2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成工藝研究*

陳夢(mèng)雅，吳 詩(shī)

(湖北科技學(xué)院藥學(xué)院，湖北 咸寧 437100)

自身免疫疾病(autoimmune diseases)是一組復(fù)雜的慢性疾病，因?yàn)槎喾N遺傳、環(huán)境因素的復(fù)雜組合導(dǎo)致免疫系統(tǒng)對(duì)自身組織的識(shí)別能力或應(yīng)答調(diào)控能力下降，造成對(duì)自身組織的免疫攻擊。銀屑病(psoriasis)屬于其中較常見(jiàn)的一類(lèi)[1]。

JAKs(janus kinases)是一類(lèi)非受體型酪氨酸蛋白激酶家族，共包括4個(gè)成員：JAK1、JAK2、JAK3以及酪氨酸激酶2(TYK2)[2]。越來(lái)越多的研究表明[3]，JAK抑制劑能有效地治療多種自身免疫性疾病，因此，JAK小分子抑制劑的研發(fā)已然成為目前的研究熱點(diǎn)。

BMS-986165(圖1)是一種選擇性TYK2變構(gòu)抑制劑，化學(xué)名為6-(環(huán)丙烷甲酰胺基)-4-((2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯基)氨基)-N-甲基噠嗪-3-羧酰胺，由百時(shí)美施貴寶公司開(kāi)發(fā)，具有高效選擇性的和口服生物可利用性，目前處于臨床Ⅲ期研究。而2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺是BMS-986165的重要中間體，可用于合成酰胺取代的雜環(huán)化合物，因此，研究它的合成方法具有非常重要的意義。

圖1 BMS-986165化學(xué)結(jié)構(gòu)

百時(shí)美施貴寶公司的專(zhuān)利[3]報(bào)道了該中間體的合成方法(圖2)：以2-羥基-3-硝基苯甲酸甲酯為原料，經(jīng)兩步取代得到2-甲氧基-3-硝基苯甲酰胺，中間體3與水合肼環(huán)合得到3-(2-甲氧基-3-硝基苯基)-1H-1，2，4-三唑(4)，4經(jīng)取代得到3-(2-甲氧基-3-硝基苯基)-1-甲基-1H-1，2，4-三唑(5)，5還原得到2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺(6)。

圖2 2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成

在重復(fù)上述合成路線(xiàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)，中間體4的制備需分兩步進(jìn)行，較為復(fù)雜，且合成過(guò)程中反應(yīng)條件苛刻，不易操作；中間體5合成過(guò)程中得到兩個(gè)產(chǎn)物，需要進(jìn)行手性拆分，復(fù)雜且不易分離，此合成過(guò)程存在一定的缺陷，因此，本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上對(duì)2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成工藝進(jìn)行研究，合成實(shí)驗(yàn)如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

紫外分析儀(上海顧村電光儀器廠(chǎng)，暗箱式)、RY-1型顯微熔點(diǎn)儀(天津分析儀器廠(chǎng))溫度未經(jīng)校正、柱層析用硅膠(青島海洋化工廠(chǎng)，200-300目)、循環(huán)水式真空泵(河南省予華儀器有限公司)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(河南省予華儀器有限公司)、JNM-ECA-400 NMR型核磁共振儀(TMS為內(nèi)標(biāo))、Agilent 1100四級(jí)桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀。

所用試劑均為分析純?cè)噭鶕?jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)一步純化。

1.2 合成方法

根據(jù)專(zhuān)利[4]合成路線(xiàn)方法的不足，本文擬設(shè)計(jì)改進(jìn)的合成路線(xiàn)如圖3所示。

1.2.1 2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯的合成(2)[4]

將2-羥基-3-硝基苯甲酸甲酯5g(0.025mol)，碳酸鉀7g(0.050mol)，碘化鉀5.4g(0.050mol)和N，N-二甲基甲酰胺(30mL)依次加入到100mL單口瓶中，60℃反應(yīng)1h。冷卻至室溫后加入50mL水?dāng)嚢?，析出大量固體，抽濾，濾餅用水洗得白色固體5.2g，收率為98.7%，專(zhuān)利[4]收率98%，m.p.59～61℃，直接用于下一步。

1.2.2 2-甲氧基-3-硝基苯甲酰胺的合成(3)[4]

將2-甲氧基-3-硝基苯甲酸甲酯3g(0.014mol)，溶于氨的甲醇溶液(50mL)，加入氫氧化銨水溶液(45mL)到250mL單口瓶中，室溫?cái)嚢柽^(guò)夜，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋干體系，加入少量水，抽濾，得淡黃色固體2.4g，收率為88.1%，專(zhuān)利[4]收率86%，m.p.125～128℃，直接用于下一步。

圖3 2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺合成的改進(jìn)路線(xiàn)

1.2.3 2-甲氧基-3-硝基苯并硫代酰胺的合成(7)[5]

將2-甲氧基-3-硝基苯甲酰胺2g(0.010mol)，勞森試劑4.9g(0.012mol)，苯(20mL)依次加入到100mL單口瓶中，80℃反應(yīng)1h，加入冰水淬滅反應(yīng)，乙酸乙酯(3×20mL)萃取，合并有機(jī)相，水(3×20mL)洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，減壓濃縮得黃色固體，經(jīng)硅膠柱層析[洗脫劑：V(石油醚)/V(乙酸乙酯)=8/1]純化得淡黃色固體1.8g，收率為85.1%，m.p.123～127℃。

