廣西地區(qū)反復(fù)呼吸道感染兒童維生素A、E水平及其與免疫功能的相關(guān)性分析

楊曉祥 覃敏 龐夏玲 陳潔琳 馮燕華 譚杰 莫榮浩 黃麗蓮 李英喬 江蕙蕓

反復(fù)呼吸道感染（recurrent respiratory infection，RRI）是一種常見(jiàn)的兒童呼吸系統(tǒng)疾病，占我國(guó)呼吸道感染患兒的30%，近年來(lái)其發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[1]。RRI發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，加上兒童對(duì)呼吸道病原微生物的抵抗力較差，易導(dǎo)致治療后復(fù)發(fā)或發(fā)生腎炎、膿毒血癥、心肌炎等疾病，嚴(yán)重危害兒童的身心健康，給社會(huì)和家庭帶來(lái)經(jīng)濟(jì)和心理負(fù)擔(dān)[2]。除致病微生物感染外，RRI與維生素A、E等脂溶性維生素缺乏也密切相關(guān)。維生素A、E缺乏會(huì)影響機(jī)體免疫力，而免疫力降低會(huì)增加疾病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[3-4]。WHO報(bào)告全世界至少有2.5億名兒童面臨這種風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重的維生素A缺乏癥仍然是許多發(fā)展中國(guó)家的主要公共衛(wèi)生問(wèn)題之一[5]。本研究檢測(cè)了廣西地區(qū)RRI患兒維生素A、E水平及免疫功能指標(biāo)，并與健康體檢兒童進(jìn)行對(duì)照，以探討RRI患兒維生素A、E水平變化及其與免疫功能的相關(guān)性，為RRI的臨床治療和預(yù)防提供依據(jù)。

1 對(duì)象和方法

1.1 對(duì)象 選取2017年1月至2019年12月就診于廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院并診斷為RRI的268例患兒為觀察組，男 192例，女 76例；年齡（3.11±1.97）歲。選擇本院同期體檢的134例健康兒童為對(duì)照組，男101例，女 33 例；年齡（3.20±1.87）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡在6 個(gè)月～14 歲；（2）符合 RRI診斷標(biāo)準(zhǔn)；（3）身高、體重發(fā)育在同年齡同性別兒童正常值范圍內(nèi)。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并其他先天性臟器發(fā)育畸形；（2）合并免疫缺陷；（3）早產(chǎn)兒；（4）中重度營(yíng)養(yǎng)不良、重度貧血；（5）合并腫瘤、結(jié)核；（6）有重大手術(shù)史。兩組兒童性別、年齡比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查通過(guò)，所有兒童的家屬簽署知情同意書。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè) （1）維生素A、E水平檢測(cè)：采集外周靜脈血2 ml于真空干燥管，室溫避光保存，1 h后3 500 r/min離心10 min分離血清，將血清轉(zhuǎn)移至1.5 ml EP管，4℃避光保存送檢。使用高效液相色譜儀（Agilent 1260型，美國(guó)安捷倫公司）、采用高效液相色譜法檢測(cè)血清維生素A、E水平。（2）IgG、IgA和IgM水平檢測(cè)：采集外周靜脈血3 ml于真空干燥管，3 000 r/min離心10 min分離血清，應(yīng)用免疫比濁法檢測(cè)血清IgG、IgA和IgM水平，儀器為美國(guó)羅氏公司COBAS 8000全自動(dòng)生化分析儀，試劑為北京利德曼生化股份有限公司，IgG、IgA和IgM檢測(cè)試劑批號(hào)為17073003、17073011、17073007。（3）T淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞檢測(cè)：采集外周靜脈血2 ml于EDTA抗凝管，輕輕混勻數(shù)次，采用貝克曼公司FC500流式細(xì)胞分析儀進(jìn)行T淋巴細(xì)胞亞群、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞檢測(cè)，試劑為儀器配套試劑，CD3+、CD4+、CD8+檢測(cè)試劑批號(hào)為lot7580183F、CD19+、NK 檢測(cè)試劑批號(hào)為 lot7536238，檢測(cè)結(jié)果以百分比報(bào)告。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) （1）RRI的診斷參考文獻(xiàn)[6]：1年內(nèi)發(fā)生上、下呼吸道感染的次數(shù)頻繁，超出正常范圍。0～2歲反復(fù)上呼吸道感染≥7次/年，或反復(fù)氣管支氣管炎≥3次/年，或反復(fù)肺炎≥2次/年；3～5歲反復(fù)上呼吸道感染≥6次/年，或反復(fù)氣管支氣管炎≥2次/年，或反復(fù)肺炎≥2次/年；6～14歲反復(fù)上呼吸道感染≥5次/年，或反復(fù)氣管支氣管炎≥2次/年，或反復(fù)肺炎≥2次/年。（2）維生素營(yíng)養(yǎng)狀況分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參考文獻(xiàn)[7]：①維生素A分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：0.3～0.5 mg/L為正常，0.2～＜0.3 mg/L為可疑亞臨床缺乏，＜0.2 mg/L為亞臨床缺乏，＜0.1 mg/L同時(shí)伴有干眼病為臨床缺乏；②維生素E分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：＜5 mg/L為缺乏，5～7 mg/L 為不足，＞7～20 mg/L 為正常，＞20 mg/L 為過(guò)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件。呈正態(tài)分布的計(jì)量資料用表示，兩組比較采用兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；等級(jí)資料組間比較采用秩和檢驗(yàn)。RRI患兒維生素A、E水平與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組兒童血清維生素A、E水平比較 觀察組維生素 A、E 水平分別（0.32±0.09）、（8.27±2.76）mg/L，低于對(duì)照組的（0.35±0.08）、（9.08±2.52）mg/L，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.639、2.843，均 P＜0.05）。兩組患者維生素A、E營(yíng)養(yǎng)狀況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩組兒童免疫功能指標(biāo)比較 在細(xì)胞免疫指標(biāo)方面，觀察組 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+均低于對(duì)照組，CD8+高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；而NK細(xì)胞比例差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。在體液免疫指標(biāo)方面，觀察組IgG、IgA水平低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；而IgM水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見(jiàn)表 2。

