金昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者血液樣本血清學(xué)和核酸檢測情況分析

楊靜 梁丹丹

【摘要】目的：了解金昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者血液樣本血清學(xué)檢測和核酸檢測情況。方法：分別用2種ELISA試劑對我市2017年至2019年14038份無償獻(xiàn)血者樣本進(jìn)行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP檢測，對ELISA檢測陰性的樣本檢測HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA。對HBsAg-/HBV-DNA+獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行血清學(xué)補(bǔ)充試驗。結(jié)果：14038份血液樣本ELISA檢測共檢出陽性188份，陽性率為1.339%，剩余13850份ELISA陰性樣本核酸檢測檢出陽性26份，均為HBV-DNA+。26份HBsAg-/HBV-DNA+樣本血清學(xué)補(bǔ)充試驗中有24份樣本抗-HBc呈陽性反應(yīng)（R），陽性率占92.31%，HBsAg和HBeAg均為陰性。結(jié)論：金昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者血清學(xué)檢測陽性率較高，獻(xiàn)血人群中有較高的梅毒攜帶者，應(yīng)采用金標(biāo)試劑進(jìn)行獻(xiàn)血前篩查。獻(xiàn)血者血液樣本HBsAg經(jīng)ELISA檢測合格后，通過輸血傳播HBV風(fēng)險仍然較高（188/10萬），選擇ELISA聯(lián)合核酸檢測模式能有效降低血液病毒窗口期、OBI等輸血?dú)堄囡L(fēng)險。

【關(guān)鍵詞】血清學(xué)檢測;核酸檢測;無償獻(xiàn)血

[中圖分類號]R512.62 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]2096-5249（2020）15-00-02

《血站技術(shù)操作規(guī)程》（2019版）將血液檢測策略由原來的兩遍酶免修改為HIV、HBV、HCV應(yīng)至少采用核酸和血清學(xué)試劑各檢測一次，對于HIV、HBV、HCV酶免檢測反應(yīng)性標(biāo)本可不再進(jìn)行核酸檢測[1]。本論文對金昌地區(qū)無償獻(xiàn)血者血液樣本血清學(xué)檢測和核酸檢測情況進(jìn)行了統(tǒng)計和分析，目的皆在通過數(shù)據(jù)充分了解樣本檢測質(zhì)量，研究制定更為合理的血液檢測策略，在降低血液報廢率的同時進(jìn)一步提高血液檢測質(zhì)量。

1 材料與方法

1.2材料 收集我市2017年至2019年無償獻(xiàn)血者血液樣本14038份，所有樣本經(jīng)HBsAg膠體金試劑（英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司）和ALT（QL1000多通道生化分析儀）初篩合格。

1.2試劑 ELISA檢測HBsAg、抗-HCV、抗-TP分別由北京萬泰生物藥業(yè)和英科新創(chuàng)（廈門）科技有限公司提供。HIV抗原/抗體由BIO-RAD和北京萬泰生物藥業(yè)提供;核酸檢測試劑（PCR熒光法）由上海浩源生物科技有限公司提供;質(zhì)控品均由北京康徹斯坦生物提供。所用試劑和質(zhì)控血清均在有效期內(nèi)使用。

1.3儀器 ELISA采用Uranus AE120全自動酶免分析儀（深圳愛康）;核酸檢測設(shè)備為JANUAS核酸純化儀，EZ Bead核酸提取儀，ABI7500熒光定量PCR儀。

1.4血清學(xué)檢測 使用兩種廠家試劑對所有樣本進(jìn)行HBsAg、抗HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP檢測，雙試劑檢測均為陰性則判定為血清學(xué)（ELISA）檢測陰性;雙試劑陽性或單試劑為陽性及灰區(qū)則判定為血清學(xué)（ELISA）檢測陽性。

1.5核酸檢測 采用熒光PCR法對ELISA檢測陰性標(biāo)本進(jìn)行核酸檢測，先用8份樣本合并為1個Pool的方式檢測HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA，合并檢測結(jié)果出現(xiàn)反應(yīng)性時，挑出對應(yīng)Pool中的樣本進(jìn)行單人份檢測，結(jié)果為陽性者判定為核酸檢測陽性。

1.6血清學(xué)補(bǔ)充檢測 對核酸檢測HBV-DNA+者，血漿袋取樣后外送定量檢測HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc。

2 結(jié)果

2.1血清學(xué)（ELISA）檢測結(jié)果 14038份樣本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP血清學(xué)檢測，不合格率為1.339%，具體檢測結(jié)果見表1。

