老年不同級(jí)別宮頸病變患者陰道內(nèi)白細(xì)胞介素-4、-17水平及臨床意義

比麗克孜·艾克木 萬(wàn)莉

(新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院婦科,新疆 烏魯木齊 830000)

宮頸是女性內(nèi)生殖器的一部分，宮頸病變指宮頸區(qū)域發(fā)生的各種病理性改變，主要包括炎癥、損傷、腫瘤及癌前病變等，是女性最常見(jiàn)的疾患之一，宮頸最嚴(yán)重的疾病是宮頸癌〔1，2〕。宮頸癌是常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤之一，發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第二位，但宮頸癌是唯一可以防治的癌癥。宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)被人乳頭瘤病毒(HPV)感染是造成宮頸癌最主要的原因，HPV感染主要感染部位在子宮頸及黏膜，通過(guò)加強(qiáng)宮頸及陰道內(nèi)的局部細(xì)胞免疫反應(yīng)，以此來(lái)清除感染病毒是防治宮頸癌的有效措施〔3〕。有研究表明，在淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及樹(shù)突細(xì)胞中有著較為廣泛分布的細(xì)胞免疫因子等能夠有效啟動(dòng)和調(diào)節(jié)宮頸及陰道內(nèi)微環(huán)境的細(xì)胞免疫反應(yīng)，起到很好的抗腫瘤作用〔4，5〕。本研究探討老年不同級(jí)別宮頸病變患者陰道內(nèi)白細(xì)胞介素(IL)-4、IL-17水平的臨床意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 回顧性分析2016年2月至2018年2月新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院40例老年宮頸病變患者臨床資料，根據(jù)宮頸活檢病理分級(jí)分為A組(宮頸低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變，15例)、B組(宮頸高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變，15例)、C組(宮頸癌，10例)。3組年齡、收縮壓、舒張壓、體重等基本資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 3組一般資料比較

1.2入選標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理活檢確診為宮頸低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變、宮頸高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變、宮頸癌；②有性生活史；③有完整子宮。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近期接受宮頸病變藥物治療者；②合并非宮頸組織的其他惡性腫瘤者；③近期接受放療及化療者；④6個(gè)月前給予免疫調(diào)節(jié)劑或免疫抑制劑者；⑤7 d內(nèi)有陰道給藥者；⑥免疫功能缺陷者；⑦嚴(yán)重傳染性疾病者。

1.3方法 所有患者在膀胱截石位下進(jìn)行標(biāo)本的采集及貯存，利用一次性窺器打開(kāi)陰道，將宮頸充分暴露出來(lái)，利用一次性注射器抽取生理鹽水10 ml，對(duì)宮頸及陰道進(jìn)行多次沖洗，留存5 ml的灌洗液，在常溫下以5 000 r/min的速度離心5 min后，取上層清液2 ml放于2～8℃冰箱中保存，確保IL-4、IL-17活性，并在24 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。選擇ABclonal公司生產(chǎn)的人IL-12p70酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)Kit及人IL-4 ELISA試劑盒，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)檢測(cè)IL-4、IL-17濃度。使用宮頸刷將脫落的細(xì)胞收集并在4℃下保存，選取美國(guó)Digene公司生產(chǎn)的設(shè)備，利用雜交捕獲2代基因雜交信號(hào)放大系統(tǒng)檢測(cè)DNA及HPV分型。

1.4評(píng)價(jià)指標(biāo) ①3組陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平：比較3組不同級(jí)別宮頸病變患者IL-4、IL-17水平。②IL-4、IL-17指標(biāo)預(yù)測(cè)不同級(jí)別宮頸病變的價(jià)值分析：繪制受試者工作特征(ROC)曲線，結(jié)果顯示不同級(jí)別宮頸病變患者IL-4、IL-17曲線下面積(AUC)。③3組宮頸病變感染分布情況：統(tǒng)計(jì)并比較3組宮頸病變感染情況。④不同感染類型下IL-4、IL-17水平比較：比較不同感染類型下IL-4、IL-17水平。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件進(jìn)行單因素方差檢驗(yàn)、SNK-q檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)，繪制ROC曲線。

2 結(jié) 果

2.13組陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平比較 C組IL-4、IL-17水平明顯高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=10.446、7.051，P=0.000、0.000)；C組IL-4、IL-17水平明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=36.777、29.241，P=0.000、0.000)；B組IL-4、IL-17水平明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=29.439、24.809，P=0.000、0.000)。見(jiàn)表2。

表2 3組陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平比較

2.2IL-4、IL-17指標(biāo)預(yù)測(cè)不同級(jí)別宮頸病變的價(jià)值 將不同級(jí)別宮頸病變作為狀態(tài)變量，將IL-4、IL-17作為自變量，繪制ROC曲線，結(jié)果顯示IL-4指標(biāo)預(yù)測(cè)不同級(jí)別宮頸病變的AUC為0.935(95%CI：0.880～0.991)，>0.7，預(yù)測(cè)價(jià)值好。IL-4最佳截?cái)嘀等?8.000 pg/ml，可獲得理想的特異度與靈敏度，分別為0.314、0.975。IL-17指標(biāo)預(yù)測(cè)不同級(jí)別宮頸病變的AUC為0.874(95%CI：0.793～0.955)，>0.7，預(yù)測(cè)價(jià)值好。IL-17最佳截?cái)嘀等?4.788 pg/ml，可獲得理想的特異度與靈敏度，分別為0.455、0.933。見(jiàn)圖1，2。

