3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟存活、化蛹及羽化的影響

何 超，沈登榮，尹立紅，張 睿，袁盛勇，田學(xué)軍

(1.紅河學(xué)院 生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院/云南省農(nóng)作物高效栽培與安全控制重點實驗室，云南 蒙自 661100;2.西南林業(yè)大學(xué) 林學(xué)院，云南 昆明 650216)

井上蛀果斑螟(AssarainoueiYamanaka)是云南石榴樹上的一種蛀果害蟲，幼蟲蛀食石榴果實，造成裂果、腐爛乃至脫落[1]。該蟲自2002年被發(fā)現(xiàn)以來，已給石榴生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟損失，成為云南石榴生產(chǎn)中主要鱗翅目害蟲之一[2]。井上蛀果斑螟成蟲將卵散產(chǎn)于石榴果實表面等粗糙部位，幼蟲期除初孵幼蟲和老熟幼蟲可短暫在果面活動外，其余時間都在果內(nèi)鉆蛀取食危害，周年發(fā)生，世代多[3-4]。近年來，由于果園化學(xué)殺蟲劑長期頻繁和不合理使用，使該蟲已對多種有機磷類、氨基甲酸酯類及擬除蟲菊酯類等化學(xué)殺蟲劑產(chǎn)生了抗藥性，防治難度加大。但為迅速抑制井上蛀果斑螟田間種群發(fā)生數(shù)量，目前化學(xué)殺蟲劑仍是最有效的方法。為保證石榴園井上蛀果斑螟的防效及果品安全生產(chǎn)，減輕環(huán)境污染，需要篩選出高效低毒、對環(huán)境友好的防治藥劑，并將作用機制不同的殺蟲劑品種輪換使用。

氯蟲苯甲酰胺是二酰胺類殺蟲劑，通過與昆蟲肌肉細胞的魚尼丁受體結(jié)合，使昆蟲鈣離子從鈣庫中無限制地釋放到細胞質(zhì)中[5-6]；蟲螨腈是芳基吡咯類殺蟲殺螨劑，作用于昆蟲細胞的線粒體，抑制ADP轉(zhuǎn)化為ATP[7-8]；啶蟲脒是氯化新煙堿類的殺蟲劑，作用于昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)突觸部位的煙堿乙酰膽堿受體，干擾昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)的刺激傳導(dǎo)[9-10]，這3種高效低毒殺蟲劑已廣泛應(yīng)用于果樹和蔬菜上多種鱗翅目害蟲防治的研究，如應(yīng)用氯蟲苯甲酰胺防治梨小食心蟲和桃小食心蟲[11]、蟲螨腈防治小菜蛾[12]、啶蟲脒防治柑橘潛葉蛾[13-14]、氯蟲苯甲酰胺和啶蟲脒防治草地貪夜蛾[15]等，均取得很好的防控效果。這3種藥劑殺蟲活性高，作用機制獨特，特別是對鱗翅目害蟲的防治效果是其他殺蟲劑的數(shù)倍，持效期長，與常規(guī)農(nóng)藥無交互抗性、安全性高。但由于不同昆蟲種類對藥劑的敏感性差異較大，加之田間環(huán)境等其他因素的影響，藥劑防治效果存在較大差異。

當(dāng)前，井上蛀果斑螟的研究主要集中在生物生態(tài)學(xué)方面[16-18]，而防治技術(shù)的研究，特別是化學(xué)防治藥劑篩選的研究報道很少，關(guān)于氯蟲苯甲酰胺、啶蟲脒和蟲螨腈對該蟲的防控效果還不明確。為了更好地控制井上蛀果斑螟的危害，分別用氯蟲苯甲酰胺、蟲螨腈和啶蟲脒處理井上蛀果斑螟的卵、初孵幼蟲和老熟幼蟲，系統(tǒng)觀察3種殺蟲劑不同濃度處理對該蟲不同蟲態(tài)生存、化蛹及羽化的影響，綜合評價3種殺蟲劑的防控效果，以期為田間合理使用化學(xué)殺蟲劑及井上蛀果斑螟的綜合治理提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

