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    中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比值和血小板淋巴細(xì)胞比值在慢性乙肝患者外周血中的變化及其臨床意義

    2020-09-09 08:42:10董遠(yuǎn)峰陳艷炯
    陜西醫(yī)學(xué)雜志 2020年9期
    關(guān)鍵詞:肝功乙肝生化

    董遠(yuǎn)峰,彭 晶,陳艷炯

    1.西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)系(西安710061);2.兵器工業(yè)五二一醫(yī)院質(zhì)量管理處(西安 710065);3.西安市中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科(西安 710021)

    乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)作為引起肝硬化、肝癌的主要病因,備受國內(nèi)外關(guān)注[1]。對(duì)于乙肝的療效監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估,臨床上已有一些指標(biāo),如谷丙轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic pyruvic transaminase,GPT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(Glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)及HBV-DNA等。臨床上發(fā)現(xiàn),有些患者在治療過程中出現(xiàn)病毒再激活而肝功生化等指標(biāo)卻表現(xiàn)為陰性,說明在病毒復(fù)制時(shí),目前反映肝臟損傷的臨床常規(guī)指標(biāo)靈敏性不高,需尋找能更及時(shí)可靠地反映肝臟病毒含量升高、病情改變的指標(biāo)。HBV再激活指HBsAg陽性/抗-HBc陽性或HBsAg陰性/抗-HBc陽性患者接受免疫抑制治療或化學(xué)治療時(shí),HBV-DNA較基線升高≥2 lgIU/ml,或基線HBV-DNA陰性者轉(zhuǎn)為陽性,或HBsAg由陰性轉(zhuǎn)為陽性[2]。有研究證明炎癥反應(yīng)在慢性乙肝發(fā)生、發(fā)展中起重要作用,肝臟的損傷與肝內(nèi)炎癥程度緊密相關(guān)[3]。中性粒細(xì)胞淋巴細(xì)胞比值(Neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)、血小板淋巴細(xì)胞比值(Platelet-lymphocyte ratio,PLR)是簡(jiǎn)單易得的新型亞臨床炎癥標(biāo)志物,是外周血血常規(guī)檢測(cè)指標(biāo)中中性粒細(xì)胞絕對(duì)值/血小板計(jì)數(shù)與淋巴細(xì)胞絕對(duì)值的比值[4]。比值獲得較容易,而且在各級(jí)醫(yī)院都可以開展,便于及時(shí)臨床觀察。近年來研究發(fā)現(xiàn),NLR、PLR可應(yīng)用于許多疾病尤其是一些惡性腫瘤的預(yù)后評(píng)估[5-6]。故本研究選擇NLR、PLR作為研究指標(biāo),探討NLR和PLR在慢性乙肝病毒升高時(shí)的臨床意義,為反映乙肝病情嚴(yán)重程度提供新的客觀評(píng)價(jià)指標(biāo),從而進(jìn)一步為臨床合理治療及評(píng)估乙肝預(yù)后提供新依據(jù)。

    資料與方法

    1 一般資料 選取2018年3月至2019年6月就診于兵器工業(yè)五二一醫(yī)院消化科的慢性乙肝患者194例作為病例組,選取同期健康體檢者40例作為對(duì)照組(NC組)。將病例組患者按照HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果高低分為四個(gè)亞組:病例A組(HBV-DNA含量<100 IU/ml)37例,其中男性25例,女性12例,平均年齡(41.82±10.66)歲;病例B組(HBV-DNA含量e2~e3IU/ml)83例,其中男性53例,女性30例,平均年齡(38.59±11.19)歲;病例C組(HBV-DNA含量e4~e7IU/ml)52例,其中男性35例,女性17例,平均年齡(40.41±13.05)歲;病例D組(含量≥e7IU/ml)22例,其中男性15例,女性7例,平均年齡(36.79±11.15)歲。NC組40例,其中男性26例,女性14例,平均年齡(37.55±12.40)歲。病例組中47例患者發(fā)生HBV再激活,收集這47例患者兩次結(jié)果,分為HBV再激活前和HBV再激活后兩組。病例納入標(biāo)準(zhǔn):所有病例組患者均符合2019年版《慢性乙型肝炎防治指南》中慢性乙肝的診斷標(biāo)準(zhǔn)且均經(jīng)臨床醫(yī)生確診。排除標(biāo)準(zhǔn):①活動(dòng)性感染者;②肝癌等惡性腫瘤患者;③藥物性肝炎、自身免疫性肝炎、酒精性肝炎、遺傳性肝臟疾病等其他肝炎患者;④妊娠;⑤合并甲肝、丙肝、戊肝或其他病毒感染者。病例A、B、C、D四組與NC組一般資料比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。

