2017—2019年安徽省部分禽場禽白血病定點監(jiān)測

（安徽省動物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

禽白血?。╝vian leucosis，AL）是由C 型反轉(zhuǎn)錄病毒群的禽白血病病毒（avian leucosis virus，ALV）引起禽類不同組織、細(xì)胞的良性及惡性腫瘤性疾病。目前已從雞群中分離到A—E 5 個亞群和J 亞群ALV[1]。其中，A/B 亞群主要引起禽淋巴肉瘤白血病，J 亞群致病性和傳染性比原有的經(jīng)典亞群強(qiáng)[2]，對禽類的危害程度也比經(jīng)典ALV 高。《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012—2020年）》提出，國內(nèi)全部種禽場禽白血病要在2020年達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。近年來，安徽省各地區(qū)均有不同程度的禽白血病流行[3-4]。本研究在2017—2019年持續(xù)對安徽省部分禽場不同品種家禽進(jìn)行了ALV 的J 抗體、A/B 抗體和p27 抗原的流行病學(xué)調(diào)查和抽樣監(jiān)測，了解安徽省禽場ALV 感染情況，以期為進(jìn)一步開展全省禽白血病凈化工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 禽場選擇

2017—2019年，結(jié)合《國家動物疫病定點監(jiān)測實施方案》要求，綜合考慮安徽省禽類養(yǎng)殖特點和飼養(yǎng)規(guī)模，選取有代表性和可操作性的固定監(jiān)測縣，共選擇59 個不同規(guī)模禽場進(jìn)行禽白血病監(jiān)測。在各規(guī)模場點，兼顧禽類的不同類型、代次和品種，同時選取疫病凈化示范創(chuàng)建項目和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局選定的部分種禽場（圖1）。

1.2 樣品采集

根據(jù)《國家動物疫病定點監(jiān)測實施方案》中的動物飼養(yǎng)規(guī)模劃分標(biāo)準(zhǔn)，在選定的小規(guī)模（養(yǎng)殖量＜10 000 只）、中規(guī)模（10 000 只≤養(yǎng)殖量≤100 000 只）和大規(guī)模（養(yǎng)殖量＞100 000 只）商品代禽場，分別采集血清樣品100、50、30 份，在種雞場每場采集50 份蛋清；在《國家種畜禽場主要動物疫病監(jiān)測實施方案》選定的安徽省祖代禽場名單中，每場采集100 份血清和150 份蛋清。

1.3 樣品檢測

ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測，均使用ELISA 方法。使用酶標(biāo)儀（TECANSunris，瑞士帝肯公司），96 通道全自動洗板機(jī)（ELx405，美國博騰儀器有限公司）等儀器，按照IDEXX 公司的ALV-p27 抗原檢測試劑盒以及ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體檢測試劑盒說明書進(jìn)行檢測和結(jié)果判斷。

1.4 數(shù)據(jù)分析

樣品中的ALV-J 抗 體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原檢測為陽性即為陽性個體，只要檢出1 份陽性個體的禽場即為陽性禽場。使用SPSS 22.0 軟件計算P值，用卡方檢驗分析不同組間差異。用ArcGIS 10.6 軟件，標(biāo)注選定禽場空間分布。

2 結(jié)果與分析

2.1 時間分布

2017—2019年，血清樣品的ALV-J 抗體陽性率分別為22.51%、15.12%和26.11%，呈先降后升的趨勢，場陽性率分別為75.00%、42.86%、40.00%，呈逐年下降趨勢，2017年和2018年差異極顯著（P＜0.01）；血清樣品的ALV-A/B 抗體陽性率分別為14.98%、4.10%和4.07%，場陽性率分別為62.50%、46.43%、60.00%，均呈逐年下降趨勢，2017年和2018年差異極顯著（P＜0.01），2018年和2019年差異不顯著（P＞0.05）。2017—2019年檢測的2 100 份種蛋蛋清樣品中，個體陽性率分別為7.08%、6.00%和4.20%，呈逐年下降趨勢，且ALV-J 抗體陽性率均高于ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原，但差異不顯著（P＞0.05）。具體結(jié)果見表1～2。

2.2 場間分布

從不同養(yǎng)殖規(guī)模看，ALV-J 抗體和ALV-A/B抗體的場陽性率，大規(guī)模場最高，中規(guī)模場次之，小規(guī)模場最低；而個體陽性率，中規(guī)模場最高，大規(guī)模和小規(guī)模相差不大。ALV-p27 抗原場陽性率和個體陽性率，大規(guī)模場均高于中規(guī)模場。具體結(jié)果見表3。

從不同場點類型看，祖代場的ALV-J 抗體和ALV-p27 抗原個體陽性率最高，而商品場的ALV-A/B 抗體的個體陽性率最高，其中祖代場的ALV-J 抗體陽性率與父母代場差異極顯著（P＜0.01），商品場的ALV-A/B 抗體與祖代場和父母代場差異極顯著（P＜0.01），祖代場與父母代場差異不顯著（P＞0.05）；祖代場的ALV-p27 抗原陽性率與父母代場和商品場差異不顯著（P＞0.05）。具體結(jié)果見表4。

表1 2017—2019年禽白血病血清樣品檢測結(jié)果統(tǒng)計

表2 2017—2019年禽白血病場陽性檢測結(jié)果統(tǒng)計

表3 不同養(yǎng)殖規(guī)模禽白血病檢測結(jié)果統(tǒng)計

表4 不同場點類型禽白血病檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.3 種間分布

不同養(yǎng)殖品種上，ALV-J 抗體個體陽性率，黃羽肉雞＞蛋雞＞鴨＞白羽肉雞＞地方品種雞；ALV-A/B 抗體個體陽性率，鴨＞白羽肉雞＞黃羽肉雞＞蛋雞＞地方品種雞（表5）。