供試蟲源：2018年9月于云南省蒙自市草壩鎮(zhèn)石榴園采集井上蛀果斑螟幼蟲，帶回實驗室用酸石榴皮飼養(yǎng)至化蛹。蛹羽化為成蟲后，按雌雄比1∶1配對，共5對放入產(chǎn)卵瓶，瓶內(nèi)放蘸10%蔗糖水的脫脂棉球供成蟲補充營養(yǎng)，同時放1片硫酸紙供其產(chǎn)卵，卵孵化后放入裝有新鮮酸石榴皮的培養(yǎng)皿內(nèi)，根據(jù)幼蟲取食情況及時添加石榴皮，清理排泄物，直至幼蟲老熟。取初產(chǎn)卵(產(chǎn)卵24 h內(nèi))、初孵幼蟲(孵化12 h內(nèi))和老熟幼蟲(化蛹結(jié)繭前48 h)作為供試蟲源用于試驗。各蟲態(tài)飼養(yǎng)條件均為溫度(25±1)℃，相對濕度RH(70±10)%，光照15 L∶9 D。

供試藥劑：5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑(上海杜邦農(nóng)化有限公司)、10%蟲螨腈懸浮劑[巴斯夫(中國)有限公司]、20%啶蟲脒可濕性粉劑(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)。

1.2 試驗方法

1.2.1 藥劑配制 試驗時各藥劑濃度均參考生產(chǎn)推薦濃度設(shè)置，以水為溶劑進行稀釋。5%氯蟲苯甲酰胺懸浮劑1 000、1 500、2 000倍液，10%蟲螨腈懸浮劑1 500、2 000、2 500倍液，20%啶蟲脒可濕性粉劑8 000、10 000、12 000倍液共9個處理。以清水為對照(CK)。

1.2.2 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟卵的處理 浸漬法處理：將井上蛀果斑螟初產(chǎn)卵100粒分別于各處理藥液中浸漬30 s，取出后于室內(nèi)通風(fēng)處晾干，置于玻璃培養(yǎng)皿中，2皿1組為1個重復(fù)，放蘸無菌水的棉球保濕。待卵變?yōu)榉奂t色后，每12 h 檢查記錄1次卵孵化情況，直至無孵化幼蟲為止。將孵化幼蟲移至新鮮的酸石榴皮上飼養(yǎng)，直到幼蟲化蛹、羽化。統(tǒng)計孵化幼蟲數(shù)、化蛹率和成蟲羽化率，并用電子天平稱量蛹質(zhì)量。每處理重復(fù)3次。

1.2.3 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟初孵幼蟲的處理 飼喂法處理：取新鮮無污染的酸石榴皮(4 cm×4 cm)于各藥劑處理藥液中浸漬20 s后取出，晾干后放入底部鋪1層濾紙的玻璃培養(yǎng)皿(直徑9 cm)中。每皿接未取食的井上蛀果斑螟初孵幼蟲25頭，10皿1組為1個重復(fù)，以清水為對照(CK)。24 h后觀察各藥劑處理后存活幼蟲的發(fā)育情況，將存活幼蟲移至新鮮的未經(jīng)藥劑處理的正常酸石榴皮上繼續(xù)飼養(yǎng)，以后每12 h 檢查記錄1次幼蟲的存活情況，連續(xù)觀察48 h。以后逐日觀察記錄各藥劑處理幼蟲的死亡數(shù)、發(fā)育進度，直至化蛹、羽化，統(tǒng)計化蛹率和成蟲羽化率，并稱蛹質(zhì)量。每處理重復(fù)3次。

