慢性阻塞性肺疾病患者巨噬細(xì)胞刺激蛋白與炎癥因子水平及肺功能的關(guān)系研究

李紅英,劉華之

1.江西省于都縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西贛州 342300；2.贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院院感科，江西贛州 341000

慢性阻塞性肺疾病(COPD)臨床特征為慢性持續(xù)不完全可逆的氣流受限，對(duì)患者的肺功能及身心健康造成嚴(yán)重影響[1-2]，是臨床上常見的呼吸道疾病。采取科學(xué)有效的方式及時(shí)診斷COPD患者，能夠在很大程度上改善其生活質(zhì)量。肺部的慢性炎癥影響COPD的發(fā)生，機(jī)體肺內(nèi)巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及淋巴細(xì)胞數(shù)量明顯增加，而其中主要的炎癥細(xì)胞為巨噬細(xì)胞[3-4]。在COPD發(fā)展過程中，肺泡巨噬細(xì)胞是炎性反應(yīng)的始動(dòng)細(xì)胞，能夠釋放多種細(xì)胞因子和彈性蛋白酶介導(dǎo)炎性反應(yīng)，從而對(duì)肺部造成損傷[5]。巨噬細(xì)胞刺激蛋白(MSP)對(duì)巨噬細(xì)胞各種功能產(chǎn)生影響，對(duì)于調(diào)節(jié)氣道炎癥具有重要作用[6-7]。同時(shí)，COPD患者不僅在肺部存在炎癥，也存在全身性炎性反應(yīng)，在COPD發(fā)病過程中，多種炎性細(xì)胞和炎癥因子參與其中[8]。因此，本研究對(duì)不同病情COPD患者血漿中MSP水平及其與炎癥因子水平、肺功能的相關(guān)性進(jìn)行分析，旨在為臨床治療COPD提供理論依據(jù)和新靶點(diǎn)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年3月至2019年2月江西省于都縣中醫(yī)院收治的100例COPD患者，其中急性加重期COPD患者(AECOPD)55例作為A組，緩解期COPD患者45例作為B組，所有COPD患者診斷標(biāo)準(zhǔn)參考中華醫(yī)學(xué)會(huì)2013年修訂的《慢性阻塞性肺疾病診治指南》中的相關(guān)規(guī)定[9]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)一般資料完善，且聽從醫(yī)生意見者；(2)AECOPD患者的痰量增加，加重喘息及呼吸急促，或伴隨發(fā)熱現(xiàn)象者；(3)患者或其家屬簽署知情同意書者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有肺炎、肺部腫瘤等其他呼吸道疾病者；(2)心、肝、腎等重大臟器發(fā)生病變者；(3)精神意識(shí)不正常者；(4)患糖尿病、自身免疫性疾病等全身性疾病者。另外選擇同期于本院體檢中心進(jìn)行體檢的健康志愿者50例作為對(duì)照組。3組受試者性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù)、吸煙史等各項(xiàng)基本資料之間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)，具有可比性。所有研究過程均符合江西省于都縣中醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的相關(guān)規(guī)定。

1.2方法

1.2.1MSP水平檢測(cè) 采集受試者空腹肘靜脈血4 mL，置于加肝素鈉抗凝的采血管中，以3 500 r/min的速度離心10 min，離心半徑為3 cm，分離出血漿，置于-20 ℃冰箱中備用待測(cè)。血漿中MSP水平檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，試劑盒由武漢博士德生物工程有限公司提供，嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行操作。

1.2.2檢測(cè)肺功能相關(guān)指標(biāo) 應(yīng)用德國Jaeger公司生產(chǎn)的H21014125肺功能儀測(cè)定受試者的肺功能，詳細(xì)記錄用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼氣容積(FEV1)、FEV1/FVC、FEV1占預(yù)計(jì)值百分比(FEV1%)。

1.2.3炎癥因子水平檢測(cè) 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)受試者血漿中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細(xì)胞介素(IL)-6、IL-8及C-反應(yīng)蛋白(CRP)水平，試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供，嚴(yán)格按照試劑盒上的說明進(jìn)行操作。

1.3觀察指標(biāo) 比較3組受試者血漿中MSP水平、肺功能相關(guān)指標(biāo)及炎癥因子水平，并且分析MSP水平與肺功能相關(guān)指標(biāo)及炎癥因子水平之間的相關(guān)性。

2 結(jié) 果

2.13組受試者M(jìn)SP及炎癥因子水平比較 3組受試者血漿MSP水平及炎癥因子水平整體比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A組和B組血漿MSP、TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平明顯高于對(duì)照組，且A組高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組受試者M(jìn)SP及炎癥因子水平比較

2.23組受試者肺功能相關(guān)指標(biāo)比較 3組受試者肺功能相關(guān)指標(biāo)整體比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與對(duì)照組比較，A組和B組的FEV1、FVC、FEV1/FVC及FEV1%水平明顯較低，且A組低于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組受試者肺功能相關(guān)指標(biāo)比較

2.3COPD患者血漿MSP水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性 采用Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，A、B兩組患者血漿中MSP水平均與TNF-α、IL-6、IL-8及CRP水平呈正相關(guān)(r=0.392～0.736，P<0.05)，而與FEV1、FVC、FEV1/FVC及FEV1%呈負(fù)相關(guān)(r=-0.621～-0.349，P<0.05)。見表3。