1.2.4 2-甲氧基-3-硝基苯并亞氨基硫代甲酸甲酯的合成(8)[5]

將2-甲氧基-3-硝基苯并硫代酰胺1.5g(0.007mol)，碘甲烷1.2g(0.008mol)，丙酮(8mL)依次加入到50mL單口瓶中，60℃反應(yīng)1.5h，減壓濃縮，加入適量水出現(xiàn)沉淀，抽濾，晾干得橙黃色固體1.4g，收率為86.3%，m.p.329～334℃。

1.2.5 2-(亞氨基(2-甲氧基-3-硝基苯基)甲基)-1-甲基肼甲酸叔丁酯的合成(9)[6]

將2-甲氧基-3-硝基苯并亞氨基硫代甲酸甲酯1.3g(0.006mol)，1-甲基肼甲酸叔丁酯1.01g(0.007mol)，甲醇10mL依次加入到50mL單口瓶中，40℃反應(yīng)3h，減壓濃縮得棕黃色固體1.5g，收率為79.2%，m.p.185～187℃，直接用于下一步。

1.2.6 3-(2-甲氧基-3-硝基苯基)-1-甲基-1H-1，2，4-三唑的合成(5)[7]

將2-(亞氨基(2-甲氧基-3-硝基苯基)甲基)-1-甲基肼甲酸叔丁酯1.2g(0.004mol)，醋酸(4mL)依次加入到50mL單口瓶中，滴入1滴濃鹽酸，室溫反應(yīng)2h，將其緩慢滴入冰水中，攪拌20分鐘，用氫氧化鈉水溶液調(diào)pH至中性，抽濾得黃色固體0.9g，收率為98.1%，m.p.198～201℃。

1.2.7 2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成(6)[4]

將3-(2-甲氧基-3-硝基苯基)-1-甲基-1H-1，2，4-三唑1g(0.004mol)溶于乙醇(30mL)于100mL單口瓶中，用氮?dú)獯祾邘追昼?，加入Pd-C 0.4g(0.0002mol)，室溫反應(yīng)1.5h，抽濾，并用乙醇洗滌，濾液減壓濃縮得白色固體0.8g，收率為92.3%，專(zhuān)利[4]收率為92%，m.p.78～83℃。

1H NMR (400MHz，DMSO-D6) δ 8.44(s，1H)，6.92(dd，J=7.7，1.0 Hz，1H)，6.82(t，J=7.7 Hz，1H)，6.70(dd，J=7.8，1.0 Hz，1H)，4.95(s，2H)，3.89(d，J=10.6 Hz，3H)，3.64(d，J=11.7 Hz，3H)；MS(ESI) m/z：205.108 4 {[M+H]+}。

2 結(jié) 果

本文在專(zhuān)利[5]的基礎(chǔ)上對(duì)2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成路線(xiàn)進(jìn)行改進(jìn)，對(duì)設(shè)計(jì)合成工藝進(jìn)行優(yōu)化。如專(zhuān)利[4]所示：在中間體4、5的制備過(guò)程中，合成步驟復(fù)雜且產(chǎn)物含雜質(zhì)較多，不易分離，產(chǎn)率低，所以對(duì)此合成路線(xiàn)進(jìn)行改進(jìn)，以3為原料，與勞森試劑反應(yīng)得到7，7與碘甲烷反應(yīng)得到8，8與1-甲基肼甲酸叔丁酯反應(yīng)得到9，將此過(guò)程優(yōu)化后發(fā)現(xiàn)，合成步驟簡(jiǎn)單且易操作，反應(yīng)產(chǎn)物含雜質(zhì)少且容易后處理，未出現(xiàn)專(zhuān)利合成過(guò)程中的缺陷，總產(chǎn)率由專(zhuān)利工藝路線(xiàn)的34.7%提高到45.8%，反應(yīng)條件溫和且易操作，后處理簡(jiǎn)單。

3 討 論

專(zhuān)利[3]中4的制備是先將3在二甲基縮醛中漿化，然后加熱至95℃，然后單獨(dú)制備乙醇乙酸混合液并冰浴，滴加水合肼，經(jīng)套管混合兩步所得產(chǎn)物，反應(yīng)后得棕黃色油狀物，此粗制品含有較多雜質(zhì)，不易分離，且專(zhuān)利[3]中產(chǎn)率只有69%；5的制備需要進(jìn)行手性拆分，復(fù)雜且不易分離，并且專(zhuān)利[3]中產(chǎn)率只有65%。

本文實(shí)驗(yàn)對(duì)2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成工藝進(jìn)行研究：①7與勞森試劑在回流狀態(tài)下反應(yīng)1h得到8，8與1-甲基肼甲酸叔丁酯在40℃反應(yīng)3h即得到9，反應(yīng)時(shí)間短，操作簡(jiǎn)單，反應(yīng)產(chǎn)率高，較文獻(xiàn)所用方法更好；②5的制備過(guò)程中反應(yīng)條件溫和，在醋酸及少量濃鹽酸中先脫去Boc再環(huán)合即可得到，后處理簡(jiǎn)單，且未產(chǎn)生消旋，產(chǎn)率由專(zhuān)利[3]中的65%提高到98.1%。綜上，本文確定了2-甲氧基-3-(1-甲基-1H-1，2，4-三唑-3-基)苯胺的合成新工藝，對(duì)酰胺取代的雜環(huán)化合物的合成具有非常重要的意義。