1.2.4 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟老熟幼蟲的處理 浸漬法處理：挑取大小一致、活潑的井上蛀果斑螟老熟幼蟲，在各藥劑處理藥液中浸漬5 s后取出，讓其在吸水紙上爬行至藥物晾干后，放入玻璃培養(yǎng)皿中。每皿10頭，10皿1組為1個重復(fù)，用新鮮的正常酸石榴皮飼養(yǎng)。每12 h 檢查記錄1次幼蟲的存活情況，連續(xù)觀察72 h。以后逐日觀察并記錄各藥劑處理后老熟幼蟲存活情況。開始化蛹后，逐日檢查記錄化蛹率和成蟲羽化率，并稱蛹質(zhì)量。每處理重復(fù)3次。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 13.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，利用SPSS 19.0數(shù)據(jù)處理軟件的Duncan’s法進行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟卵孵化及化蛹、羽化的影響

3種殺蟲劑處理井上蛀果斑螟卵后，對卵的孵化率及幼蟲的化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲羽化率的影響結(jié)果如表1所示。隨著3種殺蟲劑處理濃度的增加，卵孵化率較對照均呈不同程度的下降；5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液和1 500倍液、10%蟲螨腈1 500倍液處理卵孵化率與對照差異顯著，其余各濃度處理和對照均無顯著差異；20%啶蟲脒各濃度處理卵孵化率和對照差異顯著，其中20%啶蟲脒8 000倍液處理卵孵化率較對照下降了48.54%，顯著低于其余2種藥劑各濃度處理。對幼蟲的化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲羽化率的觀察結(jié)果表明，3種殺蟲劑高濃度處理的化蛹率和羽化率均有所下降。5%氯蟲苯甲酰胺各濃度處理的化蛹率與對照差異顯著，分別較對照減少了39.84%、33.37%、16.80%；10%蟲螨腈和20%啶蟲脒各濃度處理的化蛹率與對照組均無顯著差異。蛹質(zhì)量除20%啶蟲脒8 000倍液處理顯著小于對照外，其余藥劑濃度處理均與對照無顯著差異。5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液和1 500倍液處理及10%蟲螨腈1 500倍液處理的羽化率與對照差異顯著，較對照分別下降了20.67%、11.51%、11.66%，其余藥劑濃度處理均與對照無顯著差異。

表1 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟卵的孵化及化蛹、羽化的影響

2.2 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟初孵幼蟲生存的影響

從表2可以看出，3種殺蟲劑不同濃度處理井上蛀果斑螟初孵幼蟲的速效性和殺滅作用差異顯著。5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理24、48、72 h后初孵幼蟲的死亡率分別為57.42%、70.57%、77.82%，蛹前累計死亡率為88.51%，均顯著高于其余2種藥劑各濃度處理和對照；5%氯蟲苯甲酰胺1 500倍液處理后各時間點的死亡率及蛹前累計死亡率，也均顯著高于除10%蟲螨腈1 500倍液處理外的其余2種藥劑各濃度處理和對照。10%蟲螨腈1 500倍液處理48 h后的死亡率為46.32%，72 h后的死亡率為57.06%，蛹前累計死亡率為73.23%，顯著高于20%啶蟲脒各濃度處理和對照，但顯著低于5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液和1 500倍液處理。20%啶蟲脒各濃度處理24、72 h后的死亡率均分別小于5%、16%，蛹前累計死亡率亦顯著小于5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈各濃度處理。

表2 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟初孵幼蟲生存的影響Tab.2 Effects of three insecticides on survival of newly hatched larvae of Assara inouei

2.3 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟初孵幼蟲化蛹及羽化的影響

由表3可以看出，整體上3種殺蟲劑各濃度處理的化蛹率、蛹質(zhì)量和羽化率較對照均呈不同程度的下降。除10%蟲螨腈2 500倍液外，5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈各濃度處理的化蛹率顯著小于20%啶蟲脒各濃度處理和對照，其中，5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理的化蛹率為32.34%，較對照減少了63.54%；10%蟲螨腈1 500倍液處理的化蛹率為36.34%，較對照減少了59.03%；20%啶蟲脒各濃度處理的化蛹率與對照無顯著差異。5%氯蟲苯甲酰胺各濃度處理間的蛹質(zhì)量無顯著差異，但均顯著小于10%蟲螨腈、20%啶蟲脒各濃度處理和對照。5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈各藥劑3種濃度處理間的羽化率無顯著差異，但均低于20%啶蟲脒各濃度處理和對照，且5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液和1 500倍液處理的羽化率顯著低于10%蟲螨腈各濃度處理，其中5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理組的羽化率為56.23%，較對照減少42.07%；20%啶蟲脒各濃度處理與對照均無顯著差異。