表3 COPD患者血漿中MSP水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性

3 討 論

在我國超過40歲人群中，COPD的發(fā)病率接近10%。COPD可嚴(yán)重影響患者的生命健康，同時(shí)對(duì)患者家庭及社會(huì)造成沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。近年來，隨著環(huán)境污染程度的加劇，COPD的發(fā)病率逐年升高，COPD患者肺部功能逐漸退化，嚴(yán)重者出現(xiàn)心臟衰竭、呼吸衰竭，甚至死亡等，目前病死率位居全球第4[10-11]。COPD患者日常生活中會(huì)出現(xiàn)不同程度的咳嗽及咳痰，患者的生活質(zhì)量降低，因此對(duì)患者病情進(jìn)行準(zhǔn)確的評(píng)估對(duì)指導(dǎo)治療具有非常重要意義。臨床上多采用肺功能檢測(cè)用于評(píng)價(jià)COPD，但是單一的檢測(cè)項(xiàng)目并不能真正地反映患者的身心狀況[12]。氣道和肺組織對(duì)煙霧等有害氣體產(chǎn)生慢性炎性反應(yīng)可導(dǎo)致COPD的發(fā)生，氣道炎性反應(yīng)是COPD的發(fā)病機(jī)制之一[13]，炎癥細(xì)胞釋放出大量的細(xì)胞因子和炎癥介質(zhì)，共同構(gòu)成復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，導(dǎo)致氣道損傷，損壞肺泡組織的結(jié)構(gòu)性，從而下調(diào)肺功能[14]。MSP通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞分泌細(xì)胞因子水平，從而誘導(dǎo)和調(diào)節(jié)局部炎性反應(yīng)。MSP由肝臟合成，是一種免疫調(diào)節(jié)活性糖蛋白，其在體內(nèi)主要以無活性的單鏈糖蛋白前體形式存在。COPD患者體內(nèi)的MSP前體被血漿和細(xì)胞膜上的蛋白酶水解成具有生物活性的MSP[15]。炎癥介質(zhì)在COPD的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，而細(xì)胞因子作為一種相互作用小分子多肽類蛋白，能夠影響多種受體而參與炎性反應(yīng)[16-17]。

本研究結(jié)果顯示，COPD患者血漿MSP、TNF-α、IL-6、IL-8、CRP水平均高于對(duì)照組，而FEV1、FVC、FEV1/FVC及FEV1%水平明顯低于對(duì)照組，同時(shí)A組患者各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)較B組均更加嚴(yán)重，說明隨著病情發(fā)展，COPD患者的炎癥水平越來越高，肺功能越來越差。同時(shí)，Pearson相關(guān)性分析顯示，血漿中MSP水平與炎癥因子水平、肺功能密切相關(guān)，提示血漿中的MSP水平能夠在一定程度上反映COPD的病情。人支氣管上皮層纖毛表面和肺泡巨噬細(xì)胞表面均有絡(luò)氨酸激酶(RON)表達(dá)，且COPD患者中RON水平明顯升高。RON是MSP的特異性受體，在MSP的誘導(dǎo)下可刺激肺泡中的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生TNF-α、IL-8等細(xì)胞因子，損傷肺實(shí)質(zhì)和肺泡的功能性，同時(shí)激活誘導(dǎo)核因子-κB，從而影響細(xì)胞分化和遷移，導(dǎo)致細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的蛋白序列重新排列，刺激單核細(xì)胞遷移，加速炎性反應(yīng)的發(fā)展。TNF-α可誘導(dǎo)其他炎癥介質(zhì)的釋放，如IL-6和IL-8，級(jí)聯(lián)放大炎性反應(yīng)，同時(shí)TNF-α可刺激巨噬細(xì)胞和上皮細(xì)胞產(chǎn)生多種化學(xué)趨化因子，提高中性粒細(xì)胞的變形性，誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞遷移至炎癥部位，進(jìn)一步加劇炎性反應(yīng)。IL-8能夠誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞釋放蛋白水解酶，損傷肺部血管及肺泡上皮，提高其通透性，誘發(fā)炎性反應(yīng)，還可以上調(diào)組胺和白三烯的釋放量，引起氣道阻滯。另外，IL-8抑制IL-4和IL-10的活性，增加自然殺傷細(xì)胞核輔助T細(xì)胞的毒性，加重炎性反應(yīng)。IL-6加速中性粒細(xì)胞中的氧化反應(yīng)，延緩其凋亡，促使炎性反應(yīng)持續(xù)發(fā)生。CRP與相應(yīng)的配體結(jié)合形成的復(fù)合物能夠激活補(bǔ)體及單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，從而參與炎性反應(yīng)。由此可見，MSP與TNF-α、IL-6、IL-8、CRP等炎癥因子的水平均有著內(nèi)在聯(lián)系，隨著炎性反應(yīng)的加重，COPD患者肺功能損傷越嚴(yán)重[18]。由于COPD是一種慢性疾病，多數(shù)患者在入院時(shí)已接受過一段時(shí)間的治療，這可能會(huì)對(duì)研究結(jié)果造成一定的干擾，后續(xù)研究中可挑選治療時(shí)間和治療方案相近的患者，以減小對(duì)研究的影響。

綜上所述，COPD患者血漿中MSP水平與肺功能、炎癥因子水平密切相關(guān)，其對(duì)于COPD的診斷及治療均具有重要的臨床意義。臨床上結(jié)合檢測(cè)MSP水平有助于對(duì)COPD的發(fā)生、發(fā)展做出準(zhǔn)確預(yù)測(cè)。