2.2核酸檢測結(jié)果 ELISA檢測均陰性的13850份樣本核酸檢測檢出陽性26份，其中HBV-DNA+26份，陽性率為0.188%，HCV RNA 0份，HIV RNA 0份。

2.3核酸檢測陽性樣本血清學(xué)補(bǔ)充試驗結(jié)果 26份HBsAg-/HBV-DNA+乙肝五項結(jié)果中，24份樣本抗-HBc呈陽性反應(yīng)（R），抗-HBc陽性率為92.31%，檢測結(jié)果見表2。

3 討論

14038份樣本HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗體、抗-TP血清學(xué)檢出陽性188份，不合格率為1.339%，高于何輝[2]報道的0.64%，其中抗-TP陽性率最高，為0.442%，說明金昌地區(qū)獻(xiàn)血人群中梅毒攜帶率人數(shù)較多。其次是乙型肝炎病毒（HBV）感染數(shù)量較多，陽性率為0.399%，目前乙型肝炎病毒酶免檢測試劑主要用于HBsAg的檢測，在隱匿性感染、血清轉(zhuǎn)換前窗口期等情況下易發(fā)生HBV漏檢。第三為丙型肝炎，陽性率為0.370%，高于謝家日[3]報道的0.16%，低于涼山地區(qū)0.53%的抗HCV陽性率，我國約有3.2%人口感染HCV，感染人數(shù)高除與獻(xiàn)血人群結(jié)構(gòu)有關(guān)外，還與檢測試劑有關(guān)，采供血機(jī)構(gòu)用于血液篩查的診斷試劑靈敏度高而特異性又相對較低，因而存在相當(dāng)比例的假陽性，尤其是ELISA檢測單試劑反應(yīng)性標(biāo)本，假陽性率更高[4]。第四為艾滋病，此次分析結(jié)果顯示金昌地區(qū)獻(xiàn)血者艾滋病陽性率為0.128%，與實際確認(rèn)陽性率平均為0.142‰（2/14038）比較，低于全國HIV感染率，這與當(dāng)?shù)氐牡土餍幸蛩赜嘘P(guān)，但假陽性率偏高，應(yīng)進(jìn)一步分析原因。

因血清學(xué)抗原抗體檢測“窗口期”較長，而核酸檢測能顯著縮短病毒檢測的窗口期，提高病毒的檢出率，降低輸血傳播病毒的殘余危險度[5]，本次核酸檢測結(jié)果中，13850份ELISA檢測陰性的血液樣本采用核酸檢測后，檢出陽性樣本26份，均為HBV-DNA+，該比例較高（188/10萬），說明ELISA聯(lián)合核酸檢測可優(yōu)勢互補(bǔ)，能降低因ELISA“窗口期”漏檢而導(dǎo)致的經(jīng)輸血傳播HBV的風(fēng)險，有助于進(jìn)一步提高血液檢測質(zhì)量。

血清學(xué)補(bǔ)充試驗中，26例HBsAg-/HBV-DNA+樣本有24例抗-HBc呈陽性反應(yīng)（R），抗-HBc陽性率占92.31%，其中2例（7.69%）僅抗-HBc陽性;6例（23.08%）抗-HBs和抗HBc同時呈陽性反應(yīng);11例（42.31%）抗-HBe和抗HBc同時呈陽性反應(yīng);5例（19.23%）抗-HBs、抗HBe、抗HBc均呈陽性反應(yīng)?？?HBcAb陽性的獻(xiàn)血者不宜獻(xiàn)血，研究發(fā)現(xiàn)這部分獻(xiàn)血者處于感染窗口期或?qū)儆陔[匿性HBV感染。1例（3.85%）抗-HBs呈陽性反應(yīng)，此類獻(xiàn)血者可能之前注射過疫苗但仍被病毒感染。另有1例（3.85%）為HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc均陰性，是否為“窗口期”和或乙肝“隱匿性”感染，還需對獻(xiàn)血者進(jìn)行后續(xù)追蹤檢測[6]，HBsAg和HBeAg均為陰性。

綜上所述，我們應(yīng)增加獻(xiàn)血前梅毒快速篩查，降低源頭不合格血液的采集，同是應(yīng)選擇聯(lián)合檢測模式對獻(xiàn)血者血液標(biāo)本進(jìn)行檢測，以降低經(jīng)輸血傳播病原體風(fēng)險發(fā)生率。

參考文獻(xiàn)

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