    2 研究方法

    2.1 標(biāo)本收集:采集研究對(duì)象空腹血,分別檢測(cè)血常規(guī)、肝功生化[GPT、GOT、血清堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)、血清谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(Gamma-glutamyl transferase,GGT)、血清總膽紅素(Total bilirubin,TBIL)、血清總蛋白(Total protein,TP)及血清白蛋白(Albumin,ALB)]和HBV-DNA。

    2.2 試劑儀器:血常規(guī)檢測(cè)采用邁瑞-5390全自動(dòng)血球分儀器,試劑為配套試劑盒;肝功生化采用全自動(dòng)日立7600儀器,試劑為普瑞柏試劑;HBV-DNA儀器采用羅氏cobasZ480全自動(dòng)核酸擴(kuò)增儀,試劑為乙型肝炎病毒核酸定量測(cè)定試劑盒(該產(chǎn)品檢測(cè)下限為100 IU/ml)。所有檢測(cè)均在室內(nèi)質(zhì)控在控下進(jìn)行,檢測(cè)結(jié)果可靠。

    2.3 檢測(cè)方法:①血常規(guī):將血液標(biāo)本充分混勻上機(jī)檢測(cè)。②肝功生化:將血液標(biāo)本離心后上機(jī)檢測(cè)。③HBV-DNA:按照檢測(cè)試劑盒要求,首先提取血清中的DNA,然后將提取出來的DNA作為模板加入反應(yīng)液中,設(shè)置PCR反應(yīng)程序:50 ℃ 2 min,94 ℃ 5 min,94 ℃ 15 s,57 ℃ 30 s,共45個(gè)循環(huán),最后讀取結(jié)果。

    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 選用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。不符合正態(tài)分布的計(jì)量資料,統(tǒng)計(jì)描述為M(P25,P75),采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)比較組間差異,采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)進(jìn)行兩個(gè)關(guān)聯(lián)性樣本的秩和檢驗(yàn)。采用Pearson相關(guān)性分析探討NLR、PLR與其他肝功生化指標(biāo)的相關(guān)性。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    結(jié) 果

    1 各組間NLR、PLR比較 見表1。各組間NLR、PLR比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中,病例C組NLR與NC組、病例A組及病例D組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);NC組PLR與病例C組、病例D組比較,病例A組PLR與病例C組比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。

    表1 各組間NLR、PLR比較[M(P25,P75)]

    2 HBV再激活前后各指標(biāo)的表達(dá)情況 見表2。47例患者乙肝病毒發(fā)生HBV再激活前后,NLR、GPT、GOT、GGT幾個(gè)指標(biāo)組間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    表2 HBV再激活前后各指標(biāo)的表達(dá)情況[M(P25,P75)]

    3 NLR、PLR與肝功生化指標(biāo)相關(guān)性分析 見表3。將病例組194例患者的結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析,NLR與 TBIL 呈正相關(guān)(P<0.05),與TP、ALB呈負(fù)相關(guān)(P<0.05);PLR與TBIL呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。