2.3 RRI患兒維生素A、E正常與缺乏者免疫功能指標(biāo)比較 RRI患兒維生素A正常145例，缺乏123例；維生素E正常83例，缺乏16例。維生素A正常患兒CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和 IgG、IgA 水平均明顯高于維生素A缺乏者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；而CD8+、CD19+、NK細(xì)胞比例和IgM水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。維生素E正常與缺乏患兒各項(xiàng)免疫功能指標(biāo)比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），見(jiàn)表 3。

2.4 RRI患兒維生素A、E與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性RRI患兒維生素 A、E 水平與 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IgG、IgA 水平均呈正相關(guān)（均 P＜0.05），與 CD8+、CD19+、NK細(xì)胞比例和IgM水平均未見(jiàn)相關(guān)性（均P＞0.05），見(jiàn)表4。

3 討論

RRI的發(fā)病與多種因素有關(guān)，目前普遍認(rèn)為呼吸道解剖結(jié)構(gòu)異常，維生素A、E缺乏以及免疫功能下降是主要因素[3-4]。維生素A、E是人體必需的脂溶性維生素，不僅能促進(jìn)機(jī)體合成Ig，加快新陳代謝；也能保護(hù)皮膚，避免黏膜受到致病微生物的侵害[8]。維生素A、E對(duì)維持機(jī)體生理功能和生長(zhǎng)發(fā)育等具有重要作用，維生素A、E充足能維持機(jī)體細(xì)胞和體液免疫功能處于正常狀態(tài)，增強(qiáng)機(jī)體抗感染的能力，有效預(yù)防RRI的發(fā)生[9-10]。

