張彥平,賀軍濤,殷 鑒,田 瑩,姬 婧
西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(西安 710004)
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(Systemic lupus erythematosus,SLE)是一種多發(fā)于女性,與自身抗體免疫相關(guān),可促使機體多系統(tǒng)損害、多臟器慢性損傷的疾病[1-3],臨床上多見為腎損害,即為狼瘡性腎炎(Lupus nephritis,LN)[4]。LN可能與循環(huán)免疫復(fù)合物在腎臟沉積、局部補體激活、原位免疫復(fù)合物形成、自身抗體直接作用以及T細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)等有關(guān)[5]。有研究報道,在腎臟損害時,腎小球濾過負荷增加或濾過功能障礙,腎小管重吸收功能降低,血清中某些小分子量蛋白在血液循環(huán)中由腎臟大量入尿,使尿液中一些相關(guān)指標(biāo)水平增高[6]。本研究通過對SLE患者尿中免疫球蛋白輕鏈kappa型(U-kap)和lambda型(U-lam)水平的分析,探討其在SLE患者腎臟受損中的臨床意義,進而評估其在LN臨床監(jiān)測和預(yù)后處理中的價值。
1 研究對象 收集2017年1月至2018年12月西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院診斷的SLE患者50例為SLE組,其中男性7例,女性43例;年齡11~77歲,平均(40.6±19.5)歲。收集對象均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會1997推薦的SLE分類診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有其他惡性腫瘤者;②心、肝、腎等重要臟器發(fā)生病變者;③高血壓、糖尿病等慢性疾病者。另收集20例健康體檢者為對照組,其中男性10例,女性10例;年齡11~62歲,平均(35.9±11.3)歲。兩組間年齡及性別比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
2 研究方法
2.1 尿液標(biāo)本采集和處理:留取被測者晨尿10 ml于一次性塑料試管中,要求留中段清潔尿(晨尿指在膀胱中留存達6~8 h后晨起空腹排出的第一次尿液,避開月經(jīng)期)。貼上被測者信息條碼,盡快送檢。待測標(biāo)本常規(guī)離心(3000 r/min)處理10 min,2 h內(nèi)分析完畢。
2.2 尿液標(biāo)本檢測:U-kap、U-lam由專業(yè)檢驗人員采用西門子全自動特種蛋白分析儀(BN-II系統(tǒng))進行檢測。采用散射比濁法,通過光路系統(tǒng)檢測抗原抗體復(fù)合物散射的光信號,并通過V Lin-Integral、定時動態(tài)測定法等方法學(xué)計算出蛋白濃度值。試劑為原裝配套試劑,具體操作嚴(yán)格遵從本科室SOP文件及相關(guān)試劑盒說明書。U-lam、U-kap參考值分別為0~3.84 mg/L和0~7.25 mg/L。
3 觀察指標(biāo) 比較兩組尿液中U-kap、U-lam水平,并分析它們在 SLE患者腎臟損傷中的診斷價值。U-kap>7.25 mg/L為陽性,U-lam>3.78 mg/L為陽性。
4 統(tǒng)計學(xué)方法 運用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對SLE組和對照組的數(shù)據(jù)進行處理。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差的形式描述,SLE組和對照組比較采用單因素方差分析。采用ROC曲線分析U-kap、U-lam在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎臟損傷中的診斷價值。P<0.05即表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
1 SLE患者尿液U-kap、U-lam檢測結(jié)果 見表1。在50例SLE患者尿液中,U-kap陽性率為82%,U-lam陽性率為80%。
表1 SLE患者尿液U-kap、U-lam陽性檢測結(jié)果
