化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測乙肝病毒血清的效果

陳 劍 武

(東莞康怡醫(yī)院 東莞 523000)

乙肝是乙型肝炎的簡稱，這是一種臨床常見的慢性傳染性疾病，至今為止，并沒有特效治療方案[1]，早期的準確鑒別、診斷乙肝患者十分重要。臨床醫(yī)學診斷乙型肝炎病毒感染，主要通過標記免疫學的方法來檢驗乙型肝炎病毒血清學指標，化學發(fā)光免疫分析技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗是臨床應用最多的兩種免疫學方法。本研究分別對413例乙肝病毒篩查病人的血液標本采用以上兩種方法進行檢驗，并比較分析了檢驗結(jié)果，現(xiàn)將研究情況報告如下。

1 資料與方法

1.1 資料

參與研究的是2018年6月～2018年12月我院413例乙肝病毒篩查病人，排除原發(fā)性血液疾病、予以確診的乙肝患者以及合并對研究結(jié)果產(chǎn)生影響疾病者。患者中男208例，女205例；年齡25～73歲，平均年齡(42.87±2.56)歲。

1.2 方法

采集413例乙肝病毒篩查病人的靜脈血10mL，離心分離10min，3000轉(zhuǎn)/min，取血清待檢。將血清均分為兩份，分別采用化學發(fā)光法和酶聯(lián)免疫法檢測，每次的質(zhì)控標準是定值參比血清[2]，嚴格按照試劑盒上的說明書規(guī)范操作檢測流程。

化學發(fā)光法：檢測儀器為雅培ARCHITECTi1000sr全自動化學發(fā)光免疫分析系統(tǒng)，檢測血清的方法是雙抗體夾心法，將系統(tǒng)配套的吸頭、反應杯、洗液等檢驗工具放在既定位置上，用棉球蘸取75%的酒精擦拭試劑，培育HBsAg以及生物素標記的HBsAb，然后等待檢測樣本，與親和素標記的磁微粒共同培育，反復的洗滌，讓游離抗原、抗體與復合物相互分離，再加入三丙胺，進行電化學發(fā)光反應，通過激光強度判定HBsAb的濃度，若HBsAb的濃度>10mIU/mL，則屬于陽性，反之判定成陰性[3]。

酶聯(lián)免疫法：檢測儀器為Sinothinker SK201型酶標儀、Heales PW-812型洗板機，試劑購自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司，嚴格按照說明書規(guī)范檢驗。常溫下放置乙肝表面抗原檢測試劑盒半小時，分別加入陽性對照表準液、陰性對照標準液和樣本液，各加入50uL，然后再加入特異性酶50uL。封膜充分震蕩30s使其均勻，在37℃的水浴箱中孵育1h，再加入底物A液1滴與底物B液1滴，在避光環(huán)境下孵育15min，隨后加入1滴終止液。

1.3 觀察評定標準

比較兩種檢測方法的檢出率以及重復率。

1.4 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法的檢出率比較

化學發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法檢出乙肝病毒血清陽性分別為345例、227例，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩種檢測方法的檢出率比較(n)

2.2 兩種檢測方法的重復率比較

化學發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法的高濃度HBsAg含量的批內(nèi)重復率、批間重復率均沒有明顯的統(tǒng)計學差異(P>0.05)；在中低濃度HBsAg含量種，化學發(fā)光法的批內(nèi)重復率、批間重復率均顯著低于酶聯(lián)免疫法，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，見表2。

3 討論

乙肝病毒感染率較高，乙型肝炎病毒病原體除了具有傳

表2 兩種檢測方法的重復率比較

染性之外，甚至使患者病情持續(xù)惡化，發(fā)展為肝硬化、肝癌等嚴重威脅生命的疾病。正因如此，才應準確迅速的檢測乙型肝炎病毒，為提高臨床治療效果創(chuàng)造有利條件。現(xiàn)階段，化學發(fā)光法、酶聯(lián)免疫法是應用最多的兩種乙肝病毒血清的檢驗方法。

酶聯(lián)免疫法的優(yōu)勢是操作簡單，尤其適合大批量血液標本的檢測，試劑成本較低。但通過這種方法檢驗，每個微孔板之間的間隔距離很小，稍有不慎便會導致污染。此外，抗原、抗體試劑有一定的差異性，進一步增加了檢測結(jié)果錯誤的風險，檢測結(jié)果很容易出現(xiàn)假陽性、假陰性，而且靈敏度比較低，很難動態(tài)觀察乙型肝炎病毒感染[4]，即使要檢測低水平的乙型肝炎病毒感染指標同樣存在困難。

化學發(fā)光法幾乎不會受到其它因素的影響，能夠迅速反應，而且靈敏度較高，因此對乙肝病毒血清的檢測結(jié)果更加準確。與酶聯(lián)免疫法比較，化學發(fā)光法中用到的檢測試劑更加穩(wěn)定，耗損更少。該方法的載體是順應性微粒，由電磁鐵控制[5]，檢測具有標準化、自動化的優(yōu)勢，避免了人工操作失誤造成的檢驗誤差，提高了定性定量分析的準確度。除此之外，在電磁鐵的電磁消失的時候，能夠促進游離抗體和復合抗體的相互分離[6]，有效減少了游離抗體導致的假陰性現(xiàn)象，從而提高了檢測的特異性。

本次研究結(jié)果顯示：化學發(fā)光法檢測乙肝病毒血清的陽性率是45.76%，顯著高于酶聯(lián)免疫法30.27%，中低濃度HBsAg含量的重復率明顯低于酶聯(lián)免疫法，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。提示化學發(fā)光法檢測乙肝病毒血清更具有應用價值，值得推廣。