目前全球范圍內(nèi)，維生素A都存在不同程度的缺乏。在流行地區(qū)，缺乏維生素A的兒童存在患嚴(yán)重呼吸道感染疾病的風(fēng)險(xiǎn)，且頻繁患病[11]。維生素A水平降低或缺乏易引起呼吸道黏膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)受限以及IgA分泌減少，從而影響?zhàn)つさ耐暾院兔庖吖δ?，減弱呼吸道黏膜抗感染、抗病毒的能力，導(dǎo)致局部氣道免疫功能紊亂，因此易發(fā)生呼吸道感染[12]。本研究結(jié)果顯示，RRI患兒血清維生素A水平及正常率均低于健康兒童，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致[13-15]，這表明機(jī)體維生素A水平降低與RRI有關(guān)。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)RRI患兒細(xì)胞免疫指標(biāo) CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD19+和體液免疫指標(biāo) IgG、IgA水平明顯低于健康兒童，且維生素A水平與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IgG、IgA水平呈正相關(guān)。分析原因，可能是維生素A中的視黃醛決定了T細(xì)胞分化為輔助T細(xì)胞或調(diào)解T細(xì)胞，維生素A水平降低或缺乏會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞亞群發(fā)生變化；同時(shí)視黃醛也影響B(tài)淋巴細(xì)胞的發(fā)育和增殖，導(dǎo)致體液免疫功能降低或紊亂[16]。因此，維生素A不僅影響患兒細(xì)胞免疫，還會(huì)影響體液免疫。

表1 兩組兒童維生素A、E營(yíng)養(yǎng)狀況比較[例（%）]

表2 兩組兒童免疫功能指標(biāo)比較

表3 RRI患兒維生素A、E正常與缺乏者免疫功能指標(biāo)比較

表4 RRI患兒維生素A、E與免疫功能指標(biāo)的相關(guān)性

維生素E具有抗氧化作用，能抑制免疫損傷，維持機(jī)體免疫功能正常；而維生素E缺乏會(huì)增加機(jī)體免疫細(xì)胞氧化性，降低C3活性，引起細(xì)胞及體液免疫功能下降，從而導(dǎo)致機(jī)體抵抗力下降，對(duì)病原微生物的易感性增加[17]。Zhang等[18]研究表明，RRI患兒維生素E水平低于健康兒童。本研究發(fā)現(xiàn)RRI患兒與健康兒童維生素E水平均處于正常范圍，但RRI患兒維生素E水平低于健康兒童，而維生素E不足、缺乏和過(guò)量的比例均高于健康兒童，與國(guó)內(nèi)外報(bào)道相似[18]。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，RRI患兒維生素E正常與缺乏者各項(xiàng)免疫功能指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這可能與維生素缺乏患兒例數(shù)較少，或同時(shí)具有維生素A缺乏有關(guān)，具體原因仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。此外，本研究發(fā)現(xiàn)維生素E水平與CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和 IgG、IgA 水平呈正相關(guān)，與 CD8+、CD19+、NK細(xì)胞比例和IgM水平均未見(jiàn)相關(guān)性，與李政等[15]報(bào)道的四川地區(qū)7個(gè)月～12歲RRI患兒研究結(jié)果相近；但與董崇娟等[13]報(bào)道山東地區(qū)6歲以下RRI患兒的研究結(jié)果不同，該研究表明維生素E水平與IgM水平具有一定的相關(guān)性，與CD4+、CD8+和IgA、IgG水平均無(wú)關(guān)，這可能與地區(qū)、研究對(duì)象年齡不同等有關(guān)。Moeini等[19]研究結(jié)果顯示，適當(dāng)補(bǔ)充維生素E可提高機(jī)體免疫功能。因此，有必要了解RRI患兒體內(nèi)維生素E水平，治療時(shí)根據(jù)情況適當(dāng)補(bǔ)充維生素E。

綜上所述，廣西地區(qū)RRI患兒血清維生素A、E水平及免疫功能指標(biāo)均降低，兩者具有相關(guān)性。因此，在RRI兒童治療過(guò)程中有必要了解維生素A、E水平及免疫功能指標(biāo)，有針對(duì)性地補(bǔ)充維生素，指導(dǎo)兒童合理膳食，增強(qiáng)其機(jī)體免疫功能，避免RRI發(fā)生。