    表3 NLR、PLR與肝功能生化指標(biāo)相關(guān)性分析

    討 論

    NLR、PLR是近年來新報(bào)道的反映系統(tǒng)炎癥的指標(biāo),因其檢測(cè)方便、快捷,重復(fù)性高,已被廣大研究者關(guān)注并進(jìn)行研究。研究[5-9]表明NLR與PLR在惡性腫瘤、心血管系統(tǒng)疾病、胰腺炎、腎炎等多種疾病的預(yù)后評(píng)估有一定臨床意義。Cai等[10]研究發(fā)現(xiàn),在急慢性肝功能衰竭患者中,比起PLR,NLR可作為獨(dú)立預(yù)測(cè)因子預(yù)測(cè)患者預(yù)后。另有研究[11]發(fā)現(xiàn),NLR和平均血小板體積在預(yù)測(cè)慢性乙型肝炎纖維化中有一定意義,NLR值和肝纖維化程度呈負(fù)相關(guān)。Gong等[12]研究表明,NLR與肝損傷嚴(yán)重程度有關(guān),NLR高低順序?yàn)槁灾匦透窝?慢性肝炎>正常對(duì)照組;且NLR與生存率有關(guān)聯(lián),NLR越高,無復(fù)發(fā)生存率越低。郭鴻雁等[13]研究結(jié)果提示,病情越嚴(yán)重,NLR越高。而Kekilli等[14]研究發(fā)現(xiàn),乙型肝炎肝硬化患者NLR較正常人顯著降低。李曉鶴等[15]研究表明,在對(duì)使用干擾素抗病毒治療的患者后期隨訪中,獲持續(xù)性病毒應(yīng)答者NLR較未獲得或獲部分病毒學(xué)應(yīng)答和血清學(xué)應(yīng)答者明顯升高,即治療效果較好者NLR較高,治療不佳者NLR較低。故目前NLR在乙肝患者中的表達(dá)高低尚存有爭(zhēng)議。由于NLR、PLR是較容易獲取的臨床指標(biāo),對(duì)患者經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)較小,因此研究這兩項(xiàng)指標(biāo)在慢性乙肝病程的表達(dá)變化有重要的臨床意義。

    本研究中,按照HBV-DNA含量高低對(duì)病例組患者進(jìn)行分組,NLR由低到高依次為病例C組、病例B組、NC組、病例A組、病例D組,組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);PLR由低到高依次為病例D組、病例C組、病例B組、病例A組、NC組,組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。將總的病例組與NC組比較,NLR增高,PLR降低,與既往研究[10,16]一致。本研究發(fā)現(xiàn)PLR隨著HBV-DNA含量增高而降低,NLR總體是增高,但最低值出現(xiàn)在病例C組。病例C組是病毒中含量組,考慮到該組患者可能處于機(jī)體耐受狀態(tài),肝功能相對(duì)得以保護(hù),中性粒細(xì)胞數(shù)量正?;蜉^低,淋巴細(xì)胞數(shù)量較多,所以比值低。與病例A組比較,該期機(jī)體炎癥反應(yīng)小,故中性粒細(xì)胞數(shù)量少,導(dǎo)致NLR低。與病例組D組比較,這種現(xiàn)象可能與肝臟“二次打擊”學(xué)說有關(guān)[17],終末期肝病患者機(jī)體免疫系統(tǒng)、炎癥反應(yīng)被激活,大量炎性因子釋放入血,使得肝組織進(jìn)一步受損。此外,大量炎癥反應(yīng)引起淋巴細(xì)胞大量凋亡,而處在肝血竇中的中性粒細(xì)胞入血,從而使NLR、PLR發(fā)生改變。

    本研究中47例患者發(fā)生HBV再激活現(xiàn)象,采用自身前后對(duì)照比較NLR、PLR、肝功生化等指標(biāo)的變化情況,結(jié)果NLR、GPT、GOT、GGT比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明NLR高低與HBV再激活具有一致性,與HBV-DNA含量具有一致性,且與患者的GPT、GOT、GGT趨勢(shì)相一致,這與既往研究[13]相一致。因此,隨著HBV含量的增高,NLR是增高的。另外,相關(guān)性分析顯示,NLR與TBIL呈正相關(guān),與TP、ALB呈負(fù)相關(guān);PLR與TBIL呈負(fù)相關(guān)。與既往研究[16]相一致,在慢性肝炎病情進(jìn)展中,隨著病情加重,TBIL是增加的,TP及ALB是降低的。因此,慢性乙肝病情與NLR呈正相關(guān),與PLR呈負(fù)相關(guān)。

    綜上所述,在HBV發(fā)生再激活時(shí)慢性乙肝患者NLR增高,PLR下降,二者可在一定程度上反映肝內(nèi)病毒含量高低水平。持續(xù)動(dòng)態(tài)觀測(cè)NLR、PLR的變化對(duì)慢性乙肝病情發(fā)展有一定預(yù)判作用。

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