表5 不同養(yǎng)殖品種禽白血病個體陽性率檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.4 空間分布

2017—2019年監(jiān)測的59 個場點分布于8 個市（縣），大部分位于安徽南部，ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體、ALV-p27 抗原個體陽性率呈現(xiàn)一定的區(qū)域分布特點，其中ALV-J 抗體個體陽性率，貴池區(qū)最高（51.90%），長豐縣最低（0）；ALV-A/B 抗體個體陽性率，太湖縣最高（15.6%），寧國市最低（0）；ALV-p27 抗原個體陽性率，貴池區(qū)最高（9.00%），廣德市（0）、寧國市（0）最低。具體結(jié)果見表6。

表6 不同地區(qū)禽白血病個體陽性率統(tǒng)計 %

2.5 血清型分布

2017—2019年分別檢出ALV 抗體陽性樣品352、311 和154 份，其中ALV-J 和ALV-A/B 亞群混合感染樣品分別為51、8 和9 份。由表7 可見，陽性樣品中，ALV-J 亞群單一感染占比逐年增高，而ALV-A/B 亞群單一感染和混合感染占比逐年降低。

表7 2017—2019年陽性樣品中ALV-J 和ALV-A/B 亞群感染占比 %

3 討論

安徽是禽類養(yǎng)殖大省，唐文中[5]、胡曉田[6]均在安徽省的禽類樣品中監(jiān)測到ALV-J 抗體、ALV-A/B 抗體和ALV-p27 抗原。本次調(diào)查結(jié)果顯示：2017—2019年檢測的3 275 份禽血清樣品和2 100 份蛋清樣品中，ALV-J 抗體和ALV-A/B 抗體平均陽性率為19.36%和7.66%，ALV-p27 抗原個體平均陽性率為5.90%；59 個場點中，超過半數(shù)檢出ALV-J 抗體陽性。

不同養(yǎng)殖規(guī)模和場點類型均能檢測到該病。禽白血病是垂直傳播性疾病，因而種禽場是防控重點。劉麗平等[7]2019年檢測了山東省8 個種雞場，發(fā)現(xiàn)ALV-J 抗體個體陽性率為12.51%。本次調(diào)查結(jié)果顯示，祖代場的ALV-J 抗體個體陽性率最高，表明安徽省需要加強(qiáng)種禽場的禽白血病凈化。安徽榮達(dá)禽業(yè)自開展禽白血病凈化后，連續(xù)3年的ALV-J 抗體陽性率低于9.00%，說明只要通過連續(xù)系統(tǒng)的凈化工作，嚴(yán)格加強(qiáng)祖代場和父母代場凈化，可以有效控制禽白血??；本次調(diào)查結(jié)果還顯示，商品代場的ALV-A/B 抗體陽性率明顯高于祖代場和父母代場，說明商品代場的ALV-A/B 亞群凈化工作更加艱巨。但只要堅持開展祖代場和父母代場凈化，在種禽場開產(chǎn)后及時采集血清或種蛋進(jìn)行檢測，淘汰陽性雞[8]，就可以從源頭上控制該病，從而可以有效降低商品代場的感染率；本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，祖代場蛋清中ALV-p27 抗原檢出率較高。對于種禽，檢測蛋清中ALV-p27 抗原可用于研究雞群的感染狀態(tài)[9]。只有及時將有陽性檢出的整個家系的雛雞全部淘汰，同時淘汰相應(yīng)種母雞[10]，對種禽場的產(chǎn)蛋雞和種用公雞開展禽白血病凈化[11]，才能更好地降低通過種蛋傳播該病的風(fēng)險。

不同禽種均可感染ALV。2006—2011年，全國70%的蛋雞群暴發(fā)ALV-J 流行[12]。韋平等[13]在廣西14 個地方品種雞和其他11 種非雞類家禽中均檢測到禽白血??；彭昊等[14]在地方品種鴨和鵝體內(nèi)也檢測到ALV-A/B 抗體。本次調(diào)查顯示，不同品種禽類的A LV-J 抗體陽性率差異較大（2.00%～26.24%），其中黃羽肉雞和蛋雞檢出率最高，鴨的ALV-A/B 抗體陽性率較高，說明ALV 感染禽類范圍不斷擴(kuò)大。因此，目前不僅要加強(qiáng)雞群的禽白血病凈化，也要重視鴨、鵝等禽類的監(jiān)測和凈化，引導(dǎo)各禽場有計劃、有步驟地按照國家制定的有關(guān)凈化程序，分批、分區(qū)、分階段進(jìn)行凈化，建立核心種群，讓養(yǎng)殖戶從凈化場引進(jìn)種蛋。通過積極有效開展凈化工作，可以提高家禽的生產(chǎn)效率，降低動物疫病發(fā)病率和死亡率[15]。

2017—2019年ALV-J 和ALV-A/B 混合感染情況均呈下降趨勢。但由于混合感染引起的發(fā)病情況比單一感染更為嚴(yán)重[16]，且不同亞群病毒在同一雞群或同一雞體內(nèi)傳播，存在不同亞群發(fā)生基因重組的潛在威脅[17]，因此仍然需要加強(qiáng)混合感染的控制。

4 結(jié)論

定點監(jiān)測表明，安徽省禽白血病流行較為嚴(yán)重，尤其是大型場、祖代場以及肉雞和鴨的ALV感染風(fēng)險較高。因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對此類高風(fēng)險禽場和禽群的禽白血病監(jiān)測，持續(xù)推進(jìn)禽白血病凈化工作。