2 兩組患者尿液U-kap、U-lam水平比較 見表2。經(jīng)單因素方差分析發(fā)現(xiàn),SLE組患者尿液U-kap、U-lam水平明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
表2 兩組患者尿液U-kap、U-lam水平對比 (mg/L)
3 尿液U-kap、U-lam水平區(qū)分SLE和對照組能力比較 見圖1、2。U-kap水平在SLE組有2個離群值,U-lam水平在SLE組有1個離群值,且箱式圖中SLE患者U-kap、U-lam水平均明顯高于對照組。
圖1 U-kap診斷SLE腎損傷箱式圖
圖2 U-lam診斷SLE腎損傷箱式圖
4 U-kap、U-lam ROC曲線分析 見表3(圖3)。SLE患者和對照組U-kap、U-lam在ROC曲線下面積(AUC)有統(tǒng)計學(xué)差異。經(jīng)ROC分析發(fā)現(xiàn),U-kap=6.94 mg/L對腎損傷診斷預(yù)測的敏感度為94%,特異度為100%,AUC為0.951;U-lam=3.81 mg/L對腎損傷診斷預(yù)測的敏感度為94%,特異度為100%,AUC為0.967。
表3 U-kap、U-lam診斷SLE腎損傷ROC曲線分析結(jié)果
圖3 U-kap、U-lam診斷SLE腎損傷ROC曲線
SLE是有多臟器損害的自身免疫性結(jié)締組織病,多發(fā)于年輕女性?;颊哐逯幸钥购丝贵w等多種自身抗體升高為主,早期患者可有乏力、低熱、體質(zhì)量降低的表現(xiàn),典型表現(xiàn)為皮疹,以雙顴骨和鼻梁部位的蝶形紅斑為明顯特征;常會出現(xiàn)關(guān)節(jié)肌肉疼痛及腎臟損傷[7]。當(dāng)疾病累及腎臟,臨床上會表現(xiàn)為不可逆性腎損害,稱為狼瘡性腎炎(LN)[4]。目前診斷LN的金標(biāo)準(zhǔn)依然是腎活檢,但是由于創(chuàng)傷性大、敏感性低等原因,沒有大面積開展[8]。敏感性高、特異性強且創(chuàng)傷小的檢測一直是研究的熱點,目前主要集中在腎小球、腎小管損傷及補體等方面[9]。
正常腎小球濾過膜允許通過分子量為20000~40000的低分子量蛋白[10]。免疫球蛋白的二聚體或輕鏈單體屬于不完全抗體球蛋白,分為λ型和κ型,其分子量分別為44000和22000,蛋白電泳時可在α2至γ球蛋白區(qū)帶間的某個部位出現(xiàn)M區(qū)帶,多位于γ區(qū)帶及β-γ區(qū)。它們可通過腎小球濾過膜濾出,但是其含量超過近曲小管所能吸收的能力極限時,則從尿中排出,稱為輕鏈尿,在尿中排出率明顯多于其他蛋白。腎小管對其具有重新吸收作用,通過腎臟排泄時可抑制腎小管對其他蛋白成分的重吸收,并可損害遠曲、近曲小管,因而導(dǎo)致腎功能障礙以及形成蛋白尿,同時有白蛋白及其他蛋白成分排出[11]。據(jù)文獻[12]報道,當(dāng)腎臟損傷時,尿中會出現(xiàn)大量輕鏈蛋白,由尿中排出時可造成腎小管嚴(yán)重損傷,檢測尿中免疫球蛋白輕鏈λ型和κ型水平能及時反映腎小管的重吸收功能和受損程度,有利于對疾病診斷和治療療效的監(jiān)測。
本研究中,對SLE組和對照組尿液中U-kap、U-lam進行檢測,SLE組患者的水平顯著高于對照組。在預(yù)測系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者腎早期損傷ROC曲線分析中,U-kap=6.94 mg/L對腎損傷診斷預(yù)測的敏感度為94%,特異度為100%,AUC為0.951;U-lam=3.81 mg/L對腎損傷診斷預(yù)測的敏感度為94%,特異度為100%,AUC為0.967。表明兩種指標(biāo)均具有較好的預(yù)測價值,與一些關(guān)于腎臟早期損傷指標(biāo)的文獻報道[13-15]相一致。提示當(dāng)患者U-kap>6.94 mg/L、U-lam>3.81 mg/L時,可能已經(jīng)有腎小管損傷,與本實驗室參考范圍U-kap(0~7.25 mg/L)、U-lam(0~3.84 mg/L)基本一致。
綜上所述,尿液中U-kap、U-lam可以作為SLE患者腎臟受損時特異性比較高的監(jiān)測指標(biāo),對判斷腎損傷病情的嚴(yán)重程度有一定的指導(dǎo)作用。然而,本研究樣本量較小,僅對各檢測項目進行了單項檢測分析,為了更好地反映檢測指標(biāo)U-kap、U-lam在SLE患者腎損傷中的意義,后續(xù)將擴大樣本量并同時進行多種檢測指標(biāo)聯(lián)合診斷。