表3 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟初孵幼蟲化蛹及羽化的影響Tab.3 Effects of three insecticides on pupation and emergence of newly hatched larvae of Assara inouei

2.4 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟老熟幼蟲生存的影響

從表4可以看出，3種藥劑不同濃度處理井上蛀果斑螟老熟幼蟲后其死亡率差異顯著。5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理老熟幼蟲后24 h的死亡率為58.65%，藥后72 h的死亡率為67.05%，蛹前累計死亡率為69.14%，顯著高于20%啶蟲脒各濃度處理和對照，但顯著低于10%蟲螨腈1 500倍液處理；5%氯蟲苯甲酰胺2 000倍液處理后24 h的死亡率僅為8.76%，但與對照差異顯著。10%蟲螨腈1 500倍液處理后24、48、72 h的死亡率分別為76.21%、78.49%、81.06%；蛹前累計死亡率為81.34%，顯著高于其余2種藥劑各濃度處理和對照。20%啶蟲脒 3種濃度處理后72 h的死亡率均小于11%，蛹前累計死亡率均小于12%，其10 000倍液和12 000倍液各時間點及蛹前累計死亡率均與對照無顯著差異。

2.5 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟老熟幼蟲化蛹及羽化的影響

由表5可以看出，整體上3種殺蟲劑各濃度處理的化蛹率、蛹質(zhì)量和羽化率均較對照低。5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈各濃度處理的化蛹率均顯著小于20%啶蟲脒各濃度處理和對照，其中，5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理的化蛹率為45.75%，顯著小于其余2種濃度處理，較對照減少50.60%；10%蟲螨腈1 500倍液處理的化蛹率為50.15%，較對照減少45.85%；20%啶蟲脒各濃度處理的化蛹率與對照無顯著差異。5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理的蛹質(zhì)量顯著小于其余2種藥劑各濃度處理和對照，除10%蟲螨腈1 500倍液處理外，10%蟲螨腈和20%啶蟲脒各濃度處理的蛹質(zhì)量均與對照無顯著差異。5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理的羽化率為43.78%，較對照減少53.30%，顯著低于其余2種藥劑各濃度處理(10%蟲螨腈1 500倍液除外)和對照；10%蟲螨腈1 500倍液處理的羽化率為50.65%，較對照減少45.97%，顯著低于20%啶蟲脒各濃度處理和對照；20%啶蟲脒各濃度處理與對照無顯著差異。

表5 3種殺蟲劑對井上蛀果斑螟老熟幼蟲化蛹及羽化的影響Tab.5 Effects of three insecticides on pupation and emergence of mature larvae of Assara inouei

3 結(jié)論與討論

本研究結(jié)果表明，5%氯蟲苯甲酰胺、10%蟲螨腈和20%啶蟲脒3種殺蟲劑處理井上蛀果斑螟的卵后，20%啶蟲脒對卵孵化的抑制效果較好，特別是其8 000倍液處理后，卵的孵化率較對照下降48.54%；但對其幼蟲的化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲羽化率的影響并不顯著，表明20%啶蟲脒有一定的殺卵活性，但持效期短，對后續(xù)蟲態(tài)的發(fā)育無明顯的抑制作用。而5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈對井上蛀果斑螟的殺卵效果不明顯，這與于欣等[19]對桃小食心蟲和武海斌等[20]對小地老虎的研究結(jié)果一致，表明這2種殺蟲劑的殺卵活性低，究其原因，可能是氯蟲苯甲酰胺和蟲螨腈均以胃毒和觸殺作用為主，對害蟲卵的滲透性較弱，而殺蟲劑殺卵活性與其對卵的滲透能力和在卵殼上的附著量有關(guān)[21]。因此，在田間生產(chǎn)實踐中氯蟲苯甲酰胺和蟲螨腈不能用于井上蛀果斑螟卵期防治。