圖1 IL-4預(yù)測(cè)不同級(jí)別宮頸病變的ROC曲線

2.33組宮頸病變感染分布情況 40例患者中HPV16型感染、HPV18型感染、其他型感染人數(shù)分別為16例、14例、10例。HPV16型HPV18型感染比例各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 三組宮頸病變感染分布情況〔n(%)〕

2.4不同HPV感染類型宮頸病變患者陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平比較 各型HPV感染、宮頸病變患者陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)。見(jiàn)表4。

表4 不同HPV感染類型宮頸病變患者陰道內(nèi)IL-4、IL-17水平比較

3 討 論

宮頸病變按照其病情發(fā)展的程度可分為低級(jí)別、高級(jí)別宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變及宮頸癌，宮頸病變的高危因素包括高危型HPV持續(xù)感染史、性傳播性疾病史、長(zhǎng)期使用免疫抑制劑類藥物或患有免疫抑制性疾病史等，最為主要的原因是HPV感染〔6，7〕。目前已知HPV共有160多個(gè)型別，40余種和生殖道感染有關(guān)，其中13～15種與宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變及宮頸癌發(fā)病密切相關(guān)。已在接近90%的宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變和99%的宮頸癌組織中發(fā)現(xiàn)有高危型的HPV感染，其中約有70%與HPV16和18型相關(guān)〔8〕。伴隨著宮頸病變的病情發(fā)展到宮頸癌階段，此時(shí)癌灶超出真骨盆或擴(kuò)散至鄰近器官如浸潤(rùn)膀胱或直腸黏膜，患者多有陰道出血和陰道分泌物增多，陰道出血可表現(xiàn)為性交后或婦科檢查后接觸性出血，不規(guī)則陰道流血或絕經(jīng)后出血〔9〕。晚期患者可出現(xiàn)盆腔疼痛、尿頻、尿急、血尿、肛門(mén)墜脹、便血、下肢水腫及下腹部明顯疼痛。終末期患者會(huì)出現(xiàn)發(fā)熱、貧血、消瘦等惡病質(zhì)臨床癥狀。宮頸癌在老年患者中較為常見(jiàn)，但是當(dāng)前宮頸癌逐漸呈現(xiàn)低齡化發(fā)展趨勢(shì)，嚴(yán)重?fù)p害女性患者的生理及心理健康〔10，11〕。宮頸及管黏膜有著較為廣泛的單層柱狀上皮組織分布，復(fù)層鱗狀上皮覆蓋在宮頸表面，其含有鈣黏附蛋白，該蛋白在保持細(xì)胞與細(xì)胞間黏附作用及細(xì)胞膜完整性方面起到良好作用，能夠針對(duì)病毒侵襲形成良好的防御屏障，較好地保護(hù)宮頸〔12，13〕。但若宮頸外口外移時(shí)，宮頸管內(nèi)單層柱狀上皮極易受損，HPV會(huì)在暴露的基底細(xì)胞層中潛伏，通過(guò)黏膜或皮膚損傷感染基底層細(xì)胞〔14〕。而外源染色體DNA在細(xì)胞核內(nèi)游離，然后會(huì)在宿主細(xì)胞內(nèi)整合并使其出現(xiàn)突變，最后發(fā)展為宮頸癌〔15〕。本研究3組均存在HPV感染，其中以HPV16型感染占比較高，故臨床需及時(shí)采取有效措施控制感染情況，避免病情惡化，

吞噬細(xì)胞第一時(shí)間獲取并且對(duì)抗原予以處理，使細(xì)胞內(nèi)部的抗原完全將決定簇暴露出來(lái)，然后被呈遞給T細(xì)胞，T細(xì)胞在受到抗原細(xì)胞的刺激后，會(huì)做出增殖分化反應(yīng)，生成及分泌大量的效應(yīng)T細(xì)胞，其中有小部分會(huì)變成記憶細(xì)胞，在同種抗原再次侵襲機(jī)體時(shí)，記憶細(xì)胞會(huì)生成較多的效應(yīng)T細(xì)胞，發(fā)揮著更為強(qiáng)大的特異性免疫反應(yīng)〔16〕。效應(yīng)T細(xì)胞與被抗原侵襲的宿主細(xì)胞緊密接觸，分泌并釋放出免疫活性物質(zhì)，使得宿主細(xì)胞的滲透壓出現(xiàn)改變，使其裂解死亡。在整個(gè)過(guò)程中，輔助性T細(xì)胞(Th細(xì)胞)為T(mén)細(xì)胞的一個(gè)亞群，參與并協(xié)助記憶細(xì)胞分化成效應(yīng)T細(xì)胞〔17〕。Th細(xì)胞能夠有效協(xié)助體液免疫和細(xì)胞免疫進(jìn)行免疫防御，根據(jù)合成的細(xì)胞因子的不同，又分為T(mén)h2細(xì)胞和Th17細(xì)胞。其中Th2細(xì)胞能合成IL-4，Th17細(xì)胞分泌IL-17，且IL-4能加速Th細(xì)胞往Th2細(xì)胞分化，阻礙合成Th1型細(xì)胞因子，抑制細(xì)胞免疫，繼而抑制抗腫瘤作用〔18〕；IL-17水平的升高會(huì)進(jìn)一步造成免疫功能的下降，使得HPV更容易侵襲機(jī)體。本研究結(jié)果表明，隨著宮頸惡性病變程度的不斷加重，IL-4、IL-17水平越高。