng)創(chuàng)造條件、排除干擾,堅持科學(xué)規(guī)范的操作程序,保證無菌操作。

激素的使用作為同期發(fā)情技術(shù)的另一重要環(huán)節(jié),尤其是激素注射操作同樣要注重?zé)o菌操作,建議使用1ml 一次性注射器。杜絕注射器針頭重復(fù)使用,注射部位嚴格消毒,這樣規(guī)范的操作也是保證高同期發(fā)情率的必要措施。