用飼喂法處理井上蛀果斑螟初孵幼蟲后，5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈對初孵幼蟲的毒殺作用較好，且毒力隨濃度的增加而增強。其中，5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理初孵幼蟲24 h后的死亡率為57.42%， 48 h后的死亡率即達70.57%，表明5%氯蟲苯甲酰胺對初孵幼蟲殺蟲活性高且速效性好；此外，存活幼蟲的化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲的羽化率均顯著低于其余2種藥劑各濃度處理，表明5%氯蟲苯甲酰對后續(xù)蟲態(tài)的生長發(fā)育也產(chǎn)生了明顯的抑制作用。李偉群等[22]研究認(rèn)為，氯蟲苯甲酰胺應(yīng)在稻縱卷葉螟卵孵化盛期至幼蟲3齡前使用防治效果最好。常國彬等[23]研究發(fā)現(xiàn)，氯蟲苯甲酰胺對美國白蛾低齡幼蟲的持效性更好。這些研究結(jié)論與本研究結(jié)果基本一致，表明5%氯蟲苯甲酰胺對低齡幼蟲的殺蟲活性和持效性更好。20%啶蟲脒處理初孵幼蟲后，其可正常取食，其中10 000和12 000倍液處理初孵幼蟲24、48、72 h后的死亡率和對照差異不顯著；各濃度處理后存活幼蟲的化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲的羽化率與對照亦無顯著差異，表明20%啶蟲脒對井上蛀果斑螟初孵幼蟲的殺蟲活性和持效期均較低，對后續(xù)蟲態(tài)的生長發(fā)育也不會產(chǎn)生明顯的抑制作用。已有研究表明，啶蟲脒屬于正溫度效應(yīng)類型殺蟲劑，殺蟲活性受溫度影響大，殺蟲活性充分發(fā)揮需要在32 ℃以上的高溫季節(jié)使用[24-25]；而本研究是在25 ℃恒溫下進行的，溫度偏低可能是影響啶蟲脒殺蟲活性發(fā)揮的重要原因之一。

用浸漬法處理井上蛀果斑螟老熟幼蟲后，10%蟲螨腈和5%氯蟲苯甲酰胺對老熟幼蟲的觸殺效果較好，且觸殺能力隨濃度的增加而增強。10%蟲螨腈1 500倍液處理老熟幼蟲后24 h的死亡率為76.21%，藥后72 h的死亡率為81.06%，顯著高于其余2種藥劑各濃度處理，表明10%蟲螨腈對老熟幼蟲的觸殺效果突出；10%蟲螨腈1 500倍液處理的幼蟲化蛹率、蛹質(zhì)量和成蟲羽化率顯著低于20%啶蟲脒各濃度處理，但高于5%氯蟲苯甲酰胺1 000倍液處理，表明10%蟲螨腈對后續(xù)蟲態(tài)的抑制作用小于5%氯蟲苯甲酰胺，但高于20%啶蟲脒。

從本研究結(jié)果來看，5%氯蟲苯甲酰胺對初孵幼蟲具有高的殺蟲活性，且對其后續(xù)蟲態(tài)化蛹和羽化有較好的抑制作用；10%蟲螨腈對老熟幼蟲具有較高的殺蟲活性；20%啶蟲脒的殺卵效果優(yōu)于5%氯蟲苯甲酰胺和10%蟲螨腈，但對幼蟲活性低。因此，田間防治時，建議將3種藥劑交替或混配使用來提高防治效果，延緩井上蛀果斑螟抗藥性的